綠原酸聯(lián)合左氧氟沙星對肺炎克雷伯菌生物膜的體外抑制現(xiàn)象觀察.pdf

1、背景與目的：
　　肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，簡稱KPN）是導致醫(yī)院內(nèi)感染的常見病原菌，可引起呼吸道、消化道和泌尿系統(tǒng)感染。根據(jù)2013年中國CHINET細菌耐藥性監(jiān)測報道，在腸桿菌科細菌中克雷伯菌屬耐藥性較上年有所增多，且在對碳青霉烯類耐藥株中，以肺炎克雷伯菌為最多，其對亞胺培南和美洛培南的耐藥率均＞10.0％。KPN容易產(chǎn)生生物膜（biofilm,BF），將細菌層層包裹，增加該菌對抗菌藥物的耐受性

2、。隨著對生物被膜研究的深入，發(fā)現(xiàn)KPN對抗生素的耐藥性與生物膜形成密切有關(guān)。生物膜的主要組成物質(zhì)是多糖蛋白復(fù)合物，國內(nèi)外研究表明，喹諾酮類藥物與大環(huán)內(nèi)酯類藥物聯(lián)合使用可以有效抑制細菌合成多糖蛋白復(fù)合物，從而抑制生物膜的形成。綠原酸（Chlorogenic acid，簡稱CA）是中藥有效成分，由金銀花等中草藥提取。有資料顯示綠原酸可以抑制銅綠假單胞菌的生物膜形成，但綠原酸對同樣容易產(chǎn)生生物膜的KPN抑制作用如何則鮮有報道。
　　本研

3、究擬先對某醫(yī)院肺炎克雷伯菌臨床分布及耐藥情況進行分析，同時檢測形成BF肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型，再通過體外實驗，探討綠原酸對KPN生物膜的影響及與左氧氟沙星（LEV）聯(lián)合對KPN的作用。為臨床制定合理科學的抗菌治療策略提供依據(jù)。
　　方法：
　　收集廣州某三甲醫(yī)院臨床分離肺炎克雷伯菌62株，進行鑒定及藥敏分析，采用半定量結(jié)晶紫染色法進行生物膜陽性菌株篩選，同時采用PCR法對這類菌株進行ESBLs基因型檢測、并構(gòu)建生物膜

4、模型及進行藥物干擾研究。
　　結(jié)果：
　　共分離鑒定出62株肺炎克雷伯菌株，其中33株菌生物膜檢測陽性，占53.2%（33/62）。產(chǎn)BF菌株中檢出超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）菌株24株，這24株ESBLs陽性菌株中SHV基因型的占54.17%（13/24），TEM基因型占41.67%（10/24），有4株同時存在SHV和TEM基因，未檢測出CTX-M基因。經(jīng)體外建模及藥物干擾，單獨藥物組顯微鏡下黑色絮狀物（代表致密生物