B7-H4在胃癌細胞中表達及其表達下調(diào)誘導細胞凋亡的研究.pdf

1、目的:通過檢測協(xié)同刺激因子B7-H4在胃癌組織中的表達，并分析其與臨床病理特征的相關性，以及研究B7-H4表達下調(diào)對胃癌細胞增殖、遷移和凋亡的影響，以期探討B(tài)7-H4在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及為探索胃癌治療新靶點建立理論基礎。
　　方法:采用免疫組化技術檢測高通量組織芯片上胃癌組織中B7-H4表達，并分析其表達與胃癌臨床病理特征的相關性;采用Western blot檢測胃癌細胞株SGC-7901、MGC-803、KATOⅢ、AGS中

2、B7-H4蛋白表達，并選擇一株表達較高的胃癌細胞用于B7-H4基因干擾試驗;使用化學合成的B7-H4特異siRNA沉默胃癌細胞中B7-H4表達;并采用CCK-8實驗、細胞遷移實驗、AnnexinⅤ/PI流式檢測凋亡實驗及原位末端標記（TUNEL）實驗分別檢測細胞增殖、遷移和凋亡變化情況;采用Western blot檢測胃癌細胞中凋亡相關信號分子活化型caspase-3(cleaved caspase-3)、活化型caspase9(cle

3、aved caspase-9)、抑凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表達情況。
　　結果:B7-H4在胃癌組織中高表達率為41.8％(130/311)，其表達與淋巴結轉移和TNM分期明顯相關，淋巴結轉移組和未轉移組B7-H4高表達率分別為51.2％和35.3％(p=0.005)，Ⅰ～Ⅱ期組和Ⅲ～Ⅳ期組B7-H4高表達率分別為34.4％和52.3％(p=0.002)，而與性別、年齡、病理分級、侵襲程度無關（p＞0.05）。B7-

4、H4蛋白在胃癌細胞株KATOⅢ、AGS和MGC-803中呈高表達，而在胃癌細胞株SGC-7901中低表達或幾乎不表達;下調(diào)B7-H4在MGC-803細胞中表達可抑制MGC-803細胞增殖和遷移能力(p＜0.05)，并且可促進MGC-803細胞凋亡(p＜0.05)。此外，B7-H4表達下調(diào)可激活MGC-803細胞中caspase-3和caspase-9，增加了Bax/Bcl-2蛋白比值。
　　結論:B7-H4在胃癌組織中呈高表達，并