巴沙魚皮膠原支架在兔顱骨缺損再生中的研究.pdf

1、研究目的:對巴沙魚皮的組成成分和性質(zhì)進行分析，評估巴沙魚皮是否可作為膠原蛋白原來來源的可能性。利用凍干巴沙魚皮制備出一種主要成分為膠原蛋白的膜狀支架材料。分析該材料的相關理化性能，觀察該材料在兔顱骨缺損的引導骨再生術中的效果，分析其作為引導骨再生屏障膜的可行性，為巴沙魚皮膠原蛋白支架作為引導骨再生屏障膜應用于臨床提供理論依據(jù)和可能性，以探索巴沙魚皮是否可以成為膠原支架材料的新來源。
　　研究方法:對來源于巴沙魚皮所提取的膠原蛋白進

2、行成分分析和性質(zhì)的分析。對制備出的巴沙魚皮膠原支架進行理化性能的檢測，主要有肉眼觀察材料的外形，掃描電鏡觀察和分析材料的結(jié)構以及孔隙的大小和分布等，采用液體置換法測定巴沙魚皮膠原支架的孔隙率，使用萬能試驗機測定材料的機械強度。根據(jù)其在磷酸緩沖液中浸泡28d后的失重率來測定該材料的體外降解率。測定該材料的吸水率并觀察該材料在濕潤狀態(tài)下的溶脹情況。通過隨溫度變化導致膠原蛋白黏度變化的特點來測定材料的變性溫度。CCK-8細胞毒性試驗檢測材料是

3、否對生物體有毒性。通過兔子顱骨缺損的引導骨再生實驗初步判斷該材料作為引導骨再生屏障膜的作用效果和潛能。
　　結(jié)果:巴沙魚皮粗蛋白含量為95.20％;膠原蛋白類型主要為I型膠原;與其他魚類相比，巴沙魚皮膠原蛋白中所含的PrO和Hyp占全部氨基酸含量的比例最高;肉眼觀察厚薄均勻。掃描電鏡顯示材料為雙層結(jié)構，一面疏松多孔，孔徑大小不一，分布均勻;另一面光滑，孔隙致密。孔隙率（55.50±1.94）％，厚度(0.66±0.10) mm，抗

4、拉強度(18.82±0.94) MPa。該材料28d的降解率為（80.22％±2.49），48h的吸水率為（379.77％±77.81）。巴沙魚皮膠原蛋白支架的變性溫度為34℃左右，經(jīng)過干熱交聯(lián)后的巴沙魚皮變性溫度可升高至35℃左右。在兔顱骨缺損再生實驗中，巴沙魚皮膠原支架能起到引導骨再生的作用，在缺損區(qū)與皮膚黏膜等軟組織阻隔開，有效保護了缺損區(qū)域，阻擋了纖維細胞的長入，同時為成骨過程提供了支架，促進了再生組織內(nèi)的血管化。最終結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計

5、分析可以發(fā)現(xiàn)巴沙魚皮膠原支架的成骨效果較空白對照組好，比Bio-Gide膜組稍差，證明巴沙魚皮膠原支架具有一定的成骨能力。
　　結(jié)論:巴沙魚皮膠原蛋白支架理化性能穩(wěn)定，表面具有一定的孔隙率，且為雙層結(jié)構，一面粗糙，有較多孔隙，一面光滑致密，符合作為屏障膜的基本結(jié)構要求。吸水性適中，吸水后未見有明顯變形和溶解。穩(wěn)定性良好，降解速率與Bio-Gide膠原膜相比偏高。無細胞毒性，具有良好的生物相容性。在兔顱骨缺損再生術中可起到引導骨再生