泰安某豬場(chǎng)豬瘟病毒的檢測(cè)及疫苗免疫效果評(píng)價(jià).pdf

1、豬瘟是由黃病毒科的豬瘟病毒感染引起的豬的一種熱性、高度接觸傳染性疾病，該病自19世紀(jì)爆發(fā)以來，一直影響著全球的養(yǎng)豬業(yè)，每年給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。豬瘟兔化弱毒疫苗的使用，使得豬瘟在我國的流行范圍及造成的損失大大降低，但近年來在常規(guī)免疫豬瘟疫苗的豬場(chǎng)又有豬瘟病例的爆發(fā)，發(fā)病豬群主要集中在保育階段，病豬多表現(xiàn)為熱性疾病的一般性癥狀，發(fā)病率高、死亡率也不低；母豬被感染后多表現(xiàn)為一過性繁殖障礙，當(dāng)與其它病原微生物混合感染后，也能明顯影響豬場(chǎng)的生產(chǎn)

2、成績。2014年11月泰安某豬場(chǎng)保育豬群發(fā)生以高熱（40～41℃）、精神沉郁、食欲不振、四肢內(nèi)側(cè)及耳尖發(fā)紺為主要特征的急性熱性傳染病，且常規(guī)性治療措施如退燒、肌注頭孢噻呋鈉及飲水給予電解多維和葡萄糖等對(duì)該病無明顯療效。為了明確引起此次疫情的致病病原，在流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，開展了病理解剖、組織病理學(xué)檢查、分子生物學(xué)檢測(cè)、病毒分離與鑒定、病毒基因擴(kuò)增測(cè)序及同源性比對(duì)等試驗(yàn)。大體剖檢及組織病理學(xué)檢查結(jié)果表明病豬具有豬瘟病毒感染的特征性病變?nèi)?/p>

3、漿液性-出血性淋巴結(jié)炎、脾臟梗死、病毒性腦炎、腸道淋巴組織壞死及固膜性腸炎等，初步顯示該病可能由豬瘟病毒感染引起，并排除細(xì)菌感染的可能。分子生物學(xué)及病毒分離結(jié)果表明，送檢的3份病料中僅有豬瘟病毒被檢出且被分離得到（SDTA2015）。隨后我們對(duì)豬瘟病毒E2基因全長進(jìn)行了克隆和測(cè)序，E2基因全長為1119個(gè)堿基，編碼373個(gè)氨基酸；相似性分析表明，SDTA2015與其它參考毒株的核苷酸相似性介于81.3％～97.4%之間，氨基酸相似性介于

4、87.7%～98.1%之間。分離株與8個(gè)各基因亞型的參考毒株相比，與3.4基因亞型的TWN株相比具有最低的核苷酸（81.8%）和氨基酸相似性（88.7%）。而與2.1基因亞型的參考毒株具有更高的核苷酸（90.4%～96.2%）和氨基酸相似性（93.8%～97.6%）。其中SDTA2015與2.1d亞型參考毒株（SDQS）的相似性最高，核苷酸為96.2%，氨基酸為97.6%。另外，新分離株與2.1b亞型的同源性高于2.1a或2.1c，表明

5、2.1b亞型和2.1d亞型具有較高的相似度，這與之前的報(bào)道一致。隨后，我們將新分離株SDTA2015與27株參考序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，結(jié)果表明，這28條序列被分到了3個(gè)基因群（1，2，3）中，共包括8個(gè)基因亞群（1.1～1.4，2.1～2.3，3.4）。其中，2.1亞群能被進(jìn)一步劃分為2.1a，2.1b，2.1c及一個(gè)新被定義的2.1d基因亞群。此次分離得到的豬瘟毒株在進(jìn)化樹中屬于2.1亞群，與傳統(tǒng)的石門毒株（1.1）或兔化弱毒疫苗

6、毒株（HCLV，1.1）具有較大的不同。
　　待該場(chǎng)發(fā)病豬只康復(fù)且疫情消除后，豬場(chǎng)恢復(fù)了正常的生產(chǎn)和免疫，遂對(duì)該場(chǎng)不同階段豬只進(jìn)行采樣，以判定其免疫狀態(tài)并對(duì)免疫效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。自該場(chǎng)共采集血液樣本131份，陽性樣本有106份，整體陽性率為80.92%，整體豬瘟抗體水平不錯(cuò)。不同階段豬群抗體陽性率在60.00%～86.67%之間，呈現(xiàn)出一定的差異性。其中以生產(chǎn)公豬的抗體陽性率最高，育肥豬的抗體陽性率最低，表明育肥后期豬瘟抗體水平下降，

7、育肥豬對(duì)豬瘟病毒的易感性較高。此外，妊娠母豬及保育豬的豬瘟抗體陽性率均低于85.00%，說明抗體水平不是太好。
　　總的來說，該場(chǎng)此次疫情確系豬瘟病毒感染引起，且致病病原屬于2.1亞型中的一個(gè)新的亞型2.1d，表明2.1d亞型的豬瘟病毒已在我省廣泛傳播和流行，并能造成豬只急性發(fā)病和死亡。關(guān)于新分離株的毒力和致病性特征尚不明確，需要進(jìn)一步試驗(yàn)研究。此外，抗體檢測(cè)結(jié)果表明，該場(chǎng)在疫情撲滅后，及時(shí)調(diào)整了豬瘟疫苗的免疫程序，新的免疫程序能