AtchyB基因表達(dá)對(duì)轉(zhuǎn)基因洋桔?？寡趸缘挠绊?pdf

1、洋桔梗(Eustoma grandiflorum Shinn)是著名的觀賞型花卉,在切花市場(chǎng)上非常的受歡迎。本文研究的實(shí)驗(yàn)材料為轉(zhuǎn)β-胡蘿卜素羥化酶基因(AtchyB,來自擬南芥)的T1代洋桔梗,Atchy B基因是類胡蘿卜素生物合成途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶基因。
　　收集了轉(zhuǎn)基因洋桔梗的T1代種子,培育成苗后取葉片進(jìn)行PCR、RT-PCR、Northern blot檢測(cè),確定L8和L25兩個(gè)陽性品系。
　　野生植株(wild l

2、ine,WT)和轉(zhuǎn)基因植株L8、L25進(jìn)行紫外UV-B脅迫,作為實(shí)驗(yàn)組,非紫外脅迫的WT、L8和L25作為對(duì)照組。測(cè)得兩組的光合參數(shù)、類胡蘿卜素含量和酶活性,對(duì)比分析得出:1)脅迫使得基因表達(dá)水平強(qiáng)化,轉(zhuǎn)基因系的抗氧化性相關(guān)類胡蘿卜素顯著高于WT,葉黃素循環(huán)池顯著放大;2)酶促系統(tǒng)對(duì)非酶促系統(tǒng)產(chǎn)生影響,使得轉(zhuǎn)基因植株與WT植株的酶活力存在差異。和野生植株比較,轉(zhuǎn)基因系的SOD對(duì)紫外脅迫更敏感,但MDA無顯著差異,這可能是兩種系統(tǒng)協(xié)調(diào)作用

3、的結(jié)果;3)脅迫后,轉(zhuǎn)基因系Fv/Fm和ΦPSⅡ值顯著高于對(duì)照,體現(xiàn)出其更強(qiáng)的光合能力。qP值顯示基因表達(dá)對(duì)洋桔梗光化學(xué)猝滅影響不大。其中L25的NPQ顯著高于WT,可見其非光化學(xué)淬滅能力有所提高。所以說,AtchyB基因過表達(dá)能夠使轉(zhuǎn)基因植株在紫外脅迫下光合效率更高,抗逆能力更強(qiáng)。
　　AtchyB基因的表達(dá)使得洋桔梗中黃色色素含量升高,使其開花后期白色花瓣變黃,到枯萎時(shí)仍表現(xiàn)鮮艷的黃色。研究發(fā)現(xiàn)三月份播種的洋桔梗花期最長(zhǎng),轉(zhuǎn)基