正交試驗(yàn)法優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝

1、1正交試驗(yàn)法優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝陳威1，侯偉源2，劉堅(jiān)初2，葉炳皇1，賀倩1，張軍1，林吉1，（1廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州510006；2中山黃圃人民醫(yī)院，廣東中山528429）摘要：目的摘要：目的優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝。方法方法以馬錢(qián)苷、丹酚酸B、綠原酸的綜合保留率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，應(yīng)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)萸丹膠囊的水提工藝進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果結(jié)果優(yōu)選出的提取工藝為山茱萸、丹參、茵陳、羅布麻葉等藥味先以8倍量水浸泡0.5h，煎煮1h，過(guò)濾，濾渣再加6倍量

2、水煎煮1h。結(jié)論結(jié)論該工藝合理，可為確定萸丹膠囊的生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：萸丹膠囊；正交設(shè)計(jì)；馬錢(qián)苷；丹酚酸B；綠原酸OptimizationofWaterExtractionTechniqueofYudanCapsuleswiththogonalExperimentCHENWei1，HOUWeiyuan2，LIUJianchu2，YEBinghuang1，HEQian1，ZHANGJun1LINJi1（1GuangzhouU

3、niversityofChineseMedicine，Guangzhou510006；2HuangpuPeoplesHospitalofZhongshan，GuangdongZhongshan528429）Abstract：0bjectiveTooptimizetheextractiontechniquefYudancapsulesMethodWiththecomprehensiveextractionratesofloganinsal

4、vianolicacidBchlogenicacidthewaterextractionconditionsofYudancapsuleswereoptimizedbythogonaldesign.ResultTheoptimalextractiontechniquewasasfollows：themixtureofmedicalmaterialswasfirstlymarinatedwith8timesofwaterf0.5hthen

5、decoctedf1hthefilterresiduesadded6foldswaterdecoctedf1h.ConclusionTheextractiontechniquefYudancapsulesisreliablewhichoffersexperimentalbasisftheindustrializedextractionofthecapsulesKeywds：Yudancapsulethogonaldesignlogani

6、nsalvianolicacidBchlogenicacid萸丹膠囊為中山黃圃人民醫(yī)院醫(yī)院制劑，由山茱萸、丹參、茵陳、羅布麻葉等藥味組成，具有補(bǔ)益肝腎、清熱活血等功效，用于輔助治療肝腎陰虛，血熱瘀阻癥型高血壓。本方中主藥山茱萸有，為收斂性強(qiáng)壯藥，有補(bǔ)肝腎止汗的功效[1]，有抗休克、強(qiáng)心及抗心率失常的作用[23]，山茱萸中主要含有沒(méi)食子酸、熊果酸、齊墩果酸、山茱萸苷、馬錢(qián)子苷、多糖類(lèi)等有效成分[4]。丹參中的水溶性成分具有抗氧化、抗凝、抗

7、血栓、抗心腦血管缺血及調(diào)血脂、抗炎、增強(qiáng)免疫力多種藥理活性，常用于治療冠心病及缺血性腦血管病[5]。其中丹參水溶性成分主要為酚酸類(lèi)，其中丹酚酸B約70%[6]。茵陳除保肝利膽外，還具有抗病原微生物、鎮(zhèn)痛消炎、降血脂、增強(qiáng)免疫、抗腫瘤等方面的活性[7]。羅布麻葉能平肝安神，對(duì)人體心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等均有藥理作用[8]。目前有關(guān)萸丹膠囊提取工藝和含量測(cè)定的研究未見(jiàn)報(bào)道本實(shí)驗(yàn)以山茱萸中馬錢(qián)苷、丹參中丹酚酸B、茵陳與羅布麻葉中的綠原酸的綜合保

8、留率為指標(biāo)，采用高效液相色譜法建立其含量測(cè)定的方法，以單因素考察結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝，為萸丹膠囊的制劑研究奠定基礎(chǔ)。1材料島津LC20A高效液相色譜儀(配有四元泵、在線(xiàn)脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、UV檢測(cè)器和Labsolution色譜工作站，日本島津公司)；萬(wàn)分之一分析天平（MettlerToledoCP225D）；十萬(wàn)分之一分析天平（MettlerToledoAB204N）。馬錢(qián)苷對(duì)照品（批號(hào)：110602，規(guī)格：20mg

