肝癌細(xì)胞DNA-AgNCs對兩類藥物的研究及其miRNA-122的檢測.pdf

1、癌癥是嚴(yán)重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病，而肝癌是世界上第三大最常見的和腫瘤死亡有關(guān)的疾病，占所有癌癥的7％，其中肝細(xì)胞性肝癌在我國占原發(fā)性肝癌的90％。全球每年約有50-100萬人因肝癌致死，并且有逐年上升的趨勢。最近的研究表明，肝癌是一種成體干細(xì)胞疾病，從肝癌實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ涂闯鏊赡苤辽儆腥齻€不同的對致瘤性轉(zhuǎn)化起作用的起源特性譜系。流行病學(xué)資料顯示，人類因癌癥而引起的死亡率僅次于心腦血管疾病。因此肝癌的及早發(fā)現(xiàn)和抗癌新藥的研發(fā)顯得格外重要。

2、本論文在國家自科基金項(xiàng)目資助下展開，采用肝癌細(xì)胞DNA為模板合成的Ag NCs探針，研究了其對蒽醌類藥物和新型銥配合物的影響，并用功能化的介孔硅檢測了miRNA-122，為抗癌藥物的研發(fā)和肝癌的及早發(fā)現(xiàn)提供了新的思路和方法。其主要內(nèi)容如下：
　　1.采用SMMC-7721肝癌細(xì)胞DNA為模板合成的Ag NCs作為光譜探針，構(gòu)建了DNA/Ag NCs探針-藥物體系，結(jié)合共振光散射光譜、熒光光譜法等化學(xué)分析方法對蒽醌類化合物進(jìn)行了研究

3、。研究了DNA/Ag NCs對四種蒽醌類抗癌藥物的作用，并對其機(jī)理進(jìn)行了初步的探討。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：DNA/Ag NCs和蒽醌類抗癌藥物通過靜電作用和疏水作用形成聚集體，進(jìn)一步插入DNA堿基對平面間形成更大的超分子化合物，從而影響DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄功能。同時，利用MTT法和細(xì)胞凋亡等生物實(shí)驗(yàn)方法對光分析法進(jìn)行了驗(yàn)證，進(jìn)一步證明了光譜法的可行性。
　　2.采用熒光光譜法和共振光散射光譜法對DNA/Ag NCs和IrL進(jìn)行了定量的分析。

4、在分子水平上實(shí)現(xiàn)了對此體系的體外研究，并對其作用機(jī)理進(jìn)行了初步的探討。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：DNA/Ag NCs與IrL相互作用，IrL通過插入DNA/Ag NCs的堿基對間形成大的聚集體，使DNA/Ag NCs光譜發(fā)生變化，從而達(dá)到對IrL的定量分析，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究了兩種銥配合物的抗癌活性。
　　3.采用功能化的介孔硅納米粒子，通過共振光散射光譜法對低濃度的miRNA進(jìn)行了檢測。在MSNs上修飾與目標(biāo)miRNA互補(bǔ)的DNA核酸探針(