犬瘟熱病毒揚州分離株生物學特性研究及融合區(qū)序列分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、對2001年3月至5月期間就診于揚州大學動物醫(yī)院疑似感染犬瘟熱病毒的犬作流行病學調(diào)查和實驗室診斷.采用Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)分離病毒,傳代細胞出現(xiàn)了明顯的細胞變圓、脫落及拉網(wǎng)現(xiàn)象;負染電鏡可觀察到病毒粒子;接種病料的細胞IFA檢測可見特異性的亮綠色熒光,基于上述診斷結(jié)果可確診為犬瘟熱病毒感染.利用雙瓊脂空斑技術對分離病毒進行克隆,并命名為CDV-YZ-0101,CDV-YZ-0102,CDV-YZ-0103,它們對氯仿敏感,對酸

2、、熱抵抗力弱,血凝試驗其只對禽類紅細胞呈弱陽性,細胞毒力(TCID<,50>)分別為10<'-4.6>~10<'-5.0>/ml、10<'-4.4>~10<'-4.9>/ml、10<'-4.8>~10<'-5.1>/ml;形成空斑直徑為0.4~0.6mm.為建立一套完整的檢測犬瘟熱的分子生物學方法,該研究中設計了一對特異引物,采用經(jīng)典法提取犬瘟熱病毒OP株(標準病毒)的RNA,對PCR循環(huán)參數(shù)進行了搜索,篩選出PCR反應最佳程序為:96

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