阿霉素聯合二甲雙胍應用對人舌癌細胞SCC-15侵襲遷移能力影響的實驗研究.pdf

1、背景:舌癌是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤之一，多數為鱗狀上皮細胞癌，惡性程度高，生長快，浸潤性強，在發(fā)病早期即出現頸部淋巴結轉移，且易復發(fā)，預后較差;嚴重影響人類的身體健康和生活質量。目前舌癌的主要治療手段是以手術擴大切除病灶為主并輔助放化療治療的綜合序列治療，盡管如此，舌癌的轉移及復發(fā)率仍然較高，成為了舌癌治療的重點難點;阿霉素是臨床常用的廣譜抗腫瘤藥物，也是臨床上用于頭頸部鱗狀細胞癌化療的首選藥物之一，臨床化療應用中容易產生耐藥且隨著

2、藥物劑量的增加其不良反應的嚴重程度也隨之增加，這些都限制了惡性腫瘤的化療效果;近年來的觀察及研究發(fā)現廣泛應用于Ⅱ型糖尿病治療的藥物二甲雙胍具有抗腫瘤作用，其藥物安全性高耐受性好，相關研究表明其與多種常用化療藥物聯合使用既能降低化療藥物使用劑量又能達到更好的抗癌作用效果。
　　目的:應用阿霉素聯合二甲雙胍處理體外培養(yǎng)的人舌癌細胞，觀察阿霉素聯合二甲雙胍用藥與其二者單獨用藥相比對人舌癌細胞SCC-15侵襲、遷移能力等方面的影響，并初步

3、探討其可能的機制，為指導舌癌患者術后化療用藥提供理論依據，以期提高舌癌患者術后生存率。
　　方法:體外常規(guī)培養(yǎng)人舌癌SCC-15細胞，給予阿霉素、二甲雙胍及阿霉素聯合二甲雙胍進行干預作為實驗組，無藥物處理作為對照組。采用MTT法檢測對照組及各實驗組細胞存活率的影響;平板克隆形成實驗檢測對照組及各實驗組細胞的體外克隆形成能力;Transwell侵襲小室實驗觀察對照組及各實驗組細胞的體外侵襲能力;劃痕-愈合實驗觀察對照組及各實驗組細胞

4、的體外遷移能力;qRT-PCR檢測并比較對照組與各實驗組細胞內金屬基質蛋白酶MMP-2、MMP-9 mRNA的表達水平。
　　結果:
　　1.人舌癌細胞SCC-15的存活率隨著阿霉素或二甲雙胍濃度的遞增而逐漸下降，與對照組相比，不同濃度阿霉素處理組24、48、72h的F值分別97.641、115.999、128.524;不同濃度二甲雙胍處理組24、48、72h的F值分別152.638、293.524、279.923;與阿霉素

5、或者二甲雙胍單獨用藥相比，二者聯合應用則更為顯著的降低SCC-15細胞的存活率，差異有統(tǒng)計學意義。
　　2.阿霉素、二甲雙胍均能抑制舌癌細胞SCC-15的體外克隆形成能力，與對照組相比，t值分別為-6.242和-14.519;與阿霉素或二甲雙胍單獨用藥相比，二者聯合應用則更顯著抑制SCC-15細胞的體外克隆形成能力，t值分別為-21.354和-13.610。
　　3.與對照組相比，在體外條件下0.05mg/L ADM能促進人

6、舌癌SCC-15細胞的侵襲和遷移能力，t值分別為3.395和4.881;二甲雙胍（5mmol/L MET）則能抑制人舌癌SCC-15細胞的侵襲和遷移能力，t值分別為-4.593和-7.273;與阿霉素、二甲雙胍單獨用藥組相比兩藥聯合應用（0.05mg/L ADM+5mmol/L MET）更為顯著的抑制人舌癌SCC-15細胞的侵襲和遷移能力t值分別為-18.908、-23.655和-5.191、-6.592。
　　4.與對照組相比，

7、阿霉素處理組細胞內MMP-2、MMP-9 mRNA的相對表達量增加，t值分別為32.659、43.246;二甲雙胍處理組細胞內MMP-2、MMP-9 mRNA的相對表達量則明顯降低，t值分別為-23.989、-32.217;與阿霉素、二甲雙胍單獨用藥組相比兩藥聯合應用處理組細胞內MMP-2、 MMP-9 mRNA的相對表達量顯著降低，t值分別為-33.352、-6.669和-67.214、-29.973。
　　結論:
　　1