膽堿與帕瑞昔布鈉聯(lián)合應(yīng)用在急慢性疼痛模型中的鎮(zhèn)痛效應(yīng)及其機制.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 膽堿與帕瑞昔布鈉在急性醋酸扭體模型中的協(xié)同鎮(zhèn)痛作用其機制
　　目的：探討膽堿和帕瑞昔布鈉在鎮(zhèn)痛中的互相作用并對其機制進行簡單研究。
　　方法：醋酸扭體模型：昆明小鼠，150只，雄性，隨機分為4組：(1)對照組(S)（n=10）：尾靜脈注射0.9％的生理鹽水0.2mL/20g;(2)膽堿組(C)(n=50)：50只小鼠設(shè)立5個劑量即3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg

2、、24mg/kg、48mg/kg;(3)特耐組(P)(n=50)：50只小鼠設(shè)立5個劑量即1.5mg/kg、3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg、24mg/kg;(4)聯(lián)合用藥組(C+P)(n=40)：40只小鼠設(shè)立4個劑量，分別為兩藥ED50的1/2、1/4、1/8、1/16，進而可求出兩藥合用時的ED50。所有藥物均在造模前經(jīng)尾靜脈給予。膽堿給藥時間為造模前2h，帕瑞昔布鈉為30min。研究生理鹽水對照組(S)、ED50膽堿組

3、(C)、ED50帕瑞昔布鈉組(P)、以及1/2ED50膽堿和帕瑞昔布鈉組[1/2(C+P)]對醋酸扭體模型小鼠血中細胞因子和炎癥介質(zhì)的影響。藥物預(yù)處理時間同上，在腹腔給予醋酸后10min立即實施摘眼球采血。所采血液采用ELISA試劑盒檢測IL-1、TNF-α、PGE2、NF-kB、I-kB的含量。
　　結(jié)果：(1)醋酸扭體模型中，膽堿和帕瑞昔布鈉單獨經(jīng)尾靜脈給藥后所得的ED50，膽堿8.64mg/kg，帕瑞昔布鈉6.33mg/kg

4、;二者聯(lián)合用藥時膽堿為2.13mg/kg，帕瑞昔布鈉為1.56mg/kg。(2)在等輻射圖見膽堿與帕瑞昔布鈉合用時的ED50實測值落在理論值的下方，兩點作t檢驗的P＜0.05。聯(lián)合用藥指數(shù)CI＜0.9。(3)與S組比較，C組、P組、1/2(C+P)組中IL-1、TNF-α的含量均降低（P＜0.05），且1/2(C+P)組比C組及P組分別單獨使用降低更加明顯(P＜0.05);P組以及1/2(C+P)組中PGE2含量較對照組均有降低(P＜0

5、.05)，1/2(C+P)組與C組相比PGE2含量下降更多(P＜0.05);與S組相比，NF-kB的含量在C組、P組、1/2(C+P)組中均降低（P＜0.05），I-kB的含量在1/2(C+P)組及C組中出現(xiàn)有統(tǒng)計學(xué)意義的降低，NF-kB、I-kB在1/2(C+P)組中較P組有更明顯降低（P＜0.05）。
　　小結(jié)：膽堿與帕瑞昔布鈉共同作用于急性醋酸扭體模型中較兩藥分別使用，可以增加鎮(zhèn)痛效果，并減少單藥使用劑量，同時更好地降低血中

6、炎癥因子的含量。
　　第二部分 膽堿與帕瑞昔布鈉聯(lián)合應(yīng)用對CCI大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)
　　目的：觀察膽堿與帕瑞昔布鈉對慢性坐骨神經(jīng)損傷神經(jīng)病理性疼痛模型(CCI)大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)及脊髓HMGB1蛋白與NF-κBp65的表達，并對其可能的機制進行探討。
　　方法：1.健康雄性SD大鼠，體重180-220g，隨機分為5組(n=8)，生理鹽水治療假手術(shù)組（sham組）大鼠腹腔注射相同容量的0.9％氯化鈉溶液;生理鹽水治療CCI組（C

7、CI+saline組）大鼠腹腔注射相同容量的0.9％氯化鈉溶液;膽堿(cho)治療CCI組大鼠腹腔注射膽堿6mg/kg，12mg/kg，24mg/kg;帕瑞昔布鈉(pare)治療CCI組大鼠腹腔注射帕瑞昔布鈉3mg/kg，6mg/kg，12mg/kg;膽堿與帕瑞昔布鈉聯(lián)用治療CCI組大鼠在確定無效劑量后，合用。各組均進行相應(yīng)處理，并連續(xù)給藥7天。所有大鼠均在術(shù)前、術(shù)后第3、5、7、10、14天進行測試。周藥組在注射藥物后30min測定大

8、鼠的疼痛閾值。2.另取30只SD大鼠，分為5組，即sham組，CCI+saline,CCI+choline6mg/kg,CCI+parecoxib3mg/kg,CCI+choline6mg/kg+parecoxib3mg/kg，造模成功后，連續(xù)給藥7天，每組隨機選取5只大鼠取L4-6節(jié)段脊髓背根神經(jīng)節(jié)，用Western blot檢測HMGB1蛋白及NF-κBp65。
　　結(jié)果：1.膽堿12mg/kg和24mg/kg劑量與模型組相比

9、能夠顯著減少機械性異常性疼痛及熱痛覺過敏(P＜0.05)，而6mg/kg對CCI大鼠機械痛及熱痛無明顯作用(圖1-2A);2.帕瑞昔布鈉6mg/kg和12mg/kg與模型組相比均有明顯的抗異常性疼痛的作用（P＜0.05），但是3mg/kg沒有觀察到其抗異常性傷害的作用（圖1-2B）;3.膽堿6mg/kg和帕瑞昔布鈉3mg/kg聯(lián)合應(yīng)用于CCI模型較生理鹽水治療的模型組產(chǎn)生顯著的抗傷害作用（P＜0.05）（圖3A-B）;4.膽堿與帕瑞昔布

10、鈉聯(lián)合應(yīng)用與模型組相比，其脊髓HMGB1蛋白及NF-κBp65的表達顯著降低(P＜0.05)（圖4）。
　　小結(jié)：在慢性神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型中，膽堿與帕瑞昔布鈉分別在無痛劑量下聯(lián)合使用表現(xiàn)出顯著的抗機械痛及熱痛的作用;同時脊髓HMGB1蛋白及NF-κBp65的表達也顯著降低。
　　結(jié)論：1.膽堿與帕瑞昔布鈉分別單獨使用能夠降低急性醋酸扭體模型小鼠的扭體次數(shù)，且這一作用呈劑量依賴性。2.膽堿與帕瑞昔布鈉在急性醋酸扭體模型中聯(lián)