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1、,,2024/2/29,臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ),第六章 其他體液檢驗(yàn),第一節(jié) 腦脊液檢查,概述腦脊液(cerebrospinal fluid,CSF)存在于各腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管內(nèi)無(wú)色透明液體的細(xì)胞外液主要由腦室脈絡(luò)叢主動(dòng)分泌和超濾作用形成。正常成人腦脊液的產(chǎn)生和重吸收保持動(dòng)態(tài)平衡,總量維持在120ml~180ml左右,約占體液總量的1.5%。,,腦脊液循環(huán),第一節(jié) 腦脊液檢查,腦脊液生理功能:①保護(hù)腦和脊髓免受外力震蕩損
2、傷。②調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓力變化。③供給腦、脊髓營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),運(yùn)走代謝產(chǎn)物。④調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)堿儲(chǔ)量、維持正常pH。⑤轉(zhuǎn)運(yùn)生物胺類(lèi)物質(zhì),參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)。,第一節(jié) 腦脊液檢查,,腦脊液與臨床疾病腦脊液中含有一定的細(xì)胞和化學(xué)成分,腦脊液的性狀和壓力受多種因素的影響。中樞神經(jīng)系統(tǒng)任何部位發(fā)生器質(zhì)性病變時(shí),如感染、腫瘤、外傷、水腫和阻塞等均可引起腦脊液的性狀和化學(xué)成分發(fā)生改變。檢測(cè)腦脊液中各項(xiàng)指標(biāo)的變化,對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷、治療
3、效果觀察和預(yù)后判斷均具有重要價(jià)值。,第一節(jié) 腦脊液檢查,,第一節(jié) 腦脊液檢查,,1,一、標(biāo)本采集與處理,,2,二、一般性狀檢查,,3,三、顯微鏡檢查,,4,四、化學(xué)檢查,一、標(biāo)本采集與處理,,(一)標(biāo)本采集與運(yùn)送腦脊液標(biāo)本由臨床醫(yī)師通過(guò)腰椎穿刺的方式采集,必要時(shí)可從小腦延髓池或側(cè)腦室穿刺采集。穿刺時(shí)應(yīng)盡量避免混入血液。穿刺后將腦脊液標(biāo)本分別收集于3個(gè)無(wú)菌容器中,每管1ml~3ml,第1管用于細(xì)菌學(xué)檢查,第2管用于化學(xué)和免疫學(xué)檢查
4、,第3管用于一般性狀和顯微鏡檢查。腦脊液標(biāo)本采集后應(yīng)立即由專(zhuān)人或?qū)S玫奈锪飨到y(tǒng)運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。為保證標(biāo)本輸送途中的安全性,應(yīng)采用封閉的容器轉(zhuǎn)運(yùn),避免過(guò)度震蕩。如發(fā)生標(biāo)本溢灑,應(yīng)立即采用0.2%過(guò)氧乙酸或含2000mg/L有效氯的消毒液或75%乙醇溶液消毒污染區(qū)域。,一、標(biāo)本采集與處理,,(二)標(biāo)本接收與拒收實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)對(duì)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本進(jìn)行核對(duì)和查驗(yàn),對(duì)標(biāo)本容器標(biāo)識(shí)清晰、無(wú)明顯外溢情況、標(biāo)本量符合檢驗(yàn)項(xiàng)目要求的腦脊液標(biāo)本予以接收。
5、標(biāo)本接收后應(yīng)盡快檢驗(yàn),一般不超過(guò)1小時(shí)。如不能及時(shí)檢驗(yàn),則將標(biāo)本保存于2℃~8℃環(huán)境中,并保證在4小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。標(biāo)本久置可造成細(xì)胞變形或破壞,葡萄糖等物質(zhì)分解,細(xì)菌溶解,從而影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。如標(biāo)本存在信息不全、唯一性標(biāo)識(shí)不清、標(biāo)本外溢明顯或量不足、或者存在其他影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素時(shí)應(yīng)予以拒收,記錄并及時(shí)將標(biāo)本不合格的情況反饋給送檢科室。,一、標(biāo)本采集與處理,,(三)檢驗(yàn)后標(biāo)本處理腦脊液內(nèi)可能含有各種病原微生物,必須視為
6、有潛在感染性的物質(zhì)。標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接收、檢驗(yàn)及檢驗(yàn)后處理等過(guò)程要符合實(shí)驗(yàn)室生物安全原則,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中注意個(gè)人生物安全防護(hù),檢驗(yàn)后的標(biāo)本及容器、檢測(cè)過(guò)程中接觸標(biāo)本的材料皆應(yīng)按《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》及《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》的相關(guān)規(guī)定處理。,二、一般性狀檢查,,(一)顏色通過(guò)肉眼觀察腦脊液的顏色。1. 參考區(qū)間 無(wú)色或淡黃色。2. 臨床意義 中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生感染、出血、腫瘤時(shí),腦脊液的顏色可出現(xiàn)不同程度的改
7、變。(1)紅色:腦脊液中混有血液時(shí),因紅細(xì)胞量的多少和出血時(shí)間的不同,可使標(biāo)本呈紅色、紅褐色、淡紅色等。如標(biāo)本為血性,需區(qū)別穿刺性損傷(新鮮出血)或腦及蛛網(wǎng)膜下腔出血(陳舊性出血)。,二、一般性狀檢查,,,腦脊液新鮮出血和陳舊性出血的鑒別,二、一般性狀檢查,(2)黃色:腦脊液呈淡黃色稱(chēng)為腦脊液黃變癥,常見(jiàn)于腦及蛛網(wǎng)膜下腔的陳舊性出血。蛛網(wǎng)膜下腔梗阻所致腦脊液滯留時(shí),或疾病引起腦脊液內(nèi)蛋白質(zhì)含量>1.5g/L時(shí)也可呈黃色,顏色的深淺與蛋
