豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染細胞的差異蛋白組學研究.pdf

1、2006年5月，在我國的江西省首先發(fā)生了豬“高熱病”，隨后蔓延至全國。該傳染病具有發(fā)病地區(qū)多、流行范圍廣、死亡率極高等特點，致使200多萬頭豬受到感染，40多萬頭豬死亡，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失。該病于7月份在福建省出現(xiàn)，并迅速傳播。我們實驗室收集了來自疑似發(fā)生了“高熱病”的不同豬場病料，進行了病毒分離和鑒定，運用RT-PCR技術檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory s

2、yndrome virus，PRRSV)。 利用雙向電泳技術對體外培養(yǎng)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒071030株和福州株進行接種正常Marc-145細胞產(chǎn)生的蛋白質表達差異，尋找與毒力相關的蛋白質。將071030株和福州株接種正常Marc-145細胞于37℃、5％CO2的環(huán)境中培養(yǎng)72 h，從細胞中獲得蛋白。第一向電泳用pH3-10非線性IPG膠條進行等電聚焦，第二向電泳用SDS-PAGE凝膠再分離蛋白，經(jīng)過銀染，圖像掃描后，利用軟

3、件分析處理圖像。在正常Marc-145細胞、接種071030株和福州株的細胞的蛋白質圖譜中分別檢測出188、252、286個蛋白質點，它們的蛋白質分子質量分布基本相似；在所檢測到的差異蛋白質點中，其中有12個蛋白質點共存在于正常細胞和接種福州株細胞中，有2個蛋白質點共存在于正常細胞和接種071030株細胞中，有1個蛋白質點只存在于接種福州株細胞中，有3個蛋白質點只存在接種071030株細胞中，而接種071030株和福州株的細胞共有9個蛋