2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩82頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
  本課題擬探討肺炎克雷伯菌生物膜形成能力與耐藥的相關(guān)性,多重耐藥肺炎克雷伯菌外排泵基因的分布情況以及外排泵基因acrA在生物膜內(nèi)的表達(dá)情況,以及外排泵抑制劑羰酰氰間氯苯腙(carbonyl cyanide mchlorophenylhydrazone,CCCP)對肺炎克雷伯菌生物膜形成影響。深入了解肺炎克雷伯菌生物膜耐藥機(jī)制,為有效防控肺炎克雷伯菌感染提供科學(xué)依據(jù)。
  方法:
  1.收集西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)

2、院2017年1月至2017年6月臨床感染患者樣本中分離的61株非重復(fù)肺炎克雷伯菌。利用MicroScan WalkAway96Plus全自動微生物鑒定/藥敏測試系統(tǒng)進(jìn)行鑒定,對標(biāo)本來源和科室分布進(jìn)行分析,并分析其耐藥譜。2.結(jié)晶紫染色法和共聚焦激光掃描顯微鏡(confocal laser scanning microscopy,CLSM)法評價(jià)肺炎克雷伯菌形成生物膜能力,分析肺炎克雷伯菌生物膜形成能力的強(qiáng)弱與耐藥的相關(guān)性。3.隨機(jī)抽取1

3、6株生物膜形成能力不同的菌株,繪制肺炎克雷伯菌生物膜生長曲線,微量肉湯稀釋法檢測這16株菌對頭孢吡肟、阿米卡星、環(huán)丙沙星、亞胺培南、多粘菌素B最低抑菌濃度(Minimum inhibitory concentration,MIC)以及最低生物膜清除濃度(Minimal biofilm eradicate concentration,MBEC),分析MIC、MBEC與其生物膜形成能力的相關(guān)性。4.用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Ch

4、ain Reaction,PCR)技術(shù)檢測28株多重耐藥肺炎克雷伯菌外排泵基因acrA、emrB、oqxA、qacE△1攜帶情況,并運(yùn)用(reversetranscription-PCR,RT-PCR)技術(shù)分析acrA基因陽性菌株在生物膜狀態(tài)和浮游狀態(tài)的表達(dá)情況。5.結(jié)晶紫染色法分析不同濃度的外排泵抑制劑CCCP對肺炎克雷伯菌生物膜形成的影響。
  結(jié)果:
  1.61株肺炎克雷伯菌臨床分離菌株中,主要來自于血液34株,占5

5、5.74%,其次是痰16株,占26.22%,分泌物8株,占13.11%,尿液3株,占4.92%。臨床科室分布以ICU病房檢出率最高,為21.31%,其次是呼吸科病房,檢出率為13.11%。檢出多重耐藥肺炎克雷伯菌(Multi-drug resistant acinetobacter klebsiella pneumoniae,MDR-Kpn)28株,檢出率為45.9%(28/61),非多重耐藥菌33株,檢出率54.1%(33/61)。M

6、DR-Kpn對包括氨芐西林、頭孢唑林等13種抗菌藥物耐藥率在50%以上,僅對美羅培南,亞胺培南,厄他培南,阿米卡星和頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率低。將MDR-Kpn(n=28)與非MDR-Kpn(n=33)兩組對23種抗菌藥物的耐藥率進(jìn)行比較,MDR-Kpn對除氨芐西林、美羅培南、亞胺培南、厄他培南、阿米卡星和頭孢哌酮/舒巴坦外的17種抗菌藥物的耐藥率均明顯高于非MDR-Kpn菌株(P<0.05)。2.61株菌中,只有Kpn216、Kpn22

7、5兩株菌不能形成生物膜,生物膜陽性率為96.72%,其中,生物膜強(qiáng)陽性的14株,陽性27株,弱陽性18株,多重耐藥菌與非多重耐藥菌生物膜形成能力無明顯差異(P>0.05)。3.隨機(jī)選擇生物膜形成能力強(qiáng)的8株菌和生物膜形成能力弱的8株菌,檢測生長曲線,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌之間生長率的差異不明顯,說明肺炎克雷伯菌生物膜形成能力的不同并非由于細(xì)菌生長率的不同造成。定量檢測16株菌對頭孢吡肟、阿米卡星、環(huán)丙沙星、亞胺培南、多粘菌素B的最低抑菌濃度以及最低生

8、物膜清除濃度,結(jié)果是Kpn形成生物膜后,對不同抗菌藥物的耐藥能力均有所增長,對頭孢吡肟,MIC為4-64ug/ml,MBEC為320-2560ug/ml,增幅為20-640倍。對阿米卡星,MIC為1-16ug/ml,MBEC為80-5120ug/ml,增幅為40-5120倍。對環(huán)丙沙星,MIC為0.25-8ug/ml,MBEC為40-5120ug/ml,增幅為80-5120倍。對亞胺培南,MIC為0.25-16ug/ml,MBEC為16

9、0-2560ug/ml,增幅為80-5120倍。對多粘菌素B,MIC為0.5-2ug/ml,MBEC為2-512ug/ml,增幅為4-512倍。經(jīng)過分析,不同菌株MIC值與MBEC值對頭孢吡肟(r=0.628,p=0.01)、環(huán)丙沙星(r=0.81,p=0.0001)存在正相關(guān)性,即菌株MIC值越大,形成生物膜后的MBEC值越大。對多粘菌素B(r=0.319,p=0.229),阿米卡星(r=0.441,p=0.088)和亞胺培南(r=0

10、.079,p=0.769)并無相關(guān)性。4.28株MDR-Kpn外排泵基因的檢測中,emrB基因陽性25株,陽性率最高,為89.29%,其次是oqxA基因陽性22株,陽性率為78.57%,qacE△1基因陽性11株,陽性率39.29%,acrA基因陽性10株,陽性率35.71%。28株菌只Kpn215未檢出外排泵基因,只攜帶一種外排泵基因的有4株,占14.29%,同時(shí)攜帶2種外排泵基因的有8株,占28.57%,同時(shí)攜帶3種外排泵基因的有1

11、2株,占42.86%,同時(shí)攜帶4種外排泵基因的有5株,占17.86%。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析,菌株攜帶外排泵基因種類的多少與其生物膜形成能力并無明顯相關(guān)性(P>0.05),4種外排泵基因陽性擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測序后與GenBank中的已提交的相應(yīng)基因序列的同源性均≥98%。5.隨機(jī)選取6株acrA基因陽性的肺炎克雷伯菌,對比生物膜狀態(tài)與浮游狀態(tài)下acrA基因的表達(dá),發(fā)現(xiàn)生物膜狀態(tài)下acrA基因表達(dá)存在不同程度的上調(diào),最高上調(diào)倍數(shù)達(dá)78倍。證明生物膜的形成

12、能夠促進(jìn)外排基因acrA的表達(dá)。6.當(dāng)外排泵抑制劑CCCP濃度在1.25-10μg/ml時(shí),能夠不同程度促進(jìn)肺炎克雷伯菌生物膜形成。
  結(jié)論:
  1.多重耐藥肺炎克雷伯菌檢出率較高,MDR-Kpn僅對美羅培南、亞胺培南、厄他培南、阿米卡星和頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率低,能夠作為肺炎克雷伯菌感染的治療用藥。2.肺炎克雷伯菌生物膜陽性檢出率高,多重耐藥菌與非多重耐藥菌生物膜形成能力無明顯差異,肺炎克雷伯菌形成生物膜后的耐藥能力

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論