聯(lián)合應用bFGF、PDGF對大鼠脛骨骨折愈合的影響.pdf

1、目的：
　　研究局部聯(lián)合應用外源性堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、血小板衍生生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）對大鼠脛骨骨折愈合過程的影響作用，為臨床早期治療骨折延遲愈合或不愈合提供實驗參考。
　　方法：
　　清潔級成熟雄性SD大鼠48只，隨機分成4組：A組（bFGF）、B組（PDGF）、C組（bFGF+P

2、DGF）、D組（空白對照組）。每組各12只。各組實驗動物按無菌操作要求建立左脛骨中段骨折模型并應用1mm克氏針行髓內(nèi)內(nèi)固定治療。A組、B組及C組大鼠均于術(shù)后第3天，在骨折斷端周圍經(jīng)皮注射藥物，1次/d，連續(xù)7天，各組給藥方式如下：A組（100ng bFGF+0.3ml生理鹽水）；B組（100ng PDGF+0.3ml生理鹽水）；C組（100ng bFGF+100ng PDGF+0.3ml生理鹽水）。D組則于骨折斷端周圍經(jīng)皮注射等量生理鹽

3、水，給藥時間及次數(shù)均同于其他組。各組分別于術(shù)后2周及4周隨機抽選6只大鼠行股動脈取血并處死，X線照片觀察骨折愈合情況，取骨折局部大體標本部分骨痂進行研磨、離心處理，留取上清液，并采用ELISA法測定骨痂標本中ALP的含量。另取部分骨痂脫鈣后進行HE染色組織學觀察，并測定骨痂中骨小梁成骨指數(shù)IOB及平均骨小梁寬度。采用蛋白質(zhì)芯片技術(shù)測定2周及4周時大鼠血清中VEGF、BMP-2及IGF-1的含量。
　　結(jié)果：
　　1術(shù)后2周及

4、4周，大體標本表明：A組、B組及C組在新生質(zhì)硬組織大小、硬度方面及骨痂成熟程度、穩(wěn)定性方面大于D組，C組則明顯優(yōu)于其他各組。
　　2術(shù)后2周X線示： C組大鼠骨折處局部骨折線模糊，骨折間隙較其他組小，斷端可見片狀模糊高密度影；A組和B組大鼠骨折處局部骨折線可見，較D組稍模糊，其斷端可見條索狀低密度影。術(shù)后4周X線示：C組大鼠骨折線消失，可見梭行外生骨痂影，形成骨橋并橋接骨折兩端；A組和B組大鼠骨折線基本消失，骨折斷端變鈍，

5、　　可見高密度外骨痂形成并連接骨折兩端；D組大鼠骨折線仍清楚可見，骨折斷端間隙較2周時縮小。
　　3組織學觀察發(fā)現(xiàn)：術(shù)后2周時，C組切片有軟骨骨痂和纖維骨痂形成，其中軟骨痂較明顯，軟骨細胞增生活躍，新生骨小梁及血管較其他組明顯；A組和B組也見纖維骨痂和軟骨骨痂形成，其纖維骨痂相對明顯；D組則以纖維骨痂為主。術(shù)后4周時，C組大鼠骨小梁基本成熟，可見較多成熟板層骨，髓腔內(nèi)出現(xiàn)大量骨髓細胞；A組和B組大鼠可見明顯的條索狀軟骨鈣化，骨小梁

6、增多，可見部分成熟板層骨形成，髓腔內(nèi)可見部分骨髓細胞；D組纖維骨痂較2周時減少，軟骨骨痂增多，成骨細胞增生活躍。骨痂分析：術(shù)后2周及4周時，C組骨痂內(nèi)骨小梁成骨指數(shù)明顯高于其他各組且有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），A組及B組高于對照組D組，但小于C組，差異顯著存在且有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　4 ELISA法測定骨痂中ALP的含量示： C組大鼠患肢骨痂內(nèi)ALP的含量于術(shù)后2周及4周時在各組中均為最高，且比較差異具有統(tǒng)計學意義

7、（P＜0.05）；術(shù)后2周時A組及B組高于D組并小于C組，且差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。術(shù)后4周時A組、B組及D組各組間無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　5血清生化指標結(jié)果示：術(shù)后2周時，A、B、C三組大鼠血清中VEGF的含量均高于對照組D組，且差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；C組最高，其次為B＞A＞D組。術(shù)后4周時：C組血清中VEGF的含量仍為四組中最高（P＜0.05），余三組間無明顯統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。術(shù)

8、后2周時C組大鼠血清BMP-2的含量高于其他組（P＜0.05），B組大鼠血清BMP-2的含量高于A組和D組（P＜0.05）。術(shù)后4周時各組間無統(tǒng)計學差異。術(shù)后2周時，大鼠血清中IGF-1的含量為C組＞B組＞A組＞D組，（P＜0.05）。術(shù)后4周時A、B及D組小于C組（P＜0.05），但A、B、D三組間無明顯統(tǒng)計差異。
　　結(jié)論：
　　1局部單獨注射外源性堿性成纖維細胞生長因子或血小板衍生生長因子可以促進大鼠脛骨骨折愈合，且聯(lián)