桃梨離體再生體系建立及試管苗種質(zhì)保存研究.pdf

1、本試驗以木本果樹桃和梨的成熟種子、成年莖段為材料，進行桃梨的再生體系建立和離體種質(zhì)保存研究。試驗主要以山毛桃和鴨梨為主要研究對象，進行桃和梨離體再生體系的建立、試管苗離體保存研究，并利用火焰原子吸收分光光度計對桃正常苗與莖尖枯死苗微量元素含量差異分析，以期為桃梨的離體繁殖和離體種質(zhì)保存提供科學依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： 1.桃離體再生體系建立。桃種子最佳消毒方法：75％酒精(30s)+0.1％的HgCl2(5 min)+無菌水(2

2、4 h)+0.1％的HgCl2(3 min)；種子去除種皮萌發(fā)率最高；芽苗的最佳增殖培養(yǎng)基為G+6-BA0.5 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1培養(yǎng)基；桃成年莖段在福州取材的最佳時期為秋季9-10月份，最佳誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1。 2.桃胚離體培養(yǎng)和種質(zhì)保存研究。研究表明：桃胚培養(yǎng)苗頂端莖尖枯死在山毛桃、白風、青州蜜桃等不同品種上普遍存在：培養(yǎng)基G上苗的枯死率小于MS

3、、B5、White培養(yǎng)基：變溫或適當?shù)蜏乜梢詼p少或消除頂端莖尖枯死：培養(yǎng)基G附加蔗糖80 g·L-1可以延緩發(fā)生時間或減少莖尖枯死的數(shù)量；低濃度的6-BA和GA3能夠延緩或減輕莖尖枯死的發(fā)生，隨著濃度提高枯死率有上升趨勢。桃試管苗生根可以延長保存時間，苗也比較健壯；桃最佳保存培養(yǎng)基為(G+KT0.5 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1瓊脂。 3.桃正常苗與頂端莖尖枯死苗子葉微量元素含量

4、差異分析。利用火焰原子吸收分光光度計檢測結(jié)果表明：在離體培養(yǎng)條件下莖尖枯死苗中鐵的含量比正常苗子葉中的含量低，元素Cr的含量比后者高；在離體培養(yǎng)枯死苗子葉中Mn的含量比室外培養(yǎng)正常苗子葉的含量低，而Cu、Zn的含量比后者高；元素Cu和Zn在離體培養(yǎng)條件下死苗的子葉中的含量比未萌發(fā)種子中的含量低，而Cr的含量比后者高。 4.梨高效再生體系的建立。研究結(jié)果表明：梨種子在離體培養(yǎng)時需去除種皮，最佳萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+30 g·L-1蔗糖

5、+6 g·L-1瓊脂，發(fā)芽率為86.67％；最佳增殖培養(yǎng)基為L2培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1，增殖系數(shù)為3.12；生根最佳誘導培養(yǎng)基為g3培養(yǎng)基：1/4MS+NAA 0.3 mg·L-1+IBA0 g·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1，生根率為63.26％；生根數(shù)最佳誘導培養(yǎng)基為：1/2 MS+NAA0 mg·L-1+IBA0.4 mg

6、·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂6 g·L-1，生根數(shù)為4.125條/株。 5.梨試管苗離體種質(zhì)保存。研究結(jié)果表明：利用光照強度500 lx、添加活性炭3 g·L-1、大量元素減3/4、添加PP333 10～15 mg·L-1、瓊脂+水的空白培養(yǎng)基、添加甘露醇10 g·L-1結(jié)合30 g·L-1蔗糖、添加瓊脂8 g·L-1、添加甘露醇60 g·L-1、添加ABA0.5 mg·L-1等方法對梨試管苗進行了保存，最好的已保存6個