8、白質(zhì)含量成正比;當(dāng)血清膽紅素>171μmol/L或腦脊液中膽紅素>8.6μmol/L時(shí),腦脊液可呈黃色;標(biāo)本采集后未及時(shí)檢測(cè),由于紅細(xì)胞破壞,血紅蛋白降解常呈淡黃色;進(jìn)食大量的黃色素、類(lèi)胡蘿卜素或腦脊液中含有黑色素時(shí)腦脊液也可呈黃色。,,二、一般性狀檢查,(3)乳白色:由于白(膿)細(xì)胞增多所致,常見(jiàn)于各種化膿性細(xì)菌引起的化膿性腦膜炎。(4)綠色:見(jiàn)于銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌或甲型鏈球菌引起的腦膜炎等。(5)褐色或黑色:常見(jiàn)于腦膜黑色
9、素瘤。,二、一般性狀檢查,(二)透明度1.參考區(qū)間 清澈透明。2.臨床意義 腦脊液中白細(xì)胞超過(guò)200×106/L或紅細(xì)胞超過(guò)400×106/L時(shí)可致輕微混濁。細(xì)菌、真菌或蛋白質(zhì)含量增加也可引起渾濁。化膿性腦膜炎腦脊液可呈膿性灰白色渾濁或米湯樣渾濁;結(jié)核性腦膜炎腦脊液可呈毛玻璃樣微渾;病毒性腦炎、神經(jīng)梅毒等疾病的腦脊液可呈透明外觀。健康人腦脊液可因穿刺損傷帶入紅細(xì)胞而呈輕度渾濁。,二、一般性狀檢查,(三)凝固性
10、1.結(jié)果報(bào)告 腦脊液的凝固性可按“無(wú)凝塊”、“有凝塊”、“有薄膜”、“膠凍狀”等描述。2.參考區(qū)間 無(wú)凝塊、無(wú)沉淀,放置12小時(shí)~24小時(shí)后不形成薄膜。3.臨床意義 當(dāng)腦脊液內(nèi)的蛋白質(zhì)(特別是纖維蛋白原)含量增高超過(guò)10g/L時(shí),可出現(xiàn)薄膜、凝塊或沉淀?;撔阅X膜炎患者的腦脊液一般在1小時(shí)~2小時(shí)內(nèi)形成薄膜、凝塊或沉淀;結(jié)核性腦膜炎的腦脊液放置12小時(shí)~24小時(shí)后形成薄膜或纖細(xì)凝塊;蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液由于蛋白質(zhì)含量明顯增
11、高,可呈黃色膠凍狀。腦脊液同時(shí)出現(xiàn)膠樣凝固、黃變癥和蛋白質(zhì)-細(xì)胞分離現(xiàn)象(蛋白質(zhì)明顯增高,細(xì)胞數(shù)正?;蜉p度增高),稱(chēng)為Froin-Nonne綜合征,此為蛛網(wǎng)膜下腔梗阻腦脊液的特征。神經(jīng)梅毒及脊髓灰質(zhì)炎腦脊液中可出現(xiàn)絮狀小凝塊。,,三、顯微鏡檢查,(一)細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)1.簡(jiǎn)要操作(1)直接計(jì)數(shù)法:腦脊液混勻→充池→低倍鏡計(jì)數(shù)→計(jì)算。因腦脊液中細(xì)胞數(shù)量少,因此,需計(jì)數(shù)2個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大方格共10個(gè)大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。(2)稀釋計(jì)數(shù)法
12、:渾濁或血性的腦脊液,可用生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液稀釋后再充池計(jì)數(shù),計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù)后再換算成每升腦脊液中的細(xì)胞總數(shù)。,,三、顯微鏡檢查,2.質(zhì)量保證(1)為避免腦脊液標(biāo)本凝固,應(yīng)盡快送檢、盡快檢驗(yàn)。遇高球蛋白標(biāo)本時(shí),可用EDTA鹽抗凝。(2)腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)在標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)完成,以免放置過(guò)久,細(xì)胞變形、破壞或腦脊液凝固,導(dǎo)致計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確。(3)穿刺損傷導(dǎo)致的血性腦脊液,計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)無(wú)意義。(4)計(jì)數(shù)時(shí)注意新型隱球菌與白細(xì)胞、
13、紅細(xì)胞區(qū)別。新型隱球菌不溶于乙酸,加優(yōu)質(zhì)墨汁后可見(jiàn)不著色的莢膜。紅細(xì)胞加酸后溶解;白細(xì)胞加酸后細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)更加明顯。(5)細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),如發(fā)現(xiàn)較多皺縮或腫脹的紅細(xì)胞,應(yīng)在報(bào)告中予以描述,以幫助臨床鑒別陳舊性或新鮮性出血。,,三、顯微鏡檢查,3.方法學(xué)評(píng)價(jià) 直接計(jì)數(shù)法操作簡(jiǎn)便、省時(shí),適用于細(xì)胞總數(shù)不多的腦脊液標(biāo)本。稀釋計(jì)數(shù)法適用于渾濁的腦脊液標(biāo)本,但操作相對(duì)煩瑣,存在稀釋誤差。4.參考區(qū)間 正常人腦脊液無(wú)紅細(xì)胞;僅有少量白細(xì)胞。
14、5.臨床意義 見(jiàn)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。,,三、顯微鏡檢查,(二)白細(xì)胞計(jì)數(shù)1.簡(jiǎn)要操作(1)直接計(jì)數(shù)法:適用于非血性的腦脊液標(biāo)本。用微量吸管吸取冰乙酸后再全部吹出,使微量吸管內(nèi)壁黏附少量冰乙酸,再吸入混勻的腦脊液標(biāo)本,數(shù)分鐘后混勻充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi)計(jì)數(shù)。(2)稀釋計(jì)數(shù)法:適用于渾濁或血性的腦脊液標(biāo)本。用白細(xì)胞稀釋液稀釋腦脊液,充池計(jì)數(shù)白細(xì)胞。,,三、顯微鏡檢查,2.質(zhì)量保證(1)直接計(jì)數(shù)時(shí)吸管內(nèi)的冰乙酸要盡量除去,否則結(jié)果偏低。(
15、2)為了排除因出血而帶來(lái)的白細(xì)胞數(shù)影響,可用下式進(jìn)行校正: WBC(校正)=WBC(未校正)-,,,三、顯微鏡檢查,3.方法學(xué)評(píng)價(jià) 直接計(jì)數(shù)法操作簡(jiǎn)便、省時(shí),但未考慮吸管內(nèi)壁黏附的冰乙酸體積。如黏附的冰乙酸量較大,可使結(jié)果偏低。如黏附的冰乙酸量太少,可能有一部分紅細(xì)胞不能破壞也影響結(jié)果準(zhǔn)確性。直接計(jì)數(shù)法適用于細(xì)胞總數(shù)不多的腦脊液標(biāo)本。稀釋計(jì)數(shù)法紅細(xì)胞破壞完全,結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確,但操作相對(duì)繁雜。4.參考區(qū)間 ①成人:(0~8)
