SDF-1-CXCR4軸在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)胰島再生中的作用.pdf

1、目的：
　　有研究表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）能夠分泌基質(zhì)細(xì)胞衍生因子（SDF-1），而SDF-1與其特異性受體CXCR4結(jié)合后形成具有修復(fù)受損組織，參與血管生成等多種生物學(xué)功能的單位。本實(shí)驗(yàn)通過分離、純化大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，并在體外一定條件下培養(yǎng)、擴(kuò)增。并將培養(yǎng)的第3代細(xì)胞移植入鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖尿病大鼠體內(nèi)，觀察同種異體MSCs移植入受體后，SDF-1/CXCR4軸在促進(jìn)殘存胰島及其周圍新生血管增殖中的作用。

2、
　　方法：
　　將SD大鼠處死后，無菌條件下取出股骨和脛骨，DMEM培養(yǎng)液沖洗髓腔，200μm尼龍網(wǎng)過濾除去大的組織團(tuán)塊。細(xì)胞懸液離心(1000rpm,10min)后,收集細(xì)胞接種于含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)。通過腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ，65mg/kg）構(gòu)建糖尿病大鼠模型。誘導(dǎo)成功的糖尿病大鼠隨機(jī)分為A組（MSCs移植組）、B組（MSCs移植+SDF-1/CXCR4軸阻斷劑AMD組）和C組（糖尿病對(duì)照組）

3、，另設(shè)D組（正常大鼠對(duì)照組）。將傳至3代的MSCs移植入糖尿病大鼠體內(nèi)，觀察各組大鼠的生存狀態(tài)，每3天采鼠尾靜脈血用血糖儀檢測各組血糖水平，采用放免法檢測血清中空腹和餐后不同時(shí)間點(diǎn)的胰島素水平、Elisa法檢測SDF-1水平。并于移植MSCs后第30天取出各組大鼠胰腺和血清，胰腺組織采用H-E染色和免疫組織化學(xué)染色法觀察CD31、PCNA、PDX-1在胰腺組織的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、A組殘存胰島周圍可見新生血管，C

4、D31、PCNA、PDX-1染色陽性率分別為（71.2±5.3）％、（76.5±4.5）％、（69.8±6.7）％；B組和C組殘存胰島周圍基本未見新生血管，CD31、PCNA、PDX-1染色陽性率B組為（7.4±2.1）％、（5.5±3.7）％、（8.8±2.9）％，C組為（5.7±3.1）％、（6.2±1.4）％、（3.5±1.6）％，A組與B組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），B組與C組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）。2、移植后第

5、25天，A組糖尿病大鼠血糖水平基本正常，低于B組和C組，而胰島素水平明顯高于B組和C組（p<0.05）。3、A組與B組血清SDF-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)，但都明顯高于C組（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　通過分離、純化、培養(yǎng)、擴(kuò)增可以獲得大量的MSCs，MSCs移植后明顯的促進(jìn)了糖尿病受體殘存胰島再生及其周圍新生血管的形成，SDF-1/CXCR4軸特異性阻斷劑-AMD3100能抑制MSCs逆轉(zhuǎn)高血糖，促進(jìn)胰