用細(xì)胞dna定量分析方法進(jìn)行子宮頸癌普查的臨床研究

1、用細(xì)胞 用細(xì)胞 DNA DNA 定量分析方法進(jìn)行子宮頸癌普查的臨床研究 定量分析方法進(jìn)行子宮頸癌普查的臨床研究作者：孫小蓉,李玉蘭，車東媛（1.武漢蘭丁腫瘤早期診斷檢測中心 武漢 430022；2.武漢市計劃生育委員會 武漢 430022） 【摘要】 目的 探索用細(xì)胞 DNA 定量分析方法進(jìn)行子宮頸癌普查，提高普查的工作效率和準(zhǔn)確性。方法 對參與子宮頸癌普查的 20000 名婦女取材，進(jìn)行液基薄層制片，然后分別進(jìn)行巴氏染色和 DNA 染

2、色。由細(xì)胞病理學(xué)醫(yī)生對巴氏染色片子做常規(guī)細(xì)胞檢查，用全自動 DNA 倍體分析系統(tǒng)對 DNA 染色片子進(jìn)行自動掃描診斷。結(jié)果 對常規(guī)細(xì)胞檢查結(jié)果在 LSIL 以上病例和全自動 DNA 倍體分析系統(tǒng)檢查可見異倍體細(xì)胞或異倍細(xì)胞峰的病例，建議進(jìn)一步做陰道鏡檢查以及子宮頸活檢。參加普查婦女中，有 1016 位婦女做了病理活檢。以病理診斷結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，計算出細(xì)胞 DNA 定量分析方法在篩查 CIN3 以上子宮頸病變的敏感度為82%，特異度為 71%

3、，而常規(guī)細(xì)胞學(xué)方法則分別為 52%和 92%。結(jié)論 細(xì)胞 DNA 定量分析方法在有條件的降低特異度情況下，能明顯提高宮頸癌普查的陽性檢出率。 【關(guān)鍵詞】 細(xì)胞 DNA 定量分析；全自動 DNA 倍體分析系統(tǒng)；宮頸癌；常規(guī)細(xì)胞學(xué) Cervical cancer screening by using DNA quantitative cytology SUN Xiao-rong, LI Yu-Lan, CHE Dong-yuan,

4、 Yan Xiang-chen, Ling Hui-fang, Tu Hong-zhang, Wang Jian. (1.Landing Center for Early Detection of Cancer, Wuhan 430022, China; 2. Family Plan Committe of Wuhan City, Wuhan 430022, China) 【Abstract】 Objective To

5、increase the sensitivity of cervical cancer screening by using DNA quantitative cytology. Methods A total of 20000 women were involved in this study. Cervical samples were taken by a cervix brush. Mon

6、olayer of cells were deposited onto microscope slides by liquid-based sampling preparation. Two slides were prepared from each case: one slide was stained by Papanicolaou stain for conventional cytology examinat

7、ion, while the other slide was stained by Feulgen method for determination of amount of DNA using a automated DNA imaging cytometry. Results All cases of LSIL, HSIL and cancer decided by conventional cytolo

8、gy and all cases with DNA amount greater than 5C (DNA Index>2.5) cells decided by automated DNA imaging cytometry were sent to colposcopy and biopsy. A total of 1016 women were followed by colposcopy exami

9、nation where biopsies were taken. The sensitivity of 82% at specificity of 71% were calculated for DNA quantitative cytology and sensitivity of 52% at 92% specificity for conventional cytology. Conclusions The screenin

10、g for high grade cervical neoplastic lesions and cervical cancer by fully automated imaging cytometry could be higher sensitivity under certain specificity. 【Key words】 DNA quantitative cytology, Fully automated imaging

11、cytometry, Cervical Cancer, Conventional cytology. 基金項目：國家“九五”科技攻關(guān)生物醫(yī)學(xué)工程項目（96-901-07-03） 武漢市科委重點(diǎn)攻關(guān)項目（2006001010） 作者單位：430022 武漢蘭丁腫瘤早期診斷檢測中心/361006 蘭丁麥克奧迪（廈門）醫(yī)療診斷系統(tǒng)有限公司（孫小蓉、車東媛、晏想成、凌慧芳、徐洪章、汪鍵，sunxr@landing-motic.com）；武漢市計

