中介素對UUO大鼠模型血管損傷的影響.pdf

1、目的：
　　研究中介素（Intermedin）在UUO大鼠模型腎臟纖維化進(jìn)展中對微血管損傷的影響。
　　方法：
　?。?）雄性健康Wistar大鼠，體質(zhì)量(200±20)g，72只，隨機(jī)分成假手術(shù)組(n=24)、UUO組(n=24)、和IMD組(n=24，無菌條件下，將IMD8-47溶于200μl生理鹽水后注入微量滲透泵，于大鼠背脊部皮下作一長約l cm縱切口，將泵植入，泵開口朝向鼠背前方，持續(xù)皮下給藥，劑量為100

2、ng·kg-1·h-1)。UUO組、IMD組行UUO術(shù)，假手術(shù)組分離輸尿管不結(jié)扎，造模當(dāng)天開始給藥。
　　（2）各組大鼠分別在術(shù)后7 d、14 d、21d、28d各取6只，留取血液及梗阻側(cè)腎組織標(biāo)本。HE、Masson染色觀察腎組織病理變化；測定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及胱抑素C（CysC）含量；用RT-PCR法檢測腎組織轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、骨形態(tài)蛋白-7（BMP-7）、

3、 E-鈣黏連蛋白（E-cadherin）、血小板反應(yīng)蛋白-1（TSP-1）及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)的mRNA表達(dá)，免疫組化法檢測其蛋白的表達(dá)，并進(jìn)行半定量分析。
　　結(jié)果：
　　（1）腎臟病理改變：光鏡下，HE和Masson染色顯示，假手術(shù)組大鼠的腎臟結(jié)構(gòu)基本正常；UUO組大鼠的腎小管上皮細(xì)胞腫脹甚至發(fā)生空泡變性，腎小管呈現(xiàn)萎縮、管腔閉塞或擴(kuò)張現(xiàn)象，有彌漫的單核和淋巴細(xì)胞浸潤，間質(zhì)也增寬，成纖維細(xì)胞已增生，膠原纖維變多

4、且纖維化形成，微血管管腔大部分被壓縮或解體，或擴(kuò)張，管腔結(jié)構(gòu)甚至消失，被纖維化產(chǎn)物所取代，纖維化程度明顯，小管間質(zhì)損害加重。與UUO組相比，IMD組腎小管損害、間質(zhì)纖維化程度均較輕；
　?。?）血BUN、Scr、CysC含量：與假手術(shù)組相比，不同時間點UUO組大鼠血BUN、Scr、CysC升高(P<0．01)；與UUO組相比，IMD組血BUN、Scr、CysC降低(P　?。?）TGF-β1、α-SMA、BMP

5、-7、E-cadherin在腎組織的表達(dá)：RT-PCR和免疫組化結(jié)果顯示，各組大鼠術(shù)后4個不同時間點TGF-β1、α-SMAmRNA相對表達(dá)水平和染色陽性面積平均光密度與假手術(shù)組相比顯著增加（P<0.01)，與UUO組相比，IMD組減少(P<0.05)；BMP-7、E-cadherin比假手術(shù)組相比均減少(P<0.05)，IMD組較之UUO組增加（ P<0.05)；
　　(4)TSP-1及VEGF在腎組織的表達(dá)：各組大鼠術(shù)后4個不