維拉帕米對脊髓重度損傷神經(jīng)保護作用的動物實驗研究.pdf

1、目的：
　　脊髓損傷是導致殘疾的主要原因。其中包括原發(fā)性和繼發(fā)性損傷兩種機制。其中，鈣離子失衡是繼發(fā)性損傷的機制之一。維拉帕米是一種鈣離子通道阻滯劑，可以通過抑制細胞膜上鈣離子通道發(fā)揮減少鈣離子內(nèi)流。目前，維拉帕米對脊髓神經(jīng)系統(tǒng)損傷后是否發(fā)揮神經(jīng)保護作用尚無相關(guān)研究報道。本研究觀察維拉帕米干預后大鼠損傷脊髓的7.0T-MRI成像特征，并應用DTI掃描觀察其變化特征。通過損傷脊髓的組織病理學研究觀察脊髓神經(jīng)元存活數(shù)及 GFAP表達的

2、情況。探討維拉帕米在損傷脊髓神經(jīng)中的保護作用。為 SCI動物實驗研究提供一定的實驗技術(shù)方法，探索脊髓損傷治療的新方法。
　　方法：
　　⑴建立大鼠SCI模型。將42只SD大鼠隨機分組，采用改良Allen's法建立大鼠脊髓重度損傷模型，隨機分成空白對照組和維拉帕米治療組，每組18只，假手術(shù)組6只。采用BBB運動功能評分法，SCI前及SCI后1天、2周和4周評估大鼠后肢運動功能。⑵檢測維拉帕米治療SCI后大鼠脊髓影像學改變。術(shù)后

3、1天、2周和4周分別行常規(guī)MRI和DTI檢查。⑶檢測維拉帕米治療 SCI后大鼠脊髓組織病理學改變。采用尼氏染色觀察各組大鼠脊髓神經(jīng)元的表達，免疫熒光檢測GFAP情況。
　　結(jié)果：
　?、偌偈中g(shù)組BBB評分均高于對照組及維拉帕米治療組(P<0.001)。SCI后1天，對照組及治療組所有大鼠評分為0分。隨后時間變化評分呈逐漸升高，治療組與對照組比較評分升高程度增高(P<0.001)。②SCI后1天及2周，T2WI表現(xiàn)為SCI區(qū)域

4、與周圍組織邊界不清的高信號影；SCI后4周，SCI區(qū)為邊界清楚信號影，對照組損傷中心有不規(guī)則橢圓形高信號影；治療組SCI中心點狀高信號影。③FA成像，在2周和4周時，對照組FA均降低(P<0.01)。對照組2周及4周較1天時FA值降低(P<0.01)。ADC圖像對照組在4周的ADC測量值較治療組有升高(P<0.01)；對照組比較各個時間點逐步升高，(P<0.01)；治療組2周與1天、4周有明顯升高(P<0.01)。④尼氏染色神經(jīng)元細胞光

5、鏡下觀察呈現(xiàn)深藍色顆粒，對照組與治療組各個時間點均減少(P<0.01)。對照組2周及4周時均與1天比較神經(jīng)細胞減少(P<0.01)。光鏡下觀察對照組2周與4周時神經(jīng)元細胞排列均紊亂。⑤對照組及治療組與假手術(shù)組比較GFAP均明顯升高(P<0.01)。對照組在4周時間點GFAP測量值較治療組有升高(P<0.01)。對照組GFAP測量值呈逐步升高(P<0.01)。治療組隨時間變化呈現(xiàn)先上升后下降變化，在2周時達到頂峰。
　　結(jié)論：