16、×106/L。②兒童:(0~15)×106/L;新生兒:(0~30)×106/L。5.臨床意義 見(jiàn)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。,,三、顯微鏡檢查,(三)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)1.直接分類(lèi)法 白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后,在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核形態(tài)分別計(jì)數(shù)多個(gè)核細(xì)胞(粒細(xì)胞)和單個(gè)核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和間皮細(xì)胞),共計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞,并以百分?jǐn)?shù)表示多個(gè)核細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞所占的比例。2.染色分類(lèi)法 取離心后的腦脊液沉淀物涂
17、片,瑞氏或瑞-吉復(fù)合染色,分類(lèi)方法與血液白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)方法相同。如有內(nèi)皮細(xì)胞,需要另作描述并報(bào)告。,,三、顯微鏡檢查,3.質(zhì)量保證(1)標(biāo)本:若標(biāo)本陳舊、細(xì)胞變形時(shí),白細(xì)胞直接分類(lèi)法誤差較大,應(yīng)改用涂片染色。(2)涂片固定時(shí)間不能太長(zhǎng),溫度不能過(guò)高,以免細(xì)胞皺縮難以分類(lèi);細(xì)胞涂片要均勻集中,以利于觀察。(3)染色分類(lèi)法標(biāo)本離心時(shí)速度不宜太快、時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以減少細(xì)胞的破壞和變形。(4)染色分類(lèi)時(shí),如見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞、室管膜細(xì)胞應(yīng)計(jì)入分
18、類(lèi)百分比中;若見(jiàn)腫瘤細(xì)胞,則另行描述報(bào)告。(5)若白細(xì)胞總數(shù)少于100個(gè),則直接寫(xiě)出單個(gè)核細(xì)胞和多個(gè)核細(xì)胞各自的具體數(shù)字。,,三、顯微鏡檢查,4.方法學(xué)評(píng)價(jià) 直接分類(lèi)法簡(jiǎn)便、快速,但較難觀察清楚細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),準(zhǔn)確性較差。尤其是陳舊性標(biāo)本,細(xì)胞形態(tài)改變大,僅憑高倍鏡分類(lèi)困難,誤差較大。染色分類(lèi)法細(xì)胞識(shí)別率高,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,可以發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞),為首選方法;但操作較復(fù)雜、費(fèi)時(shí)。近年來(lái)出現(xiàn)使用高檔血液分析儀或體液細(xì)胞分析儀對(duì)腦脊
19、液標(biāo)本進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類(lèi)計(jì)數(shù)。雖然該類(lèi)儀器精密度高,快速、可自動(dòng)化,但影響因素較多,對(duì)異常細(xì)胞無(wú)法識(shí)別,如儀器出現(xiàn)報(bào)警信息,必須用顯微鏡計(jì)數(shù)法進(jìn)行復(fù)核。,,三、顯微鏡檢查,5.參考區(qū)間(1)直接分類(lèi)法:多為淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞(7∶3),偶見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞。(2)染色分類(lèi)法:①成人:淋巴細(xì)胞40%~80%,單核細(xì)胞15%~45%,中性粒細(xì)胞0%~6%。②新生兒:淋巴細(xì)胞5%~35%,單核細(xì)胞50%~90%,中性粒細(xì)胞0%~8%。,,三、顯
20、微鏡檢查,6.臨床意義 中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變時(shí)腦脊液細(xì)胞數(shù)可增多,其增多的程度及細(xì)胞種類(lèi)與病變的性質(zhì)有關(guān)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染、結(jié)核性或真菌性腦膜炎時(shí),細(xì)胞輕到中度增加,常以淋巴細(xì)胞為主;細(xì)菌感染所致化膿性腦膜炎時(shí),細(xì)胞數(shù)顯著增加,以中性粒細(xì)胞為主;腦寄生蟲(chóng)病時(shí),可見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多;腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血時(shí),腦脊液內(nèi)可見(jiàn)大量紅細(xì)胞。,,三、顯微鏡檢查,,,中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變時(shí)腦脊液細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的變化,結(jié)核性腦膜炎增殖期,化膿性腦膜炎增殖期,
21、三、顯微鏡檢查,(四)病原生物學(xué)檢查腦脊液病原生物學(xué)檢查的內(nèi)容一般包括細(xì)菌檢查、真菌檢查和寄生蟲(chóng)檢查,常用的檢查方法如下。,,腦脊液病原生物學(xué)檢查的方法及評(píng)價(jià),四、化學(xué)檢查,(一)蛋白質(zhì)健康人的腦脊液只含少量蛋白質(zhì),約為血漿蛋白含量的1%,主要為清蛋白。腦脊液蛋白質(zhì)檢查對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷、鑒別診斷和療效觀察具有重要意義。腦脊液蛋白質(zhì)檢查有定性試驗(yàn)和定量測(cè)定兩大類(lèi)方法。,,四、化學(xué)檢查,1.潘氏試驗(yàn)(Pandy test)(1)
