溫化膠囊對人乳腺癌MCF-7和T-47D細(xì)胞株細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響.pdf

1、目的：研究溫化膠囊對人乳腺癌MCF-7和T-47D細(xì)胞株細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響。 方法：實驗分四個階段進(jìn)行。第一階段，使用高效液相色譜法對溫化膠囊進(jìn)行指紋圖譜分析，并以烏頭堿標(biāo)準(zhǔn)品為對照定量分析溫化膠囊所含烏頭堿；第二階段，對MCF-7和T-47D細(xì)胞株進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)，設(shè)立空白對照組、75μg/ml溫化膠囊組及250μg/ml溫化膠囊組3組，觀察7天，繪制生長曲線，采用重復(fù)測量的方差分析法對細(xì)胞生長曲線進(jìn)行線間比較。利用倒置

2、相差顯微鏡觀察兩細(xì)胞株加藥前后的形態(tài)學(xué)改變。第三階段，使用流式細(xì)胞儀分析溫化膠囊對MCF-7和T-47D細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響。第四階段，研究溫化膠囊聯(lián)合5-Fu對MCF-7和T-47D細(xì)胞增殖的影響。常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞，分6組進(jìn)行實驗：空白對照組、75μg/ml溫化膠囊組、250μg/ml溫化膠囊組、1μg/ml5-Fu組、75μg/ml溫化膠囊聯(lián)合1μg/ml5-Fu組、250μg/ml溫化膠囊溫化膠囊聯(lián)合1μg/ml5-Fu組，繪制生長曲

3、線，計算細(xì)胞倍增時間。通過計算死亡細(xì)胞比例比較6組間細(xì)胞毒作用的強弱。 結(jié)果：繪制出溫化膠囊高效液相色譜指紋圖譜，測得溫化膠囊烏頭堿含量為1.01±0.01μg。溫化膠囊對MCF-7和T-47D細(xì)胞具有增殖抑制作用，其作用的強度與藥物劑量呈正相關(guān)。細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，加入溫化膠囊后兩種細(xì)胞株的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)均出現(xiàn)空泡樣結(jié)構(gòu)。隨著藥物作用時間的延長，空泡樣結(jié)構(gòu)的數(shù)量進(jìn)行性增加，并可融合成大泡。流式細(xì)胞儀檢查顯示：與對照組相比，加藥后S期