梨莖尖和葉片高效離體繁殖再生體系建立.pdf

1、建立穩(wěn)定、高效的葉片不定梢再生體系是梨轉基因成功的關鍵環(huán)節(jié)。為此本試驗以梨離體芽苞作外植體，在初代培養(yǎng)誘導試管苗成功的基礎上，分別以MS、AS和1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，附加不同的激素組合，根據(jù)培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件，通過正交試驗設計并結合方差分析和多重比較，研究不同培養(yǎng)基對梨試管苗芽增殖影響；葉片愈傷組織的誘導及愈傷組織的分化和試管苗生根的影響。試驗研究獲得的主要結果如下：
　　 1、外植體消毒及初代培養(yǎng)
　　 將外

2、植體用75％酒精處理10s后再用0.1％HgCl2消毒4min時，取得最佳消毒效果。外植體芽誘導的適宜培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。
　　 2、增殖培養(yǎng)
　　 鴨梨莖段增殖的適宜培養(yǎng)培養(yǎng)條件是以1/2MS為基本培養(yǎng)基，附加0.8mg/L的6-BA；0.3mg/L的IBA及0.5mg/L的GA3，增殖倍數(shù)為3.83；黃冠梨莖段增殖的適宜培養(yǎng)條件是以AS為基本培養(yǎng)基，附加0.8mg/L的6

3、-BA；0.1mg/L的IBA及0.5mg/L的GA3，增殖倍數(shù)為3.56；基本培養(yǎng)基對梨莖段增殖和生長無顯著影響；不同濃度的6-BA處理，差異達到了顯著水平。
　　 3、愈傷組織的誘導與再生
　　 試驗從兩個梨品種葉片上再生出不定芽，建立起黃冠和鴨梨葉片再生不定芽體系。葉片離體培養(yǎng)以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度TDZ和IBA，結果以1/2MS附加2.5mg/L的TDZ及0.5mg/L的IBA適宜鴨梨葉片誘