正交試驗(yàn)法優(yōu)選頤正活脈丸提取工藝研究

1、正交試驗(yàn)法優(yōu)選頤正活脈丸提取工藝研究正交試驗(yàn)法優(yōu)選頤正活脈丸提取工藝研究朱志軍朱志軍李民李民張?zhí)袕執(zhí)刑K曉凱蘇曉凱（河南中醫(yī)學(xué)院）（河南中醫(yī)學(xué)院）[摘要摘要]目的：優(yōu)選頤正活脈丸的最佳提取工藝。方法：采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以高效液相目的：優(yōu)選頤正活脈丸的最佳提取工藝。方法：采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以高效液相色譜法測(cè)定提取液中熊果酸和齊墩果酸總量，及浸膏得率為指標(biāo)，優(yōu)選頤正活脈丸的提取色譜法測(cè)定提取液中熊果酸和齊墩果酸總量，及浸膏得率為指標(biāo)，優(yōu)選

2、頤正活脈丸的提取工藝。結(jié)果：最佳提取工藝為工藝。結(jié)果：最佳提取工藝為A1B2C3D2即10倍量的倍量的90%乙醇加熱回流乙醇加熱回流2次，每次次，每次1.5h。結(jié)論：該提取工藝穩(wěn)定，安全，簡(jiǎn)便易行。。結(jié)論：該提取工藝穩(wěn)定，安全，簡(jiǎn)便易行。[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]頤正活脈丸；正交試驗(yàn)；提取工藝頤正活脈丸；正交試驗(yàn)；提取工藝OptimizingextractiontechnologyofYizhenghuomaiWanbythogonalTestZ

3、HUZhijunLImi(HenanUniversityofTCM)[Abstract]objective:TooptimizetheextractiontechnologyofzhenghuomaiWan.Methods:ThecontentofthetotalamountofursolicacidoleanolicaciddryextractiveweredetectedbyHPLC.thogonaltableintheexperi

4、mentofextractingwaschosentoresearchthebestprocedure.Results:TheoptimumprocessisA1B2C3D2:10foldof90%ethanoldecocting2times1.5heachtime.Conclusion:TheoptimumtechnologyofYizhenghuomaiWanissimplestableaneffective.[Keywds]Yiz

5、henghuomaiWanthogonaltest；Extractiontechnology頤正活脈丸由山茱萸、五味子、地黃、天竺黃、遠(yuǎn)志、菖蒲、山藥、茯苓等組成，臨床研究表明該方對(duì)心腦血管疾病有良好的防治作用。本文采用正交試驗(yàn)法，以熊果酸和齊墩果酸總量與浸膏得率為指標(biāo)對(duì)頤正活脈丸的提取工藝進(jìn)行研究，篩選最佳提取工藝。1儀器與試藥Agilent1100液相色譜儀；熊果酸、齊墩果酸和馬錢(qián)苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所純度≥98%)；甲醇

6、為色譜純其余試劑均為分析純。山茱萸、五味子、地黃、天竺黃、遠(yuǎn)志、菖蒲等藥材購(gòu)至河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，河南中醫(yī)學(xué)院生藥學(xué)科鑒定。2方法與結(jié)果2.1熊果酸和齊墩果酸HPLC法檢測(cè)[1]2.1.1色譜條件流動(dòng)相：甲醇水（90:10VV）；色譜柱：ZBAXEclipseXDBC18（250mm4.6μm5μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)215nm；流速0.6ml.min1柱溫25℃。2.1.2對(duì)照品溶液的制備取熊果酸和齊墩果酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml分別

7、含有熊果酸和齊墩果酸60μg的溶液。2.1.3供試品溶液的制備取按正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的工藝提取液，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，既得。2.1.4線性關(guān)系考查取不同濃度的熊果酸和齊墩果酸對(duì)照品溶液分別進(jìn)樣，以峰面積為縱坐標(biāo)（y）進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（x），經(jīng)回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線，齊墩果酸為y=1.272.049x14.776，r=0.999，齊墩果酸為y=1.350.048x28.707，r=0.999。結(jié)果表明熊果酸和齊墩果酸分別在進(jìn)樣量0.003～3μg之

8、間線性關(guān)系良好。2.1.5精密度試驗(yàn)精密吸取熊果酸和齊墩果酸對(duì)照品溶液10μL進(jìn)樣重復(fù)6次分別測(cè)定其面積分值結(jié)果熊果酸RSD為0.56%齊墩果酸RSD為0.88%。2.1.6穩(wěn)定性試驗(yàn)取適量供試品溶液于0、2、4、6、12、24h內(nèi)按“2.1.1”項(xiàng)下測(cè)定結(jié)果熊果酸峰面積RSD為1.05%齊墩果酸RSD為0.83%。供試品溶液在0~24h內(nèi)基本穩(wěn)定。表3熊果酸和齊墩果酸總量的方差分析表熊果酸和齊墩果酸總量的方差分析表方差來(lái)源離均差平方和

9、自由度均方F值P值A(chǔ)2.32321.162464.600C0.02320.0114.600D0.02620.0135.200誤差0.00520.0031.000注：F0.01(22)=99.00P?0.01表4干浸膏得率的方差分析表干浸膏得率的方差分析表方差來(lái)源離均差平方和自由度均方F值P值A(chǔ)18.12129.0603.910B11.12125.5602.399D86.111243.05518.582誤差4.63422.3171.00注

10、：F0.10(22)=9.00F0.05(22)=19.00P?0.052.4結(jié)果分析通過(guò)對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行直觀分析，以浸膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，最佳工藝條件為A2B3C1D3各因素的主次順序?yàn)镈、A、B、C；以熊果酸和齊墩果酸總量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，其最佳工藝條件為A1B2C3D3各因素的主次為A、C、D、B。方差分析表明，D因素對(duì)浸膏收率有顯著性影響，A因素熊果酸和齊墩果酸總量有極顯著影響。綜上分析，結(jié)合實(shí)際情況，確定A1B2C3D2為最佳提取工藝，

11、即10倍量90%乙醇提取2次，每次1.5h。2.5驗(yàn)證試驗(yàn)為考察優(yōu)選提取工藝的穩(wěn)定性，按處方量取藥材3份，加10倍量90%的乙醇，提取2次，每次回流1.5h，分別測(cè)定熊果酸和齊墩果酸總量及干浸膏得率。結(jié)果表明：用優(yōu)選的工藝條件提取，熊果酸和齊墩果酸總量及干浸膏得率均較高，且穩(wěn)定。3討論本實(shí)驗(yàn)中采用山茱萸中的主要成分熊果酸和齊墩果酸及浸膏得率為指標(biāo)優(yōu)選工藝，選擇可能影響提取工藝的4個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)化，確定了最佳提取工藝，為進(jìn)一步研究提供了基礎(chǔ)

12、。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明山茱萸中的有效成分熊果酸和齊墩果酸具有抗菌、降血糖、調(diào)節(jié)免疫等功能【2】，由于山茱萸中主要有效成分熊果酸和齊墩果酸為脂溶性成分，隨著乙醇濃度增大溶解度相應(yīng)增大。正交試驗(yàn)結(jié)果表明，乙醇濃度對(duì)熊果酸和齊墩果酸總量提取有顯著差異，隨濃度增加而提高。本文中以熊果酸和齊墩果酸作為指標(biāo)進(jìn)行含量測(cè)定，但不能完全代表復(fù)方的療效。[參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)][1]鄔瑾麗，項(xiàng)樂(lè)源，楊祉雯，等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選山茱萸的提取工藝[J].中國(guó)臨床藥學(xué)雜志