22、試劑:飽和苯酚溶液,由苯酚和水組成。(2)原理:腦脊液中的蛋白質(zhì)與苯酚結(jié)合,形成不溶性蛋白鹽而出現(xiàn)白色混濁或沉淀。(3)簡(jiǎn)要操作:取試劑2ml于試管中→垂直滴加腦脊液1滴~2滴→立即在黑色背景下觀察結(jié)果,若出現(xiàn)白色混濁或沉淀即為陽(yáng)性。,,四、化學(xué)檢查,2.硫酸銨試驗(yàn):包括羅-瓊試驗(yàn)(Ross-Jones test)和諾-愛(ài)試驗(yàn)(Nonne-Apelt test)。主要是利用半飽和硫酸銨沉淀球蛋白,出現(xiàn)白色混濁或沉淀。3.腦脊液蛋白
23、質(zhì)定量測(cè)定 主要有磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法、鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法和雙縮脲法等方法。目前臨床常用的方法是鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法。鄰苯三酚紅能與腦脊液中的蛋白質(zhì)結(jié)合成紅色的鄰苯三酚紅-鉬酸鹽-蛋白復(fù)合物,在600nm波長(zhǎng)下比色,吸光度大小與標(biāo)本中蛋白質(zhì)含量成正比。,,四、化學(xué)檢查,4.質(zhì)量保證(1)標(biāo)本:標(biāo)本渾濁或含有大量細(xì)胞時(shí),須離心沉淀,吸取上清液進(jìn)行檢測(cè),否則可引起潘氏試驗(yàn)假陽(yáng)性以及腦脊液蛋白定量測(cè)定結(jié)果偏高。(2)器材:潘
24、氏試驗(yàn)所用器材均應(yīng)十分潔凈沒(méi)有污染,以免潘氏試驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性。(3)試劑:飽和苯酚試劑如飽和度降低會(huì)出現(xiàn)假陰性,應(yīng)定期檢查、更換試劑,特別是室溫較低時(shí)。(4)潘氏試驗(yàn)觀察結(jié)果時(shí)應(yīng)注意在黑色背景下進(jìn)行,否則易引起假陰性。(5)腦脊液蛋白定量測(cè)定時(shí)如蛋白濃度過(guò)高,應(yīng)先用生理鹽水稀釋后再重新測(cè)定。,,四、化學(xué)檢查,,,5.方法學(xué)評(píng)價(jià) 腦脊液蛋白質(zhì)檢測(cè)試驗(yàn)的方法學(xué)評(píng)價(jià),四、化學(xué)檢查,,,6.參考區(qū)間 ①定性試驗(yàn):
25、陰性或極弱陽(yáng)性。②定量測(cè)定:腰椎穿刺液:0.20g/L~ 0.40g/L; 腦池液:0.10g/L~0.25g/L;腦室液:0.05g/L~0.15g/L。7.臨床意義 腦脊液蛋白質(zhì)含量增高是血-腦脊液屏障功能障礙的標(biāo)志,其臨床意義見(jiàn)下表。 腦脊液蛋白質(zhì)含量增高的臨床意義,腦脊液蛋白質(zhì)含量增高的臨床意義,四、化學(xué)檢查,(二) 葡萄糖測(cè)定1.測(cè)定方法 腦脊液中葡萄糖濃度的高
26、低與血漿葡萄糖濃度、血-腦脊液屏障的通透性、葡萄糖酵解程度以及葡萄糖膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的功能有關(guān)。腦脊液葡萄糖測(cè)定的方法主要有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。葡萄糖氧化酶法易受一些還原性物質(zhì)干擾,特異性較低;己糖激酶法不受輕度溶血、脂血、黃疸、維生素C及藥物的干擾,特異性、準(zhǔn)確性都高于葡萄糖氧化酶法。2.參考區(qū)間 成人:2.5mmol/L~4.5mmol/L;兒童:2.8mmol/L~4.5mmol/L。,,四、化學(xué)檢查,3.臨床意義(1)腦
27、脊液葡萄糖降低:見(jiàn)于①化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎和真菌性腦膜炎:葡萄糖含量越低,預(yù)后越差。②腦寄生蟲(chóng)病:如腦囊蟲(chóng)病、血吸蟲(chóng)病、肺吸蟲(chóng)病、弓形蟲(chóng)病等。③腦腫瘤,尤其是惡性腫瘤。④神經(jīng)性梅毒。⑤低血糖等。(2)腦脊液葡萄糖升高:見(jiàn)于①早產(chǎn)兒或新生兒:主要由于血-腦脊液屏障的通透性較高所致。②飽餐或靜脈注射葡萄糖后,血液葡萄糖含量增高。③影響到腦干的急性外傷或中毒。④腦出血。⑤糖尿病等。,,四、化學(xué)檢查,(三)氯化物測(cè)定1.測(cè)定方法 腦
28、脊液中氯化物含量受血氯濃度、血pH、血-腦脊液屏障通透性及腦脊液中蛋白質(zhì)含量等多種因素影響。正常情況下,腦脊液中氯化物含量比血液中高20%左右。這是由于腦脊液內(nèi)蛋白質(zhì)含量較低,為了維持腦脊液和血漿滲透壓之間平衡,故腦脊液氯化物含量高于血漿,即Donnan平衡。腦脊液氯化物測(cè)定方法與血清氯化物測(cè)定方法相同,目前臨床常用的方法有硝酸汞滴定法、硫氰酸汞比色法、離子選擇電極法、電量分析法、干化學(xué)分析法等。其中離子選擇電極法變異系數(shù)小,準(zhǔn)確度和精
29、密度良好,易于自動(dòng)化,為使用最廣泛的常規(guī)方法。2.參考區(qū)間 成人:120mmol/L~130mmol/L;兒童:111mmol/L~123mmol/L。,,四、化學(xué)檢查,3.臨床意義 氯化物降低主要見(jiàn)于:①腦部細(xì)菌或真菌感染:如化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎及真菌性腦膜炎。結(jié)核性腦膜炎時(shí),腦脊液中氯化物降低尤為明顯,比葡萄糖降低出現(xiàn)得還要早,故對(duì)結(jié)核性腦膜炎與化膿性腦膜炎鑒別有一定價(jià)值。②低血氯癥:各種原因如體內(nèi)氯化物的異常丟失、攝入
30、氯化物過(guò)少等引起血氯降低時(shí),腦脊液中氯化物可隨之降低。③嘔吐、腎上腺皮質(zhì)功能減退癥和腎臟病變。④病毒性腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎,腦膿腫、神經(jīng)梅毒氯化物稍減低或正常。氯化物升高主要見(jiàn)于尿毒癥、脫水、心力衰竭和漿液性腦膜炎等。,,四、化學(xué)檢查,,,(四)其他1.化學(xué)檢查(1)酶及乳酸測(cè)定:腦脊液常見(jiàn)的其他化學(xué)檢查主要有酶及乳酸測(cè)定,其濃度增高的臨床意義見(jiàn)下表。 腦脊液中主要酶及乳酸濃度增高的臨床意義,四、化學(xué)檢查,(2)蛋白電泳:腦
31、脊液蛋白電泳分析可較靈敏發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)各組分的變化。腦脊液蛋白電泳常用乙酸纖維薄膜電泳法及瓊脂糖凝膠電泳法,電泳條件與血清蛋白電泳相同。若采用等電聚焦電泳可提高電泳圖譜的分辨率。因腦脊液蛋白質(zhì)含量少,在電泳前可將腦脊液標(biāo)本在高分子聚乙二醇或右旋糖酐透析液中進(jìn)行濃縮。,,四、化學(xué)檢查,,,腦脊液蛋白質(zhì)電泳檢查的臨床意義,四、化學(xué)檢查,2.免疫學(xué)檢查(1)免疫球蛋白測(cè)定:健康人腦脊液中免疫球蛋白含量極少,病理情況下由于血-腦脊液屏障通透性增加
