CXCR4介導(dǎo)的胃癌細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　在全球范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤中，胃癌的發(fā)病率較前有所下降，目前排在第四位，但在世界范圍內(nèi)胃癌病例發(fā)生數(shù)中我國仍占42％，在東亞地區(qū)(包括中國/蒙古/俄國/朝鮮/韓國/日本等國家)常見的癌癥中排名第一。目前，胃癌病人多能選擇化學(xué)治療及行手術(shù)治療,但其5年生存率仍位于50％左右,導(dǎo)致其死亡的主要原因之一是癌組織的浸潤和轉(zhuǎn)移[1]。可見，了解相關(guān)的分子調(diào)控機(jī)制在胃癌的發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移過程中的情況并對(duì)其進(jìn)行早期干預(yù)及早期預(yù)測(cè),

2、對(duì)于制定相關(guān)治療方案、改善患者預(yù)后是有積極意義的。研究發(fā)現(xiàn),成熟的胃癌細(xì)胞會(huì)高表達(dá)趨化因子受體CXCR4，趨化因子受體CXCR4與其配體趨化因子CXCL12構(gòu)成的CXCL12-CXCR4生物學(xué)軸，與腫瘤細(xì)胞的增值、散播、免疫排斥反應(yīng)及腫瘤的新生血管的形成有關(guān),但其對(duì)胃癌細(xì)胞的抗凋亡作用機(jī)制尚不明確[2]。因此，我們利用穩(wěn)定表達(dá)CXCR4的SGC-7901胃癌細(xì)胞，研究CXCL12-CXCR4生物軸對(duì)胃癌細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制的影響。
　

3、　表達(dá)CXCR4的SGC7901胃癌細(xì)胞在CXCL12的作用下會(huì)激活PI3K/Akt信號(hào)途徑，增強(qiáng)胃癌細(xì)胞的抗凋亡作用。
　　方法：
　　1.第一部分:穩(wěn)定表達(dá)CXCR4的人胃癌細(xì)胞SGC7901培養(yǎng)成熟，傳代48h后，取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，改換0.1%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)，分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組加入緩沖液，實(shí)驗(yàn)組加入CXCL12（100ng/mL）繼續(xù)培養(yǎng)，24h后采用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)其凋亡率，檢測(cè)重復(fù)三次。
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4、.第二部分:將第一部分所培養(yǎng)的加入CXCL12試劑的胃癌細(xì)胞的繼續(xù)培養(yǎng)后，分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，對(duì)照組加入緩沖液，實(shí)驗(yàn)組加入PI3K抑制劑LY294002（100nmol/ml）處理1h，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其凋亡率，檢測(cè)重復(fù)三次。
　　結(jié)果：
　　1流式細(xì)胞儀檢測(cè)加入CXCL12試劑的SGC-7901胃癌細(xì)胞的和不加入CXCL12試劑的SGC-7901胃癌細(xì)胞的凋亡率，分別為11.40±2.25、2.53±1.18，兩者之間差

5、異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.034，P=0.004)。
　　2流式細(xì)胞儀檢測(cè)不加入PI3K抑制劑LY294002的第一部分培養(yǎng)的SGC-7901胃癌細(xì)胞的和加入 PI3K抑制劑 LY294002的胃癌細(xì)胞的凋亡率，分別為2.47±1.15%、6.61±1.37%，兩者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.999，P=0.016)。
　　結(jié)論：
　　本實(shí)驗(yàn)證明CXCL12-CXCR4生物軸通過激活PI3K/Akt信號(hào)通路來介導(dǎo)