CB1受體在慢性間歇低氧大鼠模型骨代謝異常中的作用機制.pdf

1、目的：
　　觀察內源性大麻素系統(tǒng)(ECs)中大麻素受體1（CB1R)在骨組織中的表達情況及干預后CB1R表達的變化趨勢并行骨源性TRAP酶含量測定，探討使用CB1R拮抗劑利莫那班干預后能否減輕CIH大鼠發(fā)生骨代謝紊亂及骨結構異常的風險。
　　方法：
　　選取48只雄性SD大鼠，建立OSAS典型的病理模型-慢性間歇低氧（CIH）實驗動物模型，按不同的暴露方法及循環(huán)時間隨機均分為6組，即4、6W低氧組（IH），4、6W對照

2、組（ON），4、6W低氧干預組（HI），其中HI組在造模前給予腹腔注射CB1R拮抗劑1.5mg/kg/d進行低氧干預。在實驗的4、6W時隨機抽取一半大鼠終止實驗，采取股靜脈血5ml，靜置1h經(jīng)離心機離心取上清血清行TRAP含量的測定方法采用ELASA法；然后截取各組大鼠骨組織，用脫鈣液浸泡至組織變軟后，經(jīng)石蠟機包埋后在切片機下切成厚薄均一的骨組織放于載玻片上，進行HE染色，于光鏡下觀察骨微結構有無變化；骨組織CB1R的表達情況使用免疫組

3、化法觀察并測定。
　　結果：
　?。?）TRAP測定：造模后，4W及6W-IH組TRAP水平均高于造模前的4、6W-ON組，有統(tǒng)計學差異性(t=-7.930，P＜0.001)，而ON組之間TRAP活性水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（t=-1.273，P=0.224）；干預后，4W及6W-HI組TRAP水平均低于干預前的4、6W-IH組，有統(tǒng)計學差異性(t=-7.930，P＜0.001)，以上結果提示增加低氧時間后TRAP水平可較

4、正常時升高，而采取干預措施后，TRAP水平會隨干預時間的延長而逐漸降低，統(tǒng)計存在明顯差異性（P＜0.001）。
　?。?）骨組織HE染色：ON組可見形態(tài)正常的骨細胞，觀察到了結構與數(shù)目保持完整的骨小梁；4IH組骨細胞出現(xiàn)輕微的水腫，骨小梁的數(shù)目有缺失，結構遭到破壞；4HI組骨細胞形態(tài)變化、骨小梁數(shù)量和結構破壞稍有好轉，以上提示4、6W-ON組之間骨細胞形態(tài)、骨小梁數(shù)量結構均無明顯變化，若增加低氧時間，6IH組骨細胞較4IH形態(tài)變化

5、嚴重，骨小梁數(shù)量及結構損傷范圍較前廣泛，而增加干預時間后，6HI組骨細胞形態(tài)變化及骨小梁結構紊亂程度較4HI有所緩解。
　?。?）骨組織中CB1R的表達情況：①從鏡下觀察到骨組織ON組CB1R陽性表達位于成骨細胞、破骨細胞及骨髓基質細胞的胞漿及胞核中。②在IH組觀察到陽性骨細胞CB1R表達范圍較ON組廣，而經(jīng)過干預后HI組骨細胞CB1R表達范圍較IH組低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）。③ON組之間骨細胞CB1R表達水平差異無

6、統(tǒng)計學意義；延長低氧時間后，IH組骨細胞CB1R表達區(qū)域增大；干預時間增長后，HI組CB1R表達水平降低，統(tǒng)計學有意義(P＜0.001)。
　?。?）相關性分析：Pearson相關分析顯示破骨細胞及成骨細胞CB1R的表達率與骨代謝標志物TRAP活性水平之間均存在正相關性(OC：r值為0.836，P＜0.001， OB：r值為0.806，P＜0.001）。
　　結論：
　　明確了ECs的紊亂的發(fā)生與CIH引起骨代謝及骨結