32、,血中免疫球蛋白進(jìn)入腦脊液中或中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時(shí)激活免疫細(xì)胞分泌免疫球蛋白,引起腦脊液免疫球蛋白增加。目前臨床上常用免疫比濁法檢測(cè)腦脊液中免疫球蛋白含量。免疫比濁法具有靈敏度高、準(zhǔn)確性和重復(fù)性好,快速且能自動(dòng)分析等特點(diǎn)。,,四、化學(xué)檢查,,,腦脊液免疫球蛋白檢查的臨床意義,四、化學(xué)檢查,,,(2)其他項(xiàng)目測(cè)定:腦脊液其他免疫學(xué)檢查項(xiàng)目測(cè)定的臨床意義見(jiàn)下表。 腦脊液其他免疫學(xué)檢查項(xiàng)目測(cè)定的臨床意義,腦脊液其他免
33、疫學(xué)檢查項(xiàng)目測(cè)定的臨床意義,五、腦脊液檢查臨床應(yīng)用,(一)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷與鑒別診斷1.化膿性腦膜炎 腦脊液細(xì)胞數(shù)明顯增多,分類(lèi)以中性粒細(xì)胞為主,蛋白質(zhì)明顯增高,葡萄糖和氯化物明顯降低,細(xì)菌涂片可見(jiàn)致病菌,細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性可確診。2.病毒性腦膜炎 腦脊液細(xì)胞數(shù)輕到中度增多,分類(lèi)以淋巴細(xì)胞為主,蛋白質(zhì)輕度增高,葡萄糖和氯化物一般正常,特異性IgM抗體檢測(cè)可用于早期診斷。3.結(jié)核性腦膜炎 腦脊液細(xì)胞數(shù)輕到中度增多,疾病早期
34、以中性粒細(xì)胞為主,隨著病情的進(jìn)展變化為以淋巴細(xì)胞為主,氯化物明顯降低、蛋白質(zhì)輕度到中度增高,細(xì)菌涂片見(jiàn)抗酸桿菌或結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性可確診。4.真菌性腦膜炎 腦脊液細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)與結(jié)核性腦膜炎相似,兩者難以區(qū)別。臨床上最常見(jiàn)的是新型隱球菌感染,細(xì)菌涂片墨汁染色陽(yáng)性或隱球菌乳膠凝集試驗(yàn)陽(yáng)性可確診。,,五、腦脊液檢查臨床應(yīng)用,(二)協(xié)助中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的診斷腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞,有助于中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的診斷。腦轉(zhuǎn)移癌和腦膜癌陽(yáng)性率
35、可達(dá)80%左右,但原發(fā)腫瘤(髓母細(xì)胞瘤除外)陽(yáng)性率較低。,,五、腦脊液檢查臨床應(yīng)用,,,常見(jiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液實(shí)驗(yàn)室檢查特點(diǎn),第二節(jié) 漿膜腔積液檢查,人體漿膜腔包括胸腔、腹腔、心包腔。正常情況下,漿膜腔內(nèi)僅含有少量液體,主要起潤(rùn)滑作用。病理情況下,大量的液體在漿膜腔內(nèi)潴留,從而形成了漿膜腔積液(serous effusion )。根據(jù)積液產(chǎn)生的部位不同,可分為胸腔積液(胸水)、腹腔積液(腹水)、心包腔積液;根據(jù)積液產(chǎn)生的
36、原因及性質(zhì)不同,可分為漏出液和滲出液。,,漏出液多為雙側(cè)性非炎性積液,常見(jiàn)于各種腎病、充血性心力衰竭、嚴(yán)重的營(yíng)養(yǎng)不良、晚期肝硬化、腫瘤及靜脈栓塞等疾病滲出液多為單側(cè)性炎性積液,病因比較復(fù)雜,常見(jiàn)于結(jié)核性和細(xì)菌性感染、轉(zhuǎn)移性肺癌、乳腺癌、淋巴瘤、卵巢癌、消化液刺激及外傷等。確定漿膜腔積液的性質(zhì),對(duì)病因的診斷有著重要的意義。,第二節(jié) 漿膜腔積液檢查,,一、標(biāo)本采集與處理,,1.標(biāo)本采集 由臨床醫(yī)師行漿膜腔穿刺術(shù)采集,采集的標(biāo)本分4管
37、留取,每管1ml~2ml。第一管供細(xì)菌學(xué)檢查(結(jié)核分枝桿菌檢查留10ml),必須置于無(wú)菌試管中;第二管供化學(xué)及免疫學(xué)檢查(化學(xué)檢查宜用肝素抗凝);第三管供細(xì)胞學(xué)檢查(宜用 EDTA-K2 抗凝),標(biāo)本采集后應(yīng)立即低速離心或用細(xì)胞收集器濃集細(xì)胞,及時(shí)完成細(xì)胞檢查。如不能及時(shí)檢查,可加入標(biāo)本1/10量的無(wú)水乙醇并置冰箱冷藏保存以固定細(xì)胞;第四管不加任何抗凝劑以觀察有無(wú)凝固現(xiàn)象。,一、標(biāo)本采集與處理,,2.標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)(1)標(biāo)本運(yùn)送
38、:標(biāo)本采集后應(yīng)立即在30分鐘內(nèi)送檢,以防止細(xì)胞變形、出現(xiàn)凝塊或細(xì)菌溶解破壞,否則應(yīng)將標(biāo)本置于4℃冰箱內(nèi)保存。(2)生物安全:漿膜腔積液內(nèi)可能含有各種病原生物,應(yīng)按潛在生物危害物質(zhì)處理。標(biāo)本的采集、運(yùn)送、檢查及處理等過(guò)程要符合實(shí)驗(yàn)室生物安全原則,注意個(gè)人生物安全防護(hù)。,一、標(biāo)本采集與處理,,3.保存和接收 ①妥善保存:標(biāo)本收到后應(yīng)及時(shí)檢查,漿膜腔積液常規(guī)及化學(xué)檢查必須在采集后2小時(shí)內(nèi)完成,否則應(yīng)將標(biāo)本冷藏保存。如果進(jìn)行細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)和分類(lèi)
39、可將標(biāo)本保存24小時(shí)。②注意標(biāo)識(shí):采集標(biāo)本容器的標(biāo)識(shí)與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一致。4.標(biāo)本處理 應(yīng)按照《臨床實(shí)驗(yàn)室廢物處理原則》(WS/T/249-2005)的方法處理實(shí)驗(yàn)后的殘余標(biāo)本和所用器械,以免污染環(huán)境和造成室內(nèi)感染??蓪堄鄻?biāo)本與1∶50的84消毒液混合消毒12分鐘后倒掉。,二、一般性狀檢查,,(一)量1.參考區(qū)間 正常胸腔、腹腔、心包腔內(nèi)均有少量液體。2.臨床意義 病理情況下,漿膜腔內(nèi)液體增多,其量與病變的部位及嚴(yán)重程度相關(guān),