12、劃生育委員會（李玉蘭） 1 前 言 子宮頸細(xì)胞學(xué)檢查是檢測宮頸癌及癌前病變的主要方法。在發(fā)達(dá)國家，有性生活的婦女每年或每兩年進(jìn)行一次宮頸癌的普查已有十至幾十年的歷史，從而使子宮頸癌的發(fā)病率等。AcCell 系統(tǒng)根據(jù)不同細(xì)胞成分所具有的不同特征參數(shù)來完成自動細(xì)胞分類和計數(shù)過程，如正常上皮細(xì)胞，增生或癌變細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，中性白細(xì)胞及未參與診斷的垃圾細(xì)胞（重疊細(xì)胞核，聚焦不良細(xì)胞核和核碎片等）。標(biāo)準(zhǔn)對照細(xì)胞為同張玻片上的 100 個正常上皮細(xì)

13、胞，所測出的平均光密度(Intergrated Optical Density IOD)為 2C 的參考值，其 CV（Coefficient of Variation）值小于 5% 。根據(jù) AcCell 系統(tǒng)診斷軟件所做的細(xì)胞 DNA 倍體分析結(jié)果和建議有如下三種情況：①正常 2C 細(xì)胞為主，未見異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（圖 1A）；建議 1~2 年后復(fù)查。②出現(xiàn) DNA 指數(shù)大于 2.5 細(xì)胞及 DNA 指數(shù) 1 與 2

14、之間的細(xì)胞數(shù)超過被測細(xì)胞總數(shù)的 10%（圖 1B）；建議活檢。③出現(xiàn)異倍體細(xì)胞峰及大量 DNA 指數(shù)大于 2.5 細(xì)胞（圖 1C）；建議活檢。 凡是有 DNA 指數(shù)大于 2.5 細(xì)胞的玻片，都要通過細(xì)胞技術(shù)員在顯微鏡下逐一進(jìn)行核實，以排除 AcCell 系統(tǒng)將垃圾和重疊的細(xì)胞核誤認(rèn)為癌細(xì)胞或異常細(xì)胞。 圖 1：DNA 含量與細(xì)胞核面積分布圖 子宮頸細(xì)胞核由 Feulgen 染色，縱軸(y 軸)是表示細(xì)胞核的面積，大小以像素表示(1個像素

15、為 0.1µ m2)。橫軸(x 軸)是 DNA 含量。左圖 (A)正常子宮頸細(xì)胞 DNA 含量分布圖，未見 DNA 指數(shù)大于 2.5（5C）細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰。中圖 (B)可見少量細(xì)胞 DNA 指數(shù)大于 2.5（5C）細(xì)胞。右圖 (C)可見大量細(xì)胞 DNA 指數(shù)大于 2.5（5C）細(xì)胞。 2.5 陰道鏡及病理學(xué)檢查 凡是子宮頸常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查在 LSIL 及以上級別或 DNA 定量分析結(jié)果建議做進(jìn)一步臨床檢查的婦女，均建議進(jìn)

16、行陰道鏡的檢查并對子宮頸可疑部位進(jìn)行四點(diǎn)以上的組織活檢。每例活檢樣本由有經(jīng)驗的病理學(xué)醫(yī)生出病理診斷報告。病理診斷報告分別為正常、子宮頸炎、CIN1、CIN2、CIN3 或原位癌及浸潤癌。3.結(jié)果3.1 二 種 不 同 細(xì) 胞 學(xué) 方 法 的 篩 查 結(jié) 果在 18097 例 合 格 的 子 宮 頸 樣 本 中 ,常 規(guī) 細(xì) 胞 學(xué) 檢 查 發(fā) 現(xiàn) 16424 (90.75%) 例 正 常 ， 1673 (9.25%)例 為 異 常 ，

17、異 常 包 括 1011 (5.59%)例 為 ASCUS， 580 (3.21%)例 為 LSIL， 74 (0.41%)例 為 HSIL， 8 (0.04%)例 為 子 宮 頸 癌 。 而 在 同樣 的 樣 本 中 ， 經(jīng) AcCell 系 統(tǒng) 篩 查 發(fā) 現(xiàn) 17289 (95.54%)例 為 陰 性 ,未 見 DNA 指數(shù) 大 于 2.5 細(xì) 胞 ， 無 異 倍 體 細(xì) 胞 峰 ， 808 (4.46%)例 為 陽 性 （ 有