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文檔簡介
1、目的:
采用高脂飲食喂養(yǎng),建立非酒精性脂肪肝炎大鼠模型,研究茵芩清肝湯對非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠核蛋白因子NF-κB及炎性因子IL-6的影響,探尋茵芩清肝湯治療非酒精性脂肪肝炎的作用機(jī)制,為臨床治療提供新的思路。
方法:
將50只SPF級成年SD大鼠根據(jù)體重按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組,分別為空白組、模型組、茵芩清肝湯低劑量組(中藥低劑量組)、茵芩清肝湯高劑量組(中藥高劑量組)、陽性對照組(西藥組),每組均為1
2、0只。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后進(jìn)行造模,空白組采用普通飼料喂養(yǎng),其余各組采用高脂飼料喂養(yǎng)兩周進(jìn)行造模。造模完成后,空白組繼續(xù)給予普通飼料喂養(yǎng)8周,其余各組繼續(xù)給予高脂飲食喂養(yǎng)8周。大鼠造模兩周后開始給藥,以60kg成人常用臨床劑量折算出大鼠用藥劑量予以灌胃,中藥低劑量組按10.52g/kg灌胃;中藥高劑量組按21.04g/kg灌胃;西藥組按0.125g/kg灌胃;模型組及空白組以等體積蒸餾水灌胃。分別于實(shí)驗(yàn)第4周后各組隨機(jī)取5只大鼠,灌喂后
3、禁食24小時,稱重后用水合氯醛麻醉大鼠,迅速摘眼球取血。取全血于2500轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,取血清,檢測相應(yīng)的AST、ALT;取全血樣品于室溫放置2小時后1000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,取上清置于-80℃冰箱保存,待測;取血后迅速摘取肝臟,觀察其大體形態(tài)并記錄,稱大鼠肝臟濕質(zhì)量,計算肝指數(shù)(肝濕質(zhì)量/體質(zhì)量3100%);自肝右葉取1g組織在4℃條件下制成l00g/L肝勻漿,3000r/min離心l0min后取上清液保存-80℃冰箱,待測。實(shí)
4、驗(yàn)第8周后將剩余大鼠灌喂后禁食24小時,采用上述同樣方法留取標(biāo)本。
結(jié)果:
1.實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠均無死亡。空白組的各大鼠毛發(fā)柔軟、有光澤,精神狀態(tài)良好,取材時肉眼觀察肝臟顏色紅潤。模型組各大鼠毛發(fā)紊亂、無光澤,精神萎靡,大鼠體重快速增長,取材時肉眼觀察肝臟顏色變黃,切面油膩。茵芩清肝湯高、低劑量組及西藥組的各大鼠毛發(fā)、精神狀態(tài)情況較空白組差,但較模型組好,取材時肝臟肉眼觀察顏色變淺,腫大不明顯,與周邊臟器黏連少。
5、r> 2.模型組大鼠的肝指數(shù)、血清中AST、ALT以及IL-6、NF-κBp65均顯著升高,與空白組比較有顯著性差異((P<0.01);中藥低劑量組大鼠的肝指數(shù)、血清中AST、ALT以及IL-6、NF-κBp65均有明顯下降,與模型組比較有顯著性差異((P<0.01);西藥組大鼠的肝指數(shù)、血清中AST、ALT以及IL-6、NF-κBp65均有明顯下降,與中藥低劑量組比較有顯著性差異((P<0.01);中藥高劑量組大鼠的肝指數(shù)、血清中
6、AST、ALT與西藥組比較無明顯差異性(P>0.05),IL-6、NF-κBp65均顯著下降,與西藥組比較有顯著性差異((P<0.01)。
結(jié)論:
茵芩清肝湯對大鼠肝臟具有保護(hù)作用,可以降低NASH模型大鼠的AST、ALT,并有明顯的抗炎效果,可降低NASH引起的NF-κB及IL-6表達(dá)的上升。綜上所述,茵芩清肝湯可阻斷NASH模型大鼠NF-κB的激活,減輕炎性因子IL-6的釋放,降低AST、ALT,從而起到保護(hù)肝細(xì)
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