桑葉酸性蛋白多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及生物學(xué)藥理活性的研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)以桑葉(Folium Mori)為研究材料，提取、分離、純化得到一酸性 蛋白多糖，并初步研究了其理化性質(zhì)和生物學(xué)藥理活性。 實(shí)驗(yàn)分為四個(gè)部分： 第一部分主要研究桑葉酸性蛋白多糖的提取、分離、純化及其結(jié)構(gòu)鑒定：桑葉粉碎脫脂后加水煎煮，減壓濃縮提取液，醇沉，干燥得桑葉粗多糖。經(jīng)D1O1大孔樹脂，脫蛋白，脫色，DEAE-32陰離子纖維素柱及Sephadex G-100葡聚糖凝膠柱層析對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，得桑葉多糖純品。通

2、過IR、UV、HPLC、<'13>C-NMR、<'1>H-NMR、氨基酸組成測(cè)定等方法分析其理化性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：該多糖為桑葉酸性蛋白多糖(APFM)，分子量超過50萬，且分布均一，組成單體為α-型吡喃糖，含糖醛酸和硫酸基，主要由D-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-果糖、D-葡萄糖、D-半乳糖組成，其摩爾比為8.91：2.71：1.00：3.75：6.04。其蛋白質(zhì)部分含17種氨基酸，其中7種為人體必需氨基酸。 第二部分主要研究AP

3、FM的抗氧化作用：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明APFM可以有效清除化學(xué)模擬體系中形成的HO·和·O<,2><'->，抑制小鼠臟器在該體系和糖尿病模型中MDA的形成和積累，明顯減輕HO·誘導(dǎo)的小鼠肝線粒體的腫脹和模型小鼠臟器中SOD活性的降低，并都存在明顯的量效關(guān)系?？梢哉J(rèn)為APFM具有良妊的體外和體內(nèi)的抗氧化作用，是一種有效的自由基淬滅劑。 第三部分主要研究APFM對(duì)重金屬鉛和鎘脅迫下人正常腎細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的緩解作用：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，低濃度的APFM能

4、促進(jìn)人正常腎細(xì)胞HEK293的生長(zhǎng)，并能顯著緩解鉛和鎘對(duì)HEK293細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，其中25μg·ml<'-1>和50μg·ml<'-1>濃度試驗(yàn)組的效果最明顯。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，鉛和鎘對(duì)HEK293細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用有一個(gè)漸進(jìn)的累積過程，這種脅迫作用存在濃度和時(shí)間兩個(gè)因素，APFM能在一定時(shí)間和濃度范圍內(nèi)緩解由重金屬引起的HEK293細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，但不能恢復(fù)細(xì)胞正常的生長(zhǎng)狀態(tài)。 第四部分主要研究APFM對(duì)四氧嘧啶所致糖尿病