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文檔簡介
1、目的:
在全球范圍內最常見的惡性腫瘤中,胃癌的發(fā)病率較前有所下降,目前排在第四位,但在世界范圍內胃癌病例發(fā)生數(shù)中我國仍占42%,在東亞地區(qū)(包括中國/蒙古/俄國/朝鮮/韓國/日本等國家)常見的癌癥中排名第一。目前,胃癌病人多能選擇化學治療及行手術治療,但其5年生存率仍位于50%左右,導致其死亡的主要原因之一是癌組織的浸潤和轉移[1]??梢姡私庀嚓P的分子調控機制在胃癌的發(fā)生、浸潤和轉移過程中的情況并對其進行早期干預及早期預測,
2、對于制定相關治療方案、改善患者預后是有積極意義的。研究發(fā)現(xiàn),成熟的胃癌細胞會高表達趨化因子受體CXCR4,趨化因子受體CXCR4與其配體趨化因子CXCL12構成的CXCL12-CXCR4生物學軸,與腫瘤細胞的增值、散播、免疫排斥反應及腫瘤的新生血管的形成有關,但其對胃癌細胞的抗凋亡作用機制尚不明確[2]。因此,我們利用穩(wěn)定表達CXCR4的SGC-7901胃癌細胞,研究CXCL12-CXCR4生物軸對胃癌細胞的抗凋亡機制的影響。
3、 表達CXCR4的SGC7901胃癌細胞在CXCL12的作用下會激活PI3K/Akt信號途徑,增強胃癌細胞的抗凋亡作用。
方法:
1.第一部分:穩(wěn)定表達CXCR4的人胃癌細胞SGC7901培養(yǎng)成熟,傳代48h后,取對數(shù)生長期細胞,改換0.1%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng),分為對照組與實驗組,對照組加入緩沖液,實驗組加入CXCL12(100ng/mL)繼續(xù)培養(yǎng),24h后采用流式細胞術分別檢測其凋亡率,檢測重復三次。
2
4、.第二部分:將第一部分所培養(yǎng)的加入CXCL12試劑的胃癌細胞的繼續(xù)培養(yǎng)后,分為實驗組和對照組,對照組加入緩沖液,實驗組加入PI3K抑制劑LY294002(100nmol/ml)處理1h,采用流式細胞術檢測其凋亡率,檢測重復三次。
結果:
1流式細胞儀檢測加入CXCL12試劑的SGC-7901胃癌細胞的和不加入CXCL12試劑的SGC-7901胃癌細胞的凋亡率,分別為11.40±2.25、2.53±1.18,兩者之間差
5、異具有統(tǒng)計學意義(t=6.034,P=0.004)。
2流式細胞儀檢測不加入PI3K抑制劑LY294002的第一部分培養(yǎng)的SGC-7901胃癌細胞的和加入 PI3K抑制劑 LY294002的胃癌細胞的凋亡率,分別為2.47±1.15%、6.61±1.37%,兩者之間的差異具有統(tǒng)計學意義(t=3.999,P=0.016)。
結論:
本實驗證明CXCL12-CXCR4生物軸通過激活PI3K/Akt信號通路來介導
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