40、可達(dá)數(shù)百至上千毫升。,二、一般性狀檢查,,(二)顏色1.參考區(qū)間 淡黃色。2.臨床意義 漏出液顏色較淺,滲出液因病因不同而顏色各異,見(jiàn)下表。 漿膜腔積液常見(jiàn)顏色變化及臨床意義,二、一般性狀檢查,,(三)透明度1.參考區(qū)間 清晰透明。2.臨床意義 積液透明度與其所含的細(xì)胞、細(xì)菌和蛋白質(zhì)數(shù)量等有關(guān)。漏出液因其所含細(xì)胞、細(xì)菌及蛋白質(zhì)量少而呈清晰透明或微渾液體,滲出液因含大量細(xì)胞、細(xì)菌及蛋白質(zhì)而呈現(xiàn)不同程度渾濁。,二、一
41、般性狀檢查,,(四)凝固性1.參考區(qū)間 不易凝固。2.臨床意義 漏出液一般不易凝固或出現(xiàn)凝塊。滲出液由于含有較多的纖維蛋白原和細(xì)菌、細(xì)胞破壞后釋放的凝血活酶,可有凝塊形成,但若其中含有纖溶酶時(shí),可不出現(xiàn)凝固。,二、一般性狀檢查,,(五)比重1.測(cè)定方法 比重計(jì)法。2.參考區(qū)間 漏出液<1.015,滲出液>1.018。3.臨床意義 積液比重的高低取決于所含溶質(zhì)的數(shù)量及種類(lèi)。漏出液中由于含細(xì)胞、蛋白質(zhì)成分少,所以比重<1
42、.015;滲出液中由于含有較多的細(xì)胞和蛋白質(zhì),故比重常>1.018。,三、顯微鏡檢查,,(一)細(xì)胞計(jì)數(shù)1.計(jì)數(shù)方法 與腦脊液計(jì)數(shù)方法相同,應(yīng)計(jì)數(shù)全部有核細(xì)胞(包括間皮細(xì)胞)。2.參考區(qū)間 漏出液<100×106/L;滲出液>500×106/L。3.臨床意義 積液中出現(xiàn)少量紅細(xì)胞,常常因穿刺損傷出血所致,因此積液中出現(xiàn)少量的紅細(xì)胞對(duì)滲出液和漏出液的鑒別意義不大;若積液中出現(xiàn)大量的紅細(xì)胞,則提示為出血性滲出液
43、,常見(jiàn)于惡性腫瘤、結(jié)核病等。漿膜腔積液細(xì)胞增高的臨床意義見(jiàn)有核細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。,三、顯微鏡檢驗(yàn),,4.質(zhì)量保證(1)標(biāo)本送檢應(yīng)及時(shí),以免積液凝固或細(xì)胞破壞而引起的結(jié)果不準(zhǔn)確。(2)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)將積液標(biāo)本充分混勻,否則影響計(jì)數(shù)結(jié)果。(3)若因穿刺損傷引起血性積液,在做白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)進(jìn)行校正,校正公式為:白細(xì)胞/L(校正)=積液白細(xì)胞/L- 5.方法學(xué)評(píng)價(jià) 與腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)基本相同。,,三、顯微鏡檢驗(yàn),,(二)有核細(xì)胞分類(lèi)計(jì)
44、數(shù)1.計(jì)數(shù)方法(1)直接分類(lèi)法:細(xì)胞計(jì)數(shù)的同時(shí),在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài),將單個(gè)核細(xì)胞(包括淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、間皮細(xì)胞)數(shù)與多個(gè)核細(xì)胞數(shù)記錄下來(lái),最后用百分比表示。若白細(xì)胞<150×106/L,可不進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)。(2)染色分類(lèi)法:若直接分類(lèi)區(qū)分細(xì)胞較難時(shí),可將積液離心,取沉淀進(jìn)行涂片染色,油鏡下分類(lèi)。此時(shí)若有異常細(xì)胞,應(yīng)另行描述報(bào)告。2.參考區(qū)間 漏出液<100×106/L;滲出液>500×1
45、06/L。3.臨床意義 漏出液一般以淋巴細(xì)胞及間皮細(xì)胞為主;滲出液根據(jù)病因、病情不同而變化,積液中有核細(xì)胞分類(lèi)及臨床意義見(jiàn)下表。,三、顯微鏡檢驗(yàn),,積液中有核細(xì)胞分類(lèi)及臨床意義,三、顯微鏡檢驗(yàn),,4.質(zhì)量保證(1)積液進(jìn)行離心時(shí),速度不能過(guò)快,以免影響細(xì)胞形態(tài)。(2)用玻片離心沉淀或細(xì)胞室沉淀法收集細(xì)胞效果更好。(3)涂片固定時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),固定溫度不宜過(guò)高。5.方法學(xué)評(píng)價(jià) 直接分類(lèi)法操作簡(jiǎn)單,但結(jié)果準(zhǔn)確性較低;染色分類(lèi)法雖
46、操作復(fù)雜,但結(jié)果準(zhǔn)確性好,且較容易發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞。,三、顯微鏡檢驗(yàn),,(三)其他1.寄生蟲(chóng) 乳糜樣積液離心后沉淀物中可檢查有無(wú)微絲蚴;阿米巴積液可檢查有無(wú)阿米巴滋養(yǎng)體;包蟲(chóng)病患者積液中可檢查有無(wú)棘球蚴頭節(jié)和小鉤。2.膽固醇結(jié)晶 積液中出現(xiàn)膽固醇結(jié)晶可見(jiàn)于陳舊性胸腔積液脂肪變性及膽固醇性胸膜炎積液。,四、黏蛋白定性試驗(yàn),,(一)檢查方法1.原理 漿膜間皮細(xì)胞在炎癥刺激下分泌黏蛋白增加,黏蛋白是一種酸性糖蛋白,等電點(diǎn)為pH3.0~
47、pH5.0,在稀乙酸溶液中可以產(chǎn)生白色云霧狀沉淀,即Rivalta反應(yīng)。2.簡(jiǎn)要操作 100ml蒸餾水+0.1ml冰乙酸→逐滴加積液至稀乙酸溶液中→黑色背景下觀察結(jié)果。,四、黏蛋白定性試驗(yàn),,(二)質(zhì)量保證1.球蛋白不溶于水且可呈云霧狀混濁,若積液中球蛋白含量增高,可引起假陽(yáng)性。2.試驗(yàn)時(shí),冰乙酸與蒸餾水應(yīng)充分混勻,且應(yīng)在黑色背景下觀察結(jié)果。3.積液中細(xì)胞數(shù)目較多時(shí),應(yīng)將積液離心后取上清液進(jìn)行試驗(yàn)。,四、黏蛋白定性試驗(yàn),,(三
48、)方法學(xué)評(píng)價(jià)黏蛋白定性試驗(yàn)(Rivalta test)是一種簡(jiǎn)單的黏蛋白過(guò)篩試驗(yàn),簡(jiǎn)便、快速,不需特殊儀器和設(shè)備,臨床實(shí)驗(yàn)室常用,能粗略的區(qū)分漏出液和滲出液。要判斷積液的性質(zhì)還需做蛋白質(zhì)定量、蛋白質(zhì)電泳分析等其他實(shí)驗(yàn)室檢查。,四、黏蛋白定性試驗(yàn),,(四)參考區(qū)間漏出液:陰性;滲出液:陽(yáng)性。(五)臨床意義滲出液中因含較多的黏蛋白,所以Rivalta試驗(yàn)呈陽(yáng)性;漏出液呈陰性,但腔內(nèi)漏出液經(jīng)長(zhǎng)期吸收蛋白質(zhì)濃縮后,亦可呈陽(yáng)性反應(yīng)。,五、
