中國不同地區(qū)蜂膠揮發(fā)油的化學(xué)組成及生物活性.pdf

1、蜂膠是蜜蜂從植物的幼芽或樹干上采集的樹脂、揮發(fā)油等分泌物,經(jīng)過蜜蜂反復(fù)咀嚼加工,與自身腺體分泌物和一定比例的蜂蠟、花粉混合轉(zhuǎn)化而成的一種具有芳香氣味和黏性的天然固體膠狀物。它是一類重要藥理功能的天然產(chǎn)物,一直作為民間的傳統(tǒng)醫(yī)藥來使用。研究表明,蜂膠具有抗菌、抗病毒、抗氧化、消炎及抗腫瘤等活性。蜂膠的化學(xué)組成多樣,目前從蜂膠中鑒定到的化合物就有300多種,包括酚類、萜烯類、多糖、維生素等多種化合物。蜂膠揮發(fā)油約占原膠總組成的10％,且具有

2、豐富的生物活性,但是目前對于蜂膠揮發(fā)油研究并不多。
　　 中國地理氣候分布類型多樣,膠源植物也十分廣泛,為了更好的了解到蜂膠揮發(fā)油這一重要組分的特點(diǎn),本文以中國不同地區(qū)收集到的蜂膠為對象,對蜂膠揮發(fā)油化學(xué)成分、生物活性(抗氧化、抑菌)方面做以下方面的研究。
　　 1.以內(nèi)蒙古蜂膠為實(shí)驗(yàn)材料,采用傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法(HD)、同時蒸餾萃取法(SDE)和動態(tài)頂空進(jìn)樣(DHS)提取制備揮發(fā)性成分,結(jié)合GC-MS檢測結(jié)果,了解內(nèi)蒙古

3、蜂膠的揮發(fā)性化學(xué)成分組成并獲得其優(yōu)化提取方法。對獲得的蜂膠揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析,從HD所得樣品中檢測出了12種化合物,主要是3-甲基-2-丁烯-1-醇(26.81％),苯乙醇(17.16％)、桉葉油醇(14.53％),2-甲氧基-4-乙烯基苯酚(9.47％),α-沒藥醇(4.29％)等。從SDE法所得樣品中檢測出了40種化合物,主要是α-沒藥醇(20.19％),2-甲基-3-丁烯-2-醇(10.76％),3-甲基-2-丁烯-1-醇(8.

4、28％),奠(5.21％)等。從DHS法所得樣品中檢測出了70種化合物,主要是十七烷(6.96％),菲(3.99％),芳姜黃酮(3.80％),1-(1,5-二甲基-4-己烯基)-4-甲基-苯(3.41％),十八烷(3.23％),1-甲氧基-4-(1-丙烯基)-苯(2.59％),十六烷(2.47％)等。研究表明:DHS得到的揮發(fā)性物質(zhì)種類最多,SDE次之,HD最少。DHS是用于蜂膠揮發(fā)物檢測的最優(yōu)方法,但不能獲得供進(jìn)一步生物活性檢測的樣品

5、；如需獲得生物活性檢測樣品,SDE是一個更好的方法。
　　 2.采用DHS結(jié)合GC-MS方法分析中國23個不同地理來源蜂膠揮發(fā)油化學(xué)成分,結(jié)果表明,不同地區(qū)蜂膠揮發(fā)油化學(xué)成分組成和含量上存在差異。DHS-GC-MS分析中,總共鑒定得到84種化學(xué)成分,倍半萜13個,單萜2個,酚醇19個,醛酮類12個,酸酯類12個,烴類12個,其他類14個。蜂膠揮發(fā)性成分主要為α-雪松烯(0.08-8.12μg/μL),γ-桉葉油醇(0.04-4.

6、33μg/μL),3-甲基-3-丁烯-1-醇(0.42-24.74μg/μL),α-萜品醇(O.02-1.31μg/μL),乙酸(2.23-21.99μg/μL),芐醛(0.13-10.23μg/μL),苯甲醇(0.01-7.65μg/μL),雪松醇(0.03-0.90μg/μL),乙酸乙酯(0.10-4.64μg/μL),γ-杜松烯(0.05-2.58μg/μL),苯乙醇(0.02-5.60μg/μL),苯乙烯(0.06-5.81μg

7、/μL)等。聚類和主成分分析,所有樣品根據(jù)相似系數(shù)的異同程度,蜂膠可以大致分為三類,其中溫帶蜂膠和亞熱帶蜂膠被分在了不同的兩種類別中,不同氣候蜂膠揮發(fā)油的化學(xué)成分具有差異性,而不同顏色蜂膠之間的差異不明顯。
　　 3.采用SDE-GC-MS從來自不同地區(qū)的25個蜂膠樣本共鑒定出406種成分。其中單萜類30種,倍半萜類94種,酚醇類31種,醛酮類56種,酸酯類90種,烴類81種,其他24種,其中主要的成分為愈創(chuàng)木醇(0.56-13

8、.61％),苯甲醛(0.07-8％),苯甲醇(0.08-17.67％),雪松醇(0.48-37.46％),γ-桉葉油醇(1.81-21.48％),苯乙醇(0.03.14.43％),2-甲氧基-4-乙烯基苯酚(0.31-14.06％),姜黃烯(0.23-5.9％),苯甲酸芐酯(0.06-6.59％),苯乙酮(0.08-2.05％),3,4-二甲氧基苯乙烯(0.31-14.06％),壬醛(0.1-1.48％),α-雪松烯(0.05-1.98

9、％),β-桉葉油醇(6.1-27.89％)等。聚類和主成分分析結(jié)果表明,來自于亞熱帶、熱帶地區(qū)和溫帶地區(qū)的蜂膠之間有一定的差別。而從蜂膠的顏色上來看,不能顯示出各樣品之間的差異。
　　 4.采用還原力測試方法和清除DPPH自由基活性對揮發(fā)油的抗氧化能力進(jìn)行了分析。不同地區(qū)蜂膠揮發(fā)油還原力測定中,以山東蜂膠抗氧化能力最強(qiáng)(K=0.0649),廣東、云南蜂膠較弱(分別為K=0.0086,K=0.0118和0.0102)。清除DPPH

10、自由基活性中,不同地區(qū)蜂膠的抗氧化表現(xiàn)出不同的活性大小,其中山東蜂膠清除DPPH自由基活性最強(qiáng),其清除自由基指數(shù)AM為2.533,最弱的湖南永州蜂膠,AAI只有0.19。蜂膠地理氣候類型和蜂膠顏色對蜂膠揮發(fā)油的抗氧化活性有密切的關(guān)系,并且以溫帶地區(qū)蜂膠和黃色蜂膠的還原力和清除自由基活性較強(qiáng)。
　　 5.采用濾紙片擴(kuò)散法和連續(xù)稀釋法,以大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、青霉、曲霉、毛霉及根霉等九種菌作為受試菌

11、,分別測定蜂膠揮發(fā)油抗菌活性和最小抑菌濃度(MIC),結(jié)果表明,蜂膠揮發(fā)油對細(xì)菌和真菌都有一定程度的抑制作用,但抑制活性強(qiáng)弱不同。各地蜂膠揮發(fā)油的抑菌活性存在不同水平的差異。
　　 通過對蜂膠揮發(fā)油的化學(xué)成分、抗氧化活性和抗菌活性研究結(jié)果來看,不同蜂膠樣品之間都或多或少存在著差異,這主要與蜂膠提取分析方法、氣候和膠源植物不同有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明了中國蜂膠具有較為豐富的揮發(fā)性成分,并且有一定程度的抗氧化和抑菌活性,可以考慮作為一種天然的