1,25(OH)2D3對U-937細(xì)胞高糖負(fù)荷損傷改善效果的實驗研究.pdf

1、背景及目的:維生素D(VD)是一種脂溶性維生素,在調(diào)節(jié)鈣磷代謝、骨骼代謝、骨質(zhì)形成等方面起重要作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn),VD除傳統(tǒng)鈣磷調(diào)節(jié)作用外,還參與炎性反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、糖脂代謝等病理生理過程。研究發(fā)現(xiàn),VD在2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,血清VD水平與2型糖尿病發(fā)病呈負(fù)相關(guān),補(bǔ)充VD可能成為糖尿病的預(yù)防及治療手段之一。本課題旨在研究高糖負(fù)荷下U-937細(xì)胞功能的損傷,以及1,25(OH)2D3對U-937細(xì)胞高糖負(fù)荷損傷的改善效果

2、,并探討相關(guān)生物學(xué)機(jī)制,為維生素D在糖尿病人群的合理應(yīng)用提供依據(jù)。
　　 方法:采用人U-937單核細(xì)胞株,將細(xì)胞分為六組,每組均設(shè)8個復(fù)孔,干預(yù)不同濃度的葡萄糖,葡萄糖濃度分別為11mmol/L(對照組)、15mmol/L(高糖1組)、20mmol/L(高糖2組)、25mmol/L(高糖3組)、30mmol/L(高糖4組)、45mmnol/L(高糖5組),干預(yù)24小時后檢測各組單核細(xì)胞的吞噬功能、白細(xì)胞介素6(IL-6)及抵抗

3、素分泌的情況。根據(jù)上述實驗結(jié)果以45mmol/L的葡萄糖濃度建立U-937細(xì)胞的高糖狀態(tài),將細(xì)胞株分為五組,每組均設(shè)8個復(fù)孔,每組均干預(yù)45mmol/L的葡萄糖24小時,24小時后高糖狀態(tài)建立。除對照組外,各實驗組再分別干預(yù)不同濃度的1,25(OH)2D3,濃度分別為3.2×10-11mol/L(VD31組)、1.6×10-10mol/L(VD32組)、8×10-10mol/L(VD33組)、4×10-9mol/L(VD34組),干預(yù)2

4、4小時后檢測各組單核細(xì)胞的吞噬功能、IL-6及抵抗素分泌的情況。單核細(xì)胞的吞噬功能采用流式細(xì)胞術(shù)(Flow CytoMetry,FCM)檢測、IL-6和抵抗素采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測。
　　 結(jié)果:干預(yù)不同濃度葡萄糖24小時后,單核細(xì)胞的吞噬功能在高糖4組(30mmol/L)和高糖5組(45mmol/L)分別為38.74和35.03,顯著低于對照組的46.66;抵抗素的濃度在高糖2組(20mmol/L)、高

5、糖3組(25mmol/L)、高糖4組、高糖5組分別為15.74ng/mL、15.54 ng/mL、17.97 ng/mL和28.04 ng/mL,顯著高于對照組的11.63ng/mL;IL-6的濃度在高糖4組、高糖5組分別為20.9 pg/mL和31.68 pg/mL,顯著高于對照組的15.55 pg/mL。對高糖狀態(tài)下的單核細(xì)胞干預(yù)不同濃度的1,25(OH)2D3后,熒光功能在VD32組(1.6×10-10mol/L)為41.2,顯著