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文檔簡介
1、南京農業(yè)大學碩士學位論文圓眼珍珠蛙(Lepidobatrachuslaevis)皮膚cDNA文庫的構建、篩選及胰蛋白酶抑制劑的原核表達和活性研究姓名:王玉偉申請學位級別:碩士專業(yè):動物學指導教師:高國富;賴仞201012英文摘要MOLECULARCLONINGPROKARYOTICEXPRESSIONANDCHARACTERIZATIONOFANOVELTRYPSININHIBITORINTHEFROGABSTRACTAmphibian
2、isabiologicaltreasurewithgreatpotentials嬲wellasimportantnaturalresourceswithecological,research,economicandculturalvalueAmphibianisabiologicaltreasurewithgreatpotentialsTobeimportantnaturalresources,theecological,academi
3、c,economicandculturalvaluesofthiskindoforganismbecomemoreandmoreimportantVarietiesofbio—activesubstancesinamphibianskinswhichplayanimportantroleindefenseagainstinvadingfactorshaveattractedtheresearchersallOVertheworldAcc
4、ordingtothespecificactivesiteofresidues,proteaseisdividedintofourcategories:asparticproteases,metalloproteinases,serineproteasesandcysteineproteasesAccordinglytheproteaseinhibitorsaredividedintofourkindsByactionmechanism
5、,serineproteaseinhibitorscanbedividedintothreetypes:canonical,noncanonical,serpin(serineproteaseinhibitors)ThisresearchobjectisLepidobatrachuslaevis,whichistheuniquefroginSouthAmericaWeconstructedit’SskineDNAlibraryandse
6、lecteditbyrandomlysequencingWegottwocandidategenes:Y12,Y334Bya/ninoacidsequencecomparisonY1—2has44%homologywitlltrypsