版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastl disease virus,NDV)所致的一種高度接觸性的傳染病,能引起雞、火雞、鴨、鴿子和鸚鵡等多種禽類的感染和死亡,給世界養(yǎng)禽業(yè)造成巨大損失,因此國際獸疫局將其定為Ⅰ類傳染病。目前,對(duì)該病的防制仍以疫苗免疫為主。但傳統(tǒng)的疫苗存在著價(jià)格昂貴,操作繁瑣,免疫保護(hù)期不長,免疫不全以及毒力返強(qiáng)等問題。隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入,現(xiàn)已明確F蛋白是NDV的主要
2、保護(hù)性抗原之一,在疫苗的研制中具有重要的意義。 本實(shí)驗(yàn)選擇乳酸菌作為受體菌株表達(dá)外源基因F,即可將乳酸菌的益生功能和外源基因的特異性免疫相結(jié)合,從而研制新城疫病毒F基因工程乳酸菌。目的在于為開發(fā)研制預(yù)防新城疫毒病的基因工程乳酸菌口服疫苗奠定基礎(chǔ)。 在本研究中,用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)技術(shù),從NDV的總RNA中擴(kuò)增了1662bp的F基因。通過T4 DNA連接酶將其直接連接于克隆質(zhì)粒載體pMD-18-T中,轉(zhuǎn)化
3、至受體菌JM109中,通過質(zhì)粒提取、酶切鑒定、PCR鑒定、序列測定,證明重組質(zhì)粒pMD-18-T-F中含有NDV F基因。經(jīng)氨基酸序列分析,表明克隆了NDV的主要保護(hù)性抗原F全基因的抗原表位區(qū)。然后,將NDV主要保護(hù)性抗原F克隆至可在大腸桿菌和乳酸菌中穿梭表達(dá)的具有紅霉素和胸苷酸基因的雙標(biāo)記表達(dá)載體。經(jīng)過優(yōu)化電轉(zhuǎn)化條件,將重組質(zhì)粒pW425et-F轉(zhuǎn)化到乳酸菌受體菌中,通過乳酸菌質(zhì)粒的提取,酶切分析和PCR方法鑒定陽性克隆質(zhì)粒。將篩選好
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 新城疫病毒河北分離株F基因的克隆、植物表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)化馬鈴薯的研究.pdf
- 豬流行性腹瀉病毒COE基因乳酸菌表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)研究.pdf
- 抗新城疫病毒單鏈抗體(scFv)載體構(gòu)建及表達(dá)研究.pdf
- 新城疫病毒F基因在真核及原核表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá).pdf
- 新城疫病毒(DNV)HN基因真核表達(dá)重組質(zhì)粒的構(gòu)建.pdf
- 表達(dá)新城疫病毒ZJ1株F基因的重組馬立克氏病毒的構(gòu)建.pdf
- 表達(dá)新城疫病毒HN蛋白重組鴨腸炎病毒的構(gòu)建.pdf
- 雞新城疫病毒F、HN基因的真核表達(dá)及免疫效力研究.pdf
- 新城疫病毒M基因的克隆表達(dá)及其初步應(yīng)用.pdf
- 13357.乳酸菌融合表達(dá)載體的構(gòu)建及α淀粉酶基因的克隆與表達(dá)
- 組成型乳酸菌表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)效果的比較.pdf
- 表達(dá)新城疫病毒HN基因的重組雞痘病毒及其免疫效力.pdf
- 表達(dá)基因Ⅶ型新城疫病毒F或HN糖蛋白的重組馬立克氏病毒構(gòu)建及其免疫效力試驗(yàn).pdf
- 雞新城疫病毒HeB02株的分離鑒定及其F基因的克隆和表達(dá).pdf
- 應(yīng)用新城疫病毒反向遺傳操作系統(tǒng)—構(gòu)建L表達(dá)質(zhì)粒.pdf
- 新城疫病毒F基因和HN基因的克隆、表達(dá)及其ELISA抗體檢測方法的初步建立.pdf
- 表達(dá)新城疫病毒F、HN基因重組雞痘病毒疫苗的遺傳穩(wěn)定性和免疫效力試驗(yàn).pdf
- 新城疫病毒La Sota株F和HN基因的克隆表達(dá)及免疫原性分析.pdf
- 雞新城疫病毒F48E9的純化及其HN基因片段的原核表達(dá).pdf
- 應(yīng)用新城疫病毒反向遺傳操作系統(tǒng)—構(gòu)建NP、P表達(dá)質(zhì)粒.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論