microRNA在維甲酸誘導的神經細胞分化中的作用.pdf

1、本文探討了維甲酸(RA)誘導小鼠成神經瘤細胞N2a的分化，并研究microRNA(miRNA)對RA誘導神經元分化中的作用。首先，我們驗證了N2a是否能在維甲酸(RA)的誘導下分化為神經元。結果表明，經過5天的RA誘導，N2a細胞的神經突起延伸，胞體面積增大，有明顯的分化誘導作用，分化的N2a細胞占總細胞的數量約為40％。進一步的實驗表明，成熟神經元標記蛋白MAP2的表達量明顯增加，證實了經RA處理后，N2a細胞向神經元方向分化。

2、>　　 大量實驗表明，miRNA在神經系統(tǒng)發(fā)育和神經元分化過程中起重要作用，但miRNA在RA誘導的N2a細胞分化過程中的作用尚未見報道。本文系統(tǒng)檢測了RA誘導N2a細胞后miRNA的表達變化，其中包括了miR-124、miR-125b、miR-9和let-7a。實驗結果表明，N2a細胞經過RA處理后，miR-124、miR-9表達量明顯上升，而miR-125b的表達量下降，let-7a的表達沒有發(fā)生顯著改變。
　　 我們檢測

3、了三種miRNA在N2a細胞分化中的作用，首先，在N2a細胞中過量表達或抑制miR-124，然后通過觀察細胞的形態(tài)變化檢測其對神經細胞分化的作用。實驗結果表明，過量表達miR-124能有效誘導N2a細胞神經突起的生長，而抑制過表達的miR-124則幾乎完全阻斷了這種形態(tài)變化。免疫組化分析表明，過量表達miR-124后，MAP2蛋白的表達量明顯增加，進一步證實了，miR-124過量表達誘導了N2a細胞向神經元方向分化。過量表達miR-12