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文檔簡介
1、目的:
苯(benzene)不僅是工業(yè)生產(chǎn)中重要的生產(chǎn)原料,也是工業(yè)生產(chǎn)中重要的有機溶劑。同時,苯作為居室的裝修材料,在日常生活中被廣泛應用。近年來,我國職業(yè)性慢性苯中毒發(fā)生率一直高居慢性中毒的前三位,重大惡性職業(yè)中毒事件也常見于報道。苯污染及其對健康的危害已成為亟待解決的重要的公共衛(wèi)生安全和健康問題之一。目前,苯致病的作用機制還未完全闡明。各國學者對于苯中毒進行了大量的研究,以期對苯中毒及苯致白血病的機制有更加全面的認識,篩
2、選苯接觸及中毒效應的生物標志物,但由于其發(fā)病機制復雜,涉及多種致病因素和環(huán)節(jié),研究一直未能取得突破性進展。本研究有兩個目的:了解苯對機體血清蛋白質變化的影響,有助于尋找關鍵蛋白和標志蛋白,對于闡明疾病發(fā)生機制、尋找早期生物監(jiān)測指標以及藥物治療靶標具有重要意義;了解職業(yè)性慢性苯中毒的發(fā)病特點、疾病變化規(guī)律,對于闡明疾病發(fā)生機制具有重要意義。
方法:
?、挪杉?例正常對照和18例職業(yè)性慢性苯中毒不同中毒程度的血清樣品,其中
3、職業(yè)性慢性輕度苯中毒、中度苯中毒及重度苯中毒各6例。血清樣品去除白蛋白和IgG后,對血清蛋白質定量及熒光標記,再進行雙向熒光差異凝膠電泳(two-dimensional fluorescence differential gel electrophoresis,2D-DIGE)。以DeCyder V6.5軟件分析得出有顯著差異的蛋白質點,以基質輔助激光解吸離子飛行時間串聯(lián)質譜(MALDL-TOF-MS)鑒定差異蛋白質。根據(jù)差異蛋白的生物
4、學過程、生物學功能及與苯的相關性,選擇有重要意義的差異蛋白,通過免疫比濁法對篩選出的差異蛋白進行驗證。⑵采集職業(yè)性慢性苯中毒患者及正常健康體檢者全血、血清標本,進行實驗室檢查,包括血常規(guī)及肝功能的檢測;查閱職業(yè)性慢性苯中毒患者所有病歷,收集患者的臨床資料,包括一般情況、臨床癥狀、體格檢查、治療方法等進行分析,找出其發(fā)病特點、疾病變化規(guī)律,觀察職業(yè)暴露與發(fā)病之間的關系。
結果:
?、俳⒘寺殬I(yè)性慢性苯中毒患者不同中毒程度
5、和正常對照血清樣品的2D-DIGE圖譜,其中輕度中毒與正常對照、中度中毒與正常對照、重度中毒與正常對照、中度中毒與輕度中毒、重度中毒與輕度中毒以及重度中毒與中度中毒之間比較分別存在4、11、6、1、0和4個差異表達的蛋白質點,共計19個顯著差異表達的蛋白質點。經(jīng)MALDI-TOF-MS鑒定的19個蛋白點,屬于10種蛋白質。輕度中毒與正常對照相比,表達上調(diào)的蛋白是:載脂蛋白A-I和a1-抗胰蛋白酶;中度中毒與正常對照相比,表達上調(diào)的蛋白是
6、:載脂蛋白A-I、a1-抗胰蛋白酶、激肽原-1、補體C3、甲狀腺素運載蛋白和a1-抗胰糜蛋白酶;重度中毒與正常對照相比,表達上調(diào)的蛋白是:載脂蛋白A-I、a1-抗胰糜蛋白酶、補體C3、玻連蛋白和凝聚素;中度中毒與輕度中毒相比表達上調(diào)的蛋白是:甲狀腺素運載蛋白;重度中毒與中度中毒相比,表達下調(diào)的蛋白是:血清淀粉樣蛋白P和結合珠蛋白。免疫比濁法驗證了Alpha-1-antitrypsin、Apolipoprotein A-I和Complem
7、ent C3在各組間的差異表達,趨勢與2D-DIGE相一致。②職業(yè)性慢性苯中毒患者中大部分自訴癥狀為頭昏、頭痛、乏力、睡眠差(失眠、多夢)等神經(jīng)衰弱綜合癥,個別患者可有四肢疼痛及視物模糊等體征。造血系統(tǒng)的主要癥狀為牙齦出血、皮下出血等。患者確診后即脫離苯接觸,住院治療。對慢性輕度苯中毒患給予一般支持療法;慢性中度苯中毒患者除了一般支持療法外,視具體情況給予人類白細胞集落刺激因子或輸血治療等;慢性重度苯中毒患者除了一般支持療法外,給予人類
8、白細胞集落刺激因子、糖皮質激素、雄激素、丙種球蛋白、抗生素以及反復輸注紅細胞懸液和血小板等。輕度苯中毒、中度苯中毒、重度苯中毒的白細胞、中性粒細胞、總蛋白、白蛋白及球蛋白結果均低于正常對照;輕度苯中毒、中度苯中毒、重度苯中毒間紅細胞計數(shù)逐漸減少,且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:
⑴鑒定了10種與職業(yè)性慢性苯中毒程度(輕、中、重)相關的差異蛋白;篩選的血清差異蛋白功能與機體炎癥反應、脂質代謝紊亂及認知功能
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