高熱對(duì)肝癌細(xì)胞肺耐藥蛋白表達(dá)及耐藥性的影響.pdf

1、目的：原發(fā)性肝癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，近年來隨著對(duì)疾病認(rèn)識(shí)的不斷提高，肝癌的治療水平也不斷發(fā)展，目前，主要采取以手術(shù)切除為主，化療、放療、射頻、生物治療相結(jié)合的綜合治療。由于存在多藥耐藥(Multidrug Resistence，MDR)，限制了化療在腫瘤治療上的作用，許多研究嘗試使用藥物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)，但收效不明顯。近年來，腫瘤熱療越來越受到人們的重視，國內(nèi)外許多研究認(rèn)為，化療藥物與加溫并用即熱化療可以增加藥物的細(xì)胞毒作用，這在若干

2、細(xì)胞株中已經(jīng)得到證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)通過研究多次加熱對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞肺耐藥蛋白(Lung Resistance Protein，LRP)表達(dá)的影響以及加熱后HepG2細(xì)胞對(duì)阿霉素敏感性的變化。旨在探討熱療與多藥耐藥的關(guān)系及熱化療在肝癌中的治療效果。
　　 方法:肝癌HepG2細(xì)胞在42 ℃恒溫水浴箱中加熱，60 min/次，1 次/d，共10d，獲取穩(wěn)定生長的加熱HepG2細(xì)胞。以未加熱HepG2細(xì)胞為對(duì)照，應(yīng)用熒光定量PCR和We

3、stern blot檢測兩種細(xì)胞LRP的mRNA和蛋白水平；通過體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)(MTT法)觀察阿霉素對(duì)兩種細(xì)胞生長抑制的影響，分析加熱后HepG2細(xì)胞對(duì)阿霉素敏感性的變化；應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測兩種細(xì)胞內(nèi)阿霉素的平均熒光強(qiáng)度，分析加熱對(duì)細(xì)胞內(nèi)藥物濃度的影響。
　　 結(jié)果：加熱HepG2細(xì)胞的LRP mRNA和蛋白水平較未加熱HepG2細(xì)胞分別增加(4.01±0.23)和(4.67±0.36)倍,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；未