49、其他檢查,,(一)化學(xué)檢查漿膜腔積液化學(xué)檢查主要包括蛋白、糖、脂及酶的測(cè)定等,具體見(jiàn)下表。 漿膜腔積液常用化學(xué)、免疫學(xué)檢查及臨床意義,五、其他檢查,,續(xù)表 漿膜腔積液常用化學(xué)、免疫學(xué)檢查及臨床意義,五、其他檢查,,(二)腫瘤標(biāo)志物和其他免疫學(xué)指標(biāo)檢查漿膜腔積液腫瘤標(biāo)志物及其他一些指標(biāo)的檢查有助于積液性質(zhì)的判斷,具體見(jiàn)下表。 漿膜腔積液腫瘤標(biāo)志物和其他指標(biāo)的臨床意義,五、其他
50、檢查,,(三)病原生物學(xué)檢查1.細(xì)菌檢查 根據(jù)漿膜腔積液理學(xué)和化學(xué)檢查結(jié)果,如果積液性質(zhì)為漏出液,則不需做細(xì)菌檢查;如是滲出液或疑是滲出液則需涂片做革蘭和抗酸染色、顯微鏡檢查和細(xì)菌培養(yǎng)。正常情況下,積液中是沒(méi)有細(xì)菌的,若在漿膜腔積液中發(fā)現(xiàn)細(xì)菌,則可以為臨床診斷提供病因?qū)W依據(jù),有確診價(jià)值。2.寄生蟲(chóng)檢查 漿膜腔積液離心后取沉淀物鏡檢,觀察有無(wú)寄生蟲(chóng)及蟲(chóng)卵,若發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)蟲(chóng)體或蟲(chóng)卵,可為臨床診斷提供病因?qū)W依據(jù),有確診價(jià)值。如乳糜樣積液
51、中可查見(jiàn)微絲蚴,棘球蚴病所致積液中可見(jiàn)棘球蚴的頭節(jié)和小溝,阿米巴病的積液中可見(jiàn)阿米巴滋養(yǎng)體。,六、漿膜腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,漿膜腔積液檢查的目的在于鑒別積液的性質(zhì)和明確積液的原因。常規(guī)檢查項(xiàng)目?jī)H限于理學(xué)、化學(xué)和細(xì)胞學(xué)檢查,鑒別積液性質(zhì)的符合率較低;隨著特異性化學(xué)和免疫學(xué)檢測(cè)指標(biāo)的增加,提高了漿膜腔積液性質(zhì)診斷的符合率。1.漿膜腔積液檢查項(xiàng)目分級(jí) 20世紀(jì)90年代以來(lái),漿膜腔積液檢查發(fā)展到細(xì)胞學(xué)、生物學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等多
52、項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)化組合檢查。除了提供鑒別漏出液與滲出液的依據(jù)外,還提供鑒別良性和惡性、結(jié)核性和化膿性積液的依據(jù)。目前,根據(jù)診斷需要,將積液檢查項(xiàng)目分為3級(jí),見(jiàn)下表。,六、漿膜腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,漿膜腔積液檢查項(xiàng)目分級(jí),六、漿膜腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,2.漏出液和滲出液的鑒別 原因不明的漿膜腔積液,經(jīng)檢查大致可分為滲出液或漏出液。但是,有些漿膜腔積液既有滲出液的特點(diǎn),又有漏出液的性質(zhì),這些積液稱(chēng)為“中間型積液”。因此,判斷積液的性質(zhì)除了依據(jù)
53、實(shí)驗(yàn)室的檢查結(jié)果外,還應(yīng)結(jié)合臨床其他檢查結(jié)果,進(jìn)行綜合分析,才能準(zhǔn)確診斷。漏出液與滲出液的鑒別見(jiàn)下表。,六、漿膜腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,漏出液和滲出液的鑒別,六、漿膜腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,3.良性與惡性漿膜腔積液的鑒別 漿膜腔積液檢查對(duì)良性或惡性漿膜腔積液鑒別有一定價(jià)值,尤其是積液中的脫落細(xì)胞檢查和染色體檢查對(duì)鑒別良性與惡性漿膜腔積液非常重要,主要鑒別指標(biāo)見(jiàn)下表。,六、漿膜腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,良性與惡性漿膜腔積液的鑒別,六、漿膜
54、腔積液檢查的臨床應(yīng)用,,4.尋找積液病因 漿膜腔積液是臨床常見(jiàn)的體征,其病因比較復(fù)雜。胸膜腔積液主要病因?yàn)榻Y(jié)核性胸膜炎和惡性腫瘤,且有向惡性腫瘤為主發(fā)展的趨勢(shì);腹膜腔積液主要病因有肝硬化、腫瘤和結(jié)核性腹膜炎等,約占90%以上;心包膜腔積液主要病因?yàn)榻Y(jié)核性、非特異性和腫瘤性,結(jié)核性仍占首位,但呈逐年降低趨勢(shì),而腫瘤性則呈逐年上升趨勢(shì)。,第三節(jié) 關(guān)節(jié)腔積液檢查,,1,標(biāo)本采集與處理,,2,一般性狀檢查,,4,化學(xué)和免疫學(xué)檢查,,3,顯微
55、鏡檢查,一、標(biāo)本采集與處理,,1、標(biāo)本采集 由臨床醫(yī)師通過(guò)無(wú)菌操作關(guān)節(jié)腔穿刺術(shù)獲得。,一、標(biāo)本采集與處理,,標(biāo)本采集后分別置入3個(gè)無(wú)菌試管中: 第1管——微生物學(xué)檢查 第2管——細(xì)胞學(xué)及化學(xué)檢查(需肝素抗凝) 第3管——不加抗凝劑用于觀察有無(wú)凝固。,一、標(biāo)本采集與處理,,2、標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)與處理 標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢,如需要保存標(biāo)本,必須離心去除細(xì)胞后再
56、保存,因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)酶的釋放會(huì)改變其中的成分。,,,,,,,(二)顏色,(四)黏稠度,(三)透明度,(一)量,(五)凝固,二、一般性狀檢查,二、一般性狀檢查,,(一)量 1.參考區(qū)間 約0.1ml~2.0ml 2.臨床意義 關(guān)節(jié)發(fā)生
57、炎癥、創(chuàng)傷和化膿性感染時(shí),關(guān)節(jié)腔積液量會(huì)增多,且增多程度與疾病嚴(yán)重程度正相關(guān)。,二、一般性狀檢查,,(二)顏色 1.參考區(qū)間 無(wú)色或淡黃色。 2.臨床意義 病理情況下,關(guān)節(jié)腔積液可出現(xiàn)不同的顏色變化,見(jiàn)下表。,二、一般性狀檢查,,二、一般性狀檢查,,(三)透明度 1.參考區(qū)間 清亮、透明。 2.臨床意義 關(guān)節(jié)腔積液的渾濁度與細(xì)胞成分、細(xì)菌、蛋白質(zhì)