9、，上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司）；丹酚酸B對(duì)照品（批號(hào):110305規(guī)格：20mg，上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司）；綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：110753200413規(guī)格：20mg，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；色譜甲醇（Merck），水為自制超純水，其余試劑為分析純。2方法與結(jié)果1[基金項(xiàng)目]廣東省產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目（KCF209112K05）[第一作者]陳威，碩士研究生，Tel：15018419003，Email：chenwei2009.good@[

10、通訊作者]張軍，博士，研究員，碩士生導(dǎo)師，主要從事復(fù)方中藥新藥開(kāi)發(fā)研究。Tel：（020）39358519，Email：zhjxsh@.cn表1正交試驗(yàn)因素水平表水平加水量（A）倍浸泡時(shí)間(B)min煎煮時(shí)間(C)h18、600.5210、8151.0312、10301.5按處方比例稱(chēng)取全方藥材，共9份，按L9(34)正交試驗(yàn)安排表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。各次提取液放冷，濾過(guò)，測(cè)定體積。按照供試品溶液制備方法制備供試品，測(cè)定并計(jì)算綜合保留率。對(duì)正交的

11、結(jié)果進(jìn)行直觀(guān)分析，結(jié)果見(jiàn)表2。表2正交試驗(yàn)綜合保留率直觀(guān)分析表因素結(jié)果試驗(yàn)號(hào)加水量(A)倍浸泡時(shí)間(B)min煎煮時(shí)間(C)h誤差(D)馬錢(qián)苷保留率%丹酚酸B保留率%綠原酸保留率%綜合保留率%1111188.2360.7451.5766.852122283.779.0849.4770.753133383.7369.6661.2371.544212384.9869.8543.0865.975223184.7268.8441.2464.93

12、6231294.4287.0457.7379.737313293.7969.0942.5968.498321384.5274.3147.1268.659332189.6569.5957.4372.22均值169.12367.10371.4868.293均值269.96767.81369.19372均值370.0674.23368.47768.857極差0.9377.133.0033.707綜合保留率=（馬錢(qián)苷保留率丹酚酸B保留率綠原酸保

13、留率）3由直觀(guān)分析可以看出，各因素對(duì)綜合保留率影響程度依次為：B﹥C﹥A，其中B因素影響最大。C因素和A因素對(duì)綜合保留率影響較小，綜合考慮指標(biāo)成分保留率和臨床湯劑經(jīng)驗(yàn)，將因素C確定為水平2；基于后續(xù)濃縮、干燥工藝的時(shí)間和效率，將因素A確定為水平1。因此最終篩選提取條件為A1B3C2，即先以8倍量水浸泡0.5h，煎煮1h，過(guò)濾，濾渣再加6倍量水煎煮1h。2.3驗(yàn)證性試驗(yàn)稱(chēng)取處方劑量的各味藥材，按優(yōu)選出的最佳提取方法重復(fù)提取三批，參照供試品

14、溶液的處理方法，測(cè)定馬錢(qián)苷、丹酚酸B和綠原酸的綜合保留率，結(jié)果分別為68.74%、68.30%、66.69%。證明所優(yōu)選出的提取工藝合理、穩(wěn)定、可行。3討論影響湯劑保留率最主要的因素是提取次數(shù)，且沈群[9]認(rèn)為提取次數(shù)加在正交表中是不合理的，因此本實(shí)驗(yàn)先進(jìn)行提取次數(shù)的單因素考察，確定提取次數(shù)再進(jìn)行正交試驗(yàn)考察其它因素的影響。中藥復(fù)方的功能主治是多成分、多靶點(diǎn)、多途徑綜合作用的結(jié)果，單一的指標(biāo)成分很難證明工藝的科學(xué)合理性，賈英杰等[10]