苦瓜籽蛋白質(zhì)的提取與生物學(xué)活性研究.pdf

1、CIassifiedIndex：06297UDC：5439SouthwestUniversityofS‘enceandTechnoIogyCIenCeechn0OT3IMasterDegreeThesiSExtractionandBioactiVityDeterminatjonofProreinfromBitterMeIonSeedsGrade：2010Candidate：ZhangZhiqiangAcademiCDegreeAppIi

2、edfor：MasterDegreeSpeciaIity：AnaIyticaIOhemistrySuperviSOl“：AssociateProfessorChengLanyingJun2，2013西南科技大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文第1頁(yè)摘要本文以苦瓜籽為原料，利用凱式定氮法測(cè)定本地苦瓜籽蛋白質(zhì)的含量；利用考馬斯亮藍(lán)法和響應(yīng)面分析法研究了鹽溶法提取苦瓜籽蛋白質(zhì)的最佳工藝；采用SDSPAGE法分析了苦瓜籽總蛋白質(zhì)和硫酸銨分級(jí)沉淀純化后的蛋白質(zhì)

3、組分和相對(duì)含量；采用抑菌圈法研究總蛋白質(zhì)和各級(jí)硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、表面葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌的抑制效果：利用醇溶法提取苦瓜籽蛋白質(zhì)，通過(guò)DPPH法和普魯士藍(lán)法研究了苦瓜籽中醇溶蛋白質(zhì)的抗氧化效果。通過(guò)凱氏定氮法測(cè)得苦瓜種子中蛋白質(zhì)的含量為3213％。以苦瓜籽蛋白質(zhì)提取率為指標(biāo)，研究了NaCI溶液濃度、pH和提取時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)提取率的影響。根據(jù)BoxBenhnken中心組合設(shè)計(jì)原理設(shè)計(jì)試驗(yàn)，應(yīng)用SAS軟件進(jìn)行響應(yīng)面

4、分析，確定鹽溶法提取苦瓜籽蛋白質(zhì)的最佳工藝為：在料液比為l：6以及提取溫度為4。C下，NaCl溶液濃度為13mol／L，pH=88，提取時(shí)間為36h時(shí)，苦瓜籽蛋白質(zhì)具有最高提取率，為2380％，比試驗(yàn)優(yōu)化前提高了324倍。優(yōu)化苦瓜籽蛋白質(zhì)電泳分離條件，苦瓜籽總蛋白質(zhì)被分離出9種組分，測(cè)得其相對(duì)分子量從186kI)到1074kI)不等。結(jié)果還表明：在苦瓜籽總蛋白質(zhì)、30％硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)和60％硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)中，291kD的蛋白質(zhì)含量最

5、高；90％硫酸銨沉淀出的蛋白質(zhì)中共含有4種不同成分，其中以488kD的蛋白質(zhì)含量最高。研究苦瓜籽總蛋白質(zhì)和各級(jí)硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、表面葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌等常見(jiàn)細(xì)菌抑制效果。結(jié)果顯示：苦瓜籽總蛋白質(zhì)對(duì)四種細(xì)菌都有明顯抑制作用，其中對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌抑制作用較強(qiáng)，抑菌圈直徑為16姍；30％硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)抑制最強(qiáng)，抑菌圈直徑為15Imn；60％硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)的抑菌效果在三種沉淀蛋白質(zhì)中處