野生百合高效再生體系建立及愈傷組織增殖調(diào)控研究.pdf

1、百合（Lilium spp.）被譽(yù)為“球根花卉之王”，是世界五大鮮切花之一。我國(guó)雖是主要的野生百合自然分布中心，但觀賞百合商品化栽培起步晚，育種和繁殖相對(duì)滯后。目前，國(guó)內(nèi)百合種球仍依賴(lài)從荷蘭等國(guó)進(jìn)口，百合種球國(guó)產(chǎn)化難題是制約我國(guó)百合商品化生產(chǎn)的瓶頸問(wèn)題。因此，研究百合高效繁育和利用遺傳轉(zhuǎn)化等現(xiàn)代育種技術(shù)改良性狀，具有重要的實(shí)踐價(jià)值。-近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的浙江省分布的野百合新變種----巨球百合（L.brownii var.giganteum），

2、具有鱗莖特大，鱗片數(shù)多，花大而美麗等特點(diǎn)，極具研究和開(kāi)發(fā)價(jià)值，也是百合育種的優(yōu)良材料。-本文以百合屬野生百合種質(zhì)資源為研究材料，建立并優(yōu)化百合高效再生體系;以巨球百合為材料，建立并優(yōu)化遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)，初步探討了愈傷組織培養(yǎng)中內(nèi)外源激素的相互效應(yīng)，以期為百合屬植物野生種質(zhì)資源的保存和高效繁育，以及利用優(yōu)異野生百合材料構(gòu)建遺傳轉(zhuǎn)化體系奠定基礎(chǔ)。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、艅兤ぬ幚韺?duì)提高野生百合種子的萌發(fā)速度和萌發(fā)率有一定的效果。剝皮

3、處理下，巨球百合和宜昌百合種子萌發(fā)的最適培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA，艷紅鹿子百合為MS+2.0mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA，該培養(yǎng)基能有效提高種子萌發(fā)率和誘導(dǎo)率，所形成的植株健壯，生長(zhǎng)速度快。巨球百合的種子生活力和萌發(fā)性強(qiáng)，適合無(wú)菌播種繁殖，是優(yōu)良的野生百合種質(zhì)資源。
　?、凭耷虬俸稀⑺幇俸虾途淼ぐ俸系镊[片誘導(dǎo)小鱗莖的最適培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L NAA、M

4、S和MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～1.0 mg/LNAA，能有效促使鱗片誘導(dǎo)小鱗莖，所形成的小鱗莖個(gè)數(shù)多，生長(zhǎng)健壯。其中，巨球百合鱗片誘導(dǎo)小鱗莖與無(wú)菌播種的最適培養(yǎng)基配方相同。
　?、窃?種外植體（葉片、葉柄和小鱗莖）中，巨球百合胚性愈傷誘導(dǎo)的最適外植體為葉片，對(duì)應(yīng)葉片誘導(dǎo)愈傷的最適誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.4mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+1.0mg/L2，4-D+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂，該培養(yǎng)基愈傷誘

5、導(dǎo)率達(dá)92.50％，外植體褐化率僅為5.00％，且誘導(dǎo)出的愈傷多數(shù)為胚性愈傷組織。
　　⑷巨球百合胚性愈傷組織最佳增殖方式為采用暗培養(yǎng)，最適增殖培養(yǎng)基為MS+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂+0.1 mg/L2，4-D+0.5～1.0mg/L NAA+0.1 mg/L6-BA/TDZ/ZR，所形成的愈傷組織長(zhǎng)勢(shì)良好、表面干燥、顆粒性明顯，且誘芽數(shù)和生根數(shù)少。通過(guò)PAS染色法觀察不同狀態(tài)的愈傷組織發(fā)現(xiàn)，胚性愈傷組織多為淡黃色或黃色，細(xì)胞