梓醇對缺血損傷神經細胞的保護作用研究.pdf

1、本研究旨在探討梓醇在缺血再灌注細胞模型中的保護作用及機制。 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(pheochromocytomacellline，PC12)是常用的神經生物和神經化學研究的細胞模型。本文以PC12細胞建立氧糖剝奪(OGD)損傷模型，利用MTT(3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenylterazoliumbromide)法檢測了梓醇對缺血損傷的PC12細胞的保護效應；采用LDH(l

2、actatedehydrogenase)法和熒光染色法，檢測了梓醇對細胞膜的影響。結果表明梓醇對損傷細胞具有明顯的保護活性，穩(wěn)定了膜結構，保護細胞免受損傷。 應用生物化學方法，借助于紫外分光光度儀、熒光酶標儀和流式細胞技術，觀察梓醇對PC12細胞缺血損傷抗氧化酶SOD(superoxidedismutase)、GSH-Px(glutathioneperoxidase)和iNOS酶活性以及脂質過氧化物MDA(malondiald

3、ehyde)和ROS含量，線粒體膜電位，P53和Bcl-2蛋白，凋亡通路下游半胱氨酸酶-3(Caspase-3)狀態(tài)的影響。結果顯示，梓醇可明顯提高SOD和GSH-Px酶活性，降低iNOS酶活性以及MDA和ROS含量，提高Bcl-2蛋白的表達和線粒體膜電位，抑制P53蛋白的表達和Caspase-3的活性，表明梓醇保護機制可能是提高內源性抗氧化酶活力，增加自由基清除，抑制自由基生成，降低自由基的含量，并通過抑制線粒體介導的細胞凋亡途徑，即

4、通過調節(jié)線粒體膜上Bcl-2和P53蛋白表達和線粒體膜電位來實現的。同時，梓醇抑制caspase-3的活化，從而抑制了PC12細胞的凋亡。 為了進一步說明梓醇對缺血誘導神經細胞的保護作用，本文采用了皮層神經元建立氧糖剝奪(OGD)損傷模型，觀察梓醇對皮層神經元細胞缺血損傷抗氧化酶SOD、GSH-Px和iNOS酶活性以及脂質過氧化物MDA的含量的影響。結果顯示，梓醇可明顯提高SOD和GSH-Px酶活性，降低MDA含量和iNOS酶