玉米成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及再生體系建立.pdf

1、本試驗以成熟玉米種子Ki2為材料，通過對種子不同的切割方式、碳源、培養(yǎng)基、激素等對不同外植體愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化培養(yǎng)影響的研究，以尋求適合愈傷組織誘導(dǎo)、繼代、分化培養(yǎng)的外植體、碳源以及不同激素及激素間濃度配比等方面提供一個可參考的理論依據(jù)。 1. 通過種子不同切割方式(縱切、橫切)對愈傷組織誘導(dǎo)影響的研究，結(jié)果表明：種子全胚縱切的愈傷組織誘導(dǎo)率顯著高于橫切，部分種子橫切甚至不能誘導(dǎo)出愈傷組織。種子的這種切割方式可能與完整的成

2、熟種子相類似，器官間相互制約，不易脫分化形成愈傷組織。對種子縱切，一方面，由于兩個半胚機(jī)械損傷作用，有助于愈傷組織形成；另一方面，可抑制胚胎直接發(fā)生，有助于愈傷組織誘導(dǎo)。 2. 通過切取不同外植體(全胚、胚根、胚軸)對愈傷組織誘導(dǎo)影響的研究，結(jié)栗表明：不同外植體對相同激素及激素濃度所需量不同，同時，在相同激素及激素濃度條件下，不同外植體愈傷組織生長狀況差異顯著。胚根較適合愈傷組織誘導(dǎo)，其次為胚軸，全胚最差。 3.通過碳源

3、(麥芽糖、蔗糖)及培養(yǎng)基(LS、N6、MS)對愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化培養(yǎng)影響的研究，結(jié)果表明：麥芽糖較蔗糖更適合玉米成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化培養(yǎng)；LS培養(yǎng)基最有利于玉米成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化培養(yǎng)，其次為N6培養(yǎng)基。 4.通過2.4-D、NAA對愈傷組織誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)影響的研究，結(jié)果表明：低濃度及高濃度的2.4-D均不適宣玉米成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)。2.4-D濃度低于1.0mg/L全胚、胚根、胚軸愈傷組織誘

4、導(dǎo)及繼代過程中生長緩慢，長勢差；2.4-D濃度高于2.0mg/L全胚、胚軸愈傷組織生長受到傷害；2.4-D濃度高于2.5mg/L不利于胚根愈傷組織生長。 5.通過NAA對愈傷組織繼代及分化影響的研究，結(jié)果表明：NAA濃度為0.5mg/L時較適合以全胚、胚軸愈傷組織繼代培養(yǎng)；NAA濃度為0.5～0.6mg/L范圍內(nèi)明顯促進(jìn)胚根愈傷組織生長；并且，分別與濃度為2.0～2.5mg/L的2.4-D配合使用其繼代效果更加明顯；NAA的濃度

5、為0.5mg/L時，較適合不同外植體上愈傷組織的分化的培養(yǎng)。 6.通過6-BA對愈傷組織繼代及分化影響的研究，結(jié)果表明：6-BA的濃度為0.2mg/L時適合全胚、胚根、胚軸胚性愈傷組織的繼代培養(yǎng)；但高濃度的6-BA是導(dǎo)致試管苗變異的一個主要因素，所以，在分化過程中6-BA濃度不應(yīng)太高，當(dāng)6-BA的濃度為1.5mg/L時較適合玉米不同外植體愈傷組織的分化培養(yǎng)。 7.通過2.4-D與6-BA配合使用對愈傷組織繼代影響的研究，