拔毛導(dǎo)致毛發(fā)色素化加深的機(jī)制研究.pdf

1、目的：毛囊膨大部的黑色素干細(xì)胞受外界多種損傷誘導(dǎo)激活，從而分化形成成熟的黑色素細(xì)胞，促進(jìn)毛發(fā)和皮膚黑色素化。然而，目前對毛囊黑色素干細(xì)胞應(yīng)答外界損傷的分子機(jī)制依舊不清楚。因此本研究通過拔毛損傷誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)，分析黑色素干細(xì)胞對拔毛損傷應(yīng)答的分子機(jī)制。
　　方法：為分析拔毛損傷對黑色素干細(xì)胞的影響，本研究采用P21天的C57BL/6J野生型小鼠，小鼠在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行頭部拔毛處理，隨后通過毛發(fā)石蠟切片、Melanin檢測等實(shí)驗(yàn)，分析拔毛處理

2、組與未處理組的毛發(fā)色素化程度情況。為分析拔毛損傷導(dǎo)致的毛發(fā)色素變化的分子機(jī)制，本研究首先通過HE組織染色、切片免疫熒光實(shí)驗(yàn)分析拔毛損傷對毛囊形態(tài)結(jié)構(gòu)以及黑色素細(xì)胞分布的影響；隨后，利用半定量PCR、Westen Blot實(shí)驗(yàn)分析拔毛損傷誘導(dǎo)的基因表達(dá)變化情況，找出參與拔毛誘導(dǎo)損傷過程中的重要因子。最后，為分析候選分子在拔毛誘導(dǎo)損傷過程中的功能，本研究利用基因敲除模式動(dòng)物結(jié)合拔毛損傷處理，利用Melanin含量檢測等手段分析該信號(hào)通路對毛

3、發(fā)色素化的影響。
　　結(jié)果：相比于對照組毛囊的靜息狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)組C57BL/6J野生型小鼠頭部毛發(fā)經(jīng)過P21天拔毛處理后，毛囊形態(tài)較對照組成熟，毛發(fā)石蠟切片與Melanin檢測均顯示較對照組色素化程度加深，而皮膚HE切片結(jié)果也顯示，實(shí)驗(yàn)組野生型小鼠毛囊內(nèi)黑色素細(xì)胞的分布除球部以外，在真皮、毛囊出口及毛囊間上皮處均有異常分布。半定量PCR、Western Blot實(shí)驗(yàn)、免疫熒光實(shí)驗(yàn)證明在野生型小鼠拔毛處理后，ET3的表達(dá)明顯上調(diào)。利用