β3腎上腺素能受體激動劑BRL37344對前脂肪細胞分化的影響.pdf

1、目的:觀察β3腎上腺素能受體激動劑BRL37344對前脂肪細胞分化的影響，并探討其可能的作用機制。
　　 方法:分別培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細胞及原代人體前脂肪細胞。待兩種前脂肪細胞細胞貼壁、融合后2天，開始誘導(dǎo)分化細胞，使之進入分化階段。在細胞誘導(dǎo)分化的過程中，兩種細胞均分為4個不同的處理組:空白對照組，常規(guī)分化組，BRL37344處理組，常規(guī)分化+BRL37344組;使用不同劑量(10-9，10-8，10-7mol/L)的BR

2、L37344作用8天，各組細胞均進行油紅O染色，并提取各組細胞RNA，應(yīng)用RT-PCR反應(yīng)檢測各組脂肪細胞分化過程的重要調(diào)節(jié)因子過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptor,PPARγ2)，以及它的下游基因同時也是脂肪細胞分化標志基因的脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(adipocytefattyacidbindingproteins，aP2)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein

3、lipase，LPL)mRNA轉(zhuǎn)錄水平;并使用10-7mol/LBRL37344處理各組細胞，在選取三個分化時間點(0、2、8d)，進行油紅O染色，并提取各組細胞的RNA，分別檢測在這三天中，各組的細胞內(nèi)的脂肪細胞分化相關(guān)基因PPARγ2、aP2、LPLmRNA的轉(zhuǎn)錄水平。
　　 結(jié)果:(1)不同劑量(10-9，10-8，10-7mol/L)的BRL37344作用3T3-L1前脂肪細胞8天后，呈劑量依賴性的下調(diào)前脂肪細胞細胞內(nèi)的

4、PPARγ2、aP2、LPLmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，其中10-7mol/L刺激作用最強(P＜0.05);(2)在選取的3個分化時間點(0、2、8d)中，各組細胞PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平均呈線性增加;但與空白對照組相比，BRL37344處理組細胞內(nèi)PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平均降低(P＜0.05);與常規(guī)分化組相比，常規(guī)分化+BRL37344處理組細胞內(nèi)PPARγ2、aP2、LPLmRNA水平也均降低(P＜0.05