2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:腫瘤缺氧及細胞間質(zhì)內(nèi)轉化生長因子1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)的表達升高是惡性腫瘤的常見特征,二者均可促進腫瘤轉移的發(fā)生。腫瘤轉移是包括宮頸癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤患者死亡的首要原因。已有研究表明PLOD2基因編碼的賴氨酸羥化酶Ⅱ(LH2)在低氧環(huán)境和TGF-β1的刺激下表達升高,且在乳腺癌、肺癌、肉瘤、宮頸癌等多種腫瘤中高表達,其高表達與腫瘤轉移和不良預后密切相關。
  目的:本

2、次研究的主要目的是通過體外實驗分析PLOD2基因?qū)m頸癌細胞株遷移侵襲能力的影響及其分子機制,并通過體內(nèi)實驗進一步驗證PLOD2基因?qū)m頸癌轉移的促進作用。研究的意義是為宮頸癌的侵襲轉移分子機制研究提供新的信息,為預后分析和分子治療提供新的靶點。
  方法:使用siRNA轉染技術靶向敲除宮頸癌HeLa細胞和SiHa細胞的PLOD2基因,通過Transwell實驗、劃痕實驗、基質(zhì)膠Transwell實驗、黏附實驗等分析PLOD2對細

3、胞遷移、侵襲、粘附能力的影響;采用熒光定量PCR實驗、Western blot實驗、免疫熒光實驗分析基因的表達變化;通過鬼筆環(huán)肽染色等觀察細胞形態(tài)的變化;宮頸癌患者PLOD2基因的表達分析及預后分析通過數(shù)據(jù)庫Oncomine及TCGA獲得。最后,采用慢病毒轉染技術構建穩(wěn)定穩(wěn)定沉默PLOD2基因的HeLa細胞株,通過尾靜脈注射穩(wěn)轉細胞株構建動物轉移模型,并進行小動物活體實驗觀察PLOD2基因?qū)m頸癌細胞轉移的影響。
  結果:低氧環(huán)

4、境及TGF-β1的刺激均可誘導宮頸癌HeLa細胞和SiHa細胞PLOD2基因的表達升高;通過siRNA技術靶向沉默PLOD2可降低細胞的遷移、侵襲和粘附能力,并抑制上皮間質(zhì)轉化(EMT)的發(fā)生以及黏著斑的形成;此外,PLOD2的敲除還可以抑制缺氧誘導的細胞遷移侵襲能力的提高;還可以通過抑制β-catenin的核轉位及AKT的磷酸化,阻遏TGF-β1誘導的EMT樣細胞表型改變。最后,數(shù)據(jù)庫分析結果表明PLOD2基因在宮頸癌患者中高表達且提

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