1,25(OH)2D3通過抑制NLRP3炎癥小體激活保護高糖誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞功能障礙.pdf

1、目的:
　　糖尿病視網(wǎng)膜病變是一種嚴重的糖尿病并發(fā)癥，主要病理生理基礎(chǔ)是微血管滲透性增大，血視網(wǎng)膜屏障破壞，造成出血和滲出。盡管大量研究證實了慢性高血糖與糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)生和發(fā)展有著密不可分的聯(lián)系，但慢性高血糖影響視網(wǎng)膜功能的詳細機制仍然再探索之中。因此，研究視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞功能障礙的機制在治療和預(yù)防糖尿病視網(wǎng)膜病變上具有重要意義。維生素D3除了傳統(tǒng)的維持機體鈣磷穩(wěn)態(tài)之外，還具有廣泛生物學(xué)功能。本研究從體內(nèi)和體外兩個層面觀察

2、維生素D3水平與視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞功能的關(guān)系以及其是否具有保護高糖狀態(tài)下視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞功能障礙的作用以及具體的機制。
　　方法:
　　動物實驗：老鼠隨機分為3組，進行為期5周的實驗：(1)正常鼠，（2）糖尿病鼠，（3）糖尿病鼠加VD3(233.3U/kg/wk)干預(yù)5周。老鼠按照60mg/kg使用STZ腹腔注射，48小時血糖高于16.7mmol/L認為造模成功。采用western blot、免疫組化、免疫熒光檢測視網(wǎng)膜組

3、織中NLRP3水平。Evans Blue檢測視網(wǎng)膜血管通透性。
　　細胞實驗：在體外，人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞分別以低糖(5.5mmol/L)和高糖(30mmol/L)孵育2天，并同時給予1,25(OH)2D3干預(yù)，檢測1,25(OH)2D3對人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞凋亡的影響、活性氧（ROS）生成，探究具體通路和機制。
　　結(jié)果:
　　動物實驗：給予維生素D3干預(yù)組與糖尿病組相比，維生素D3干預(yù)能顯著減輕糖尿病大鼠血視網(wǎng)

4、膜屏障破壞，維護視網(wǎng)膜正常結(jié)構(gòu)和功能，抑制NLRP3炎癥小體表達。
　　細胞實驗：維生素D3減輕因高糖孵育48h所造成的視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞凋亡及氧化應(yīng)激。維生素D3能顯著降低高糖誘導(dǎo)的NLRP3表達增加，同時降低NLRP3炎癥通路其他蛋白包括ASC、TXNIP和IL-1β的表達。
　　結(jié)論:
　　1.維生素D3能顯著改善高糖誘導(dǎo)的SD大鼠視網(wǎng)膜血管功能，抑制視網(wǎng)膜組織中NLRP3通路的激活。
　　2.維生素D3