三種桃離體再生體系建立及內(nèi)源激素含量的變化研究.pdf

1、本文以紅花山桃，筑波5號、光核桃為試材，在建立穩(wěn)定高效的桃離體快繁體系的基礎(chǔ)上，同時建立了以紅花山桃胚軸、子葉、增殖葉片、再生葉片為外植體的離體再生體系，并對其再生過程中內(nèi)源激素含量的變化進(jìn)行了分析，以期探討內(nèi)源激素的作用機(jī)制并對桃組織培養(yǎng)中外源激素的合理添加提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　 1.建立并優(yōu)化了以紅花山桃、筑波5號、光核桃莖段為外植體的離體快繁體系。結(jié)果表明：最佳外植體消毒方法為75％酒精浸洗30s，0.1％Hg

2、Cl2+吐溫浸洗7min，清水沖洗6次；紅花山桃最佳取材時間3-4月，筑波5號最佳取材時間4-5月，光核桃最佳取材時間3-5月；三種桃的最佳取材部位為樹冠下部；紅花山桃和光核桃最佳繼代增殖培養(yǎng)基為LP+6-BA1.0 mg/L+IBA0.2 mg/L，筑波5號最佳最佳繼代增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.2 mg/L；紅花山桃和光核桃適宜的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IAA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L，筑波5

3、號生根困難。
　　 2.以紅花山桃胚軸、子葉、增殖葉片、再生葉片為外植體，了解影響桃再生的因素，初步建立了桃再生體系。試驗(yàn)表明：紅花山桃胚軸的形態(tài)學(xué)上部其再生率和外植體再生不定芽平均數(shù)量均比下部高。將胚軸接種至再生培養(yǎng)基LP+TDZ3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L，暗培養(yǎng)7 d后轉(zhuǎn)入光下培養(yǎng)，胚軸再生率可達(dá)46.53％；將子葉預(yù)培養(yǎng)21d，接種至再生培養(yǎng)基MS+TDZ4.0 mg/L+NAA0.5 mg/L，子葉再生率可

4、達(dá)30.76％；將1.0-2.0cm的增殖葉片遠(yuǎn)軸面接觸再生培養(yǎng)基LP+TDZ3.5 mg/L+NAA0.05 mg/L+葡萄糖，暗培養(yǎng)21 d后轉(zhuǎn)入不含生長素的再生培養(yǎng)基LP+TDZ3.5 mg/L+葡萄糖，光下培養(yǎng)，增殖葉片再生率可達(dá)29.70％，不定芽平均再生數(shù)為1.87；將1.0-2.0cm的再生葉片遠(yuǎn)軸面接觸再生培養(yǎng)基LP+TDZ3.5 mg/L+NAA0.05 mg/L+葡萄糖，暗培養(yǎng)21 d后轉(zhuǎn)入不含生長素的再生培養(yǎng)基LP

5、+TDZ3.5 mg/L+葡萄糖，光下培養(yǎng)，再生葉片再生率可以達(dá)到36.34％，不定芽平均再生數(shù)為2.18。
　　 3.酶聯(lián)免疫吸附法測定桃離體培養(yǎng)過程中不同發(fā)育階段各外植體內(nèi)源激素含量變化的研究，明確了影響桃不定芽再生的內(nèi)源激素。結(jié)果表明：不同桃組培苗的內(nèi)源激素含量不同，含量高的桃（如紅花山桃）具有較高的增殖系數(shù)；GA和LAA共同作用促進(jìn)愈傷組織的生長；不定芽的分化與ZR/IAA的比例有密切關(guān)系，ZR/IAA的比值大有利于誘導(dǎo)