58、增多有關(guān)。炎性病變?cè)街兀瑴啙嵩矫黠@。,二、一般性狀檢查,,(四)黏稠度 1.參考區(qū)間 高度黏稠 2.臨床意義 炎癥導(dǎo)致關(guān)節(jié)腔積液中的透明質(zhì)酸被中性粒細(xì)胞釋放的酶降解,且關(guān)節(jié)腔積液稀釋?zhuān)龟P(guān)節(jié)腔積液黏稠度降低,降低程度與炎癥嚴(yán)重程度正相關(guān)。,二、一般性狀檢查,,(五)凝塊 1.參考區(qū)間 無(wú)凝塊 2.臨床意義 健康人關(guān)節(jié)腔積液不含纖維蛋白原和其他凝血
59、因子,不凝固。炎癥時(shí)血漿凝血因子滲出可形成凝塊。,,,,,,,(二)細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù),(四)結(jié)晶,(三)特殊細(xì)胞,(一)白細(xì)胞計(jì)數(shù),(五)病原微生物,三、顯微鏡檢查,三、顯微鏡檢查,,(一)白細(xì)胞計(jì)數(shù) 參考區(qū)間:WBC<(200~700)×106/L; 臨床意義: 化膿性關(guān)節(jié)腔積液:細(xì)胞總數(shù)>50 000×106/L; 急性痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎:細(xì)胞總數(shù)可達(dá)20000&
60、#215;106/L。,三、顯微鏡檢查,,(二)細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)1、方法:(1)直接涂片染色 (2)離心后取沉淀涂片染色 2、參考區(qū)間:?jiǎn)魏?吞噬細(xì)胞約占65% 淋巴細(xì)胞約占10% 中性粒細(xì)胞約占20%,三、顯微鏡檢查,,(二)細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)3、臨床意義 炎癥性
61、關(guān)節(jié)腔積液:中性粒細(xì)胞>80%; 化膿性關(guān)節(jié)炎:中性粒細(xì)胞> 95%; 風(fēng)濕、痛風(fēng)、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎:中性粒細(xì)胞>50%; 淋巴細(xì)胞↑↑:見(jiàn)于類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎早期、慢性感 染、結(jié)締組織病等; 嗜酸性粒細(xì)胞↑↑:見(jiàn)于滑膜轉(zhuǎn)移癌、急性風(fēng)濕
62、 熱、寄生蟲(chóng)感染等。,三、顯微鏡檢查,,(三)特殊細(xì)胞 采用瑞特或瑞-吉復(fù)合染色后鏡檢,以檢查有無(wú)腫瘤細(xì)胞等特殊細(xì)胞。常見(jiàn)的特殊細(xì)胞有: 類(lèi)風(fēng)濕細(xì)胞 狼瘡細(xì)胞
63、 Reiter細(xì)胞,,三、顯微鏡檢查,Reiter細(xì)胞,狼瘡細(xì)胞,Reiter細(xì)胞,三、顯微鏡檢查,,(四)結(jié)晶 常見(jiàn)的結(jié)晶有尿酸鹽結(jié)晶、焦磷酸鈣結(jié)晶、磷灰石結(jié)晶、草酸鈣結(jié)晶等。主要用于鑒別痛風(fēng)(尿酸鹽結(jié)晶)和假性痛風(fēng)(焦磷酸鈣結(jié)晶),三、顯微鏡檢查,痛風(fēng)患者關(guān)節(jié)腔細(xì)胞外針狀和桿狀尿酸鹽—鈉結(jié)積液中細(xì)胞內(nèi)和晶(×400),痛風(fēng)患者尿酸鈉結(jié)晶(偏振光),三、顯微鏡檢查,,(五)病原微生物 可
64、作涂片革蘭染色檢查或細(xì)菌培養(yǎng)。如懷疑結(jié)核性關(guān)節(jié)腔積液時(shí)可作涂片抗酸染色、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)或分子生物學(xué)方法(如PCR)檢查。,四、化學(xué)和免疫學(xué)檢查,,(一)黏蛋白凝塊形成試驗(yàn) 1.參考區(qū)間 陽(yáng)性 2.臨床意義 健康人關(guān)節(jié)腔積液的黏蛋白凝塊形成良好,凝塊形成不良可見(jiàn)于化膿性關(guān)節(jié)炎、結(jié)核性關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及痛風(fēng)。,四、化學(xué)和免疫學(xué)檢查,,(二)關(guān)節(jié)腔積液其他檢查關(guān)節(jié)腔積液化學(xué)檢查指標(biāo)及
65、臨床意義見(jiàn)下表。,,第四節(jié) 胃液與十二指腸引流液檢查,,一、,胃液檢查,,二、,十二指腸引流液檢查,一、胃液檢查,,胃液(gastric juice) 是由胃黏膜分泌細(xì)胞分泌的液體。胃液檢驗(yàn)對(duì)于了解胃的分泌功能,胃、十二指腸相關(guān)疾病診斷和鑒別診斷有較好的實(shí)用價(jià)值。,一、胃液檢查,,1.試驗(yàn)前 1 天停用影響胃酸分泌的藥物;2.試驗(yàn)前晚 8 小時(shí)后禁食、禁飲、禁煙,有胃排空遲緩則在試驗(yàn)前 1天~2 天流質(zhì)飲食;3.
66、受試者空腹、坐姿,插管抽取胃液4.肌內(nèi)注射五肽胃泌素, 每 15 分鐘留 1 份標(biāo)本, 共留取 4 次分別計(jì)量送檢。,(一)標(biāo)本采集,,1.量 (1)參考區(qū)間 正常基礎(chǔ)胃液約10ml~100 ml(2)臨床意義 ①>100 ml為胃液增多,見(jiàn)于十二指腸潰瘍、卓-艾綜合征、胃排空障礙、十二指腸液反流等。 ②<于10 ml為胃液減少,見(jiàn)于胃蠕動(dòng)功能
67、亢進(jìn)、萎縮性胃炎等。,一、胃液檢查,(二)一般性狀檢查,一、胃液檢查,,2.顏色 (1)正常空腹胃液為無(wú)色透明,無(wú)食物殘?jiān)?)臨床意義 ①鮮紅血絲——抽胃液傷及胃黏膜; ②棕褐色——胃炎、潰瘍、胃癌等; ③咖啡殘?jiān)鼧印竷?nèi)有大量陳舊性出血,見(jiàn)于胃癌、幽門(mén)閉鎖不全等; ④胃液混有新鮮膽汁——黃色,放置后則呈綠色。,(二)一般性狀檢查,一、胃液檢
68、查,(二)一般性狀檢查,咖啡色胃液,黃色胃液,綠色胃液,久置后,,黏液,胃液,食物殘?jiān)?胃液靜置后分層,正常胃液不分層,,一、胃液檢查,,3.黏液 (1)正常胃液中含有少量分布均勻的黏液。(2)黏液增多提示胃部可能有炎癥。注意: 黏液呈弱堿性,大量存在時(shí)可影響胃液酸度的準(zhǔn)確測(cè)定。,(二)一般性狀檢查,4.食物殘?jiān)?(1)12 小時(shí)未進(jìn)食的空腹胃液應(yīng)無(wú)殘?jiān)拔⒘#?)胃蠕動(dòng)功能不足會(huì)導(dǎo)致胃液殘?jiān)拔⒘5脑龆啵?jiàn)于胃下垂、
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