新城疫病毒B-,95-株血凝素-神經(jīng)氨酸酶基因的克隆與表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為控制新城疫的爆發(fā),急需研制基因工程苗.為此,從澳大利亞某大學(xué)獸醫(yī)病理系引進一株NDV熱穩(wěn)定性天然弱毒B95株,并選取其表面抗原血凝素-神經(jīng)氨酸酶的編碼基因為目的基因,根據(jù)國外已發(fā)表的序列,設(shè)計一對引物,利用RT-PCR技術(shù)擴增出了NDVB95株HN基因.經(jīng)瓊脂糖電泳檢測,將大小與預(yù)計分子量一致的片段純化后連接到PGEM-T-easy克隆載體中,再轉(zhuǎn)化大腸桿菌TGI感受態(tài)細胞,得到的轉(zhuǎn)化子經(jīng)分子量比較、PCR鑒定和酶切分析篩選陽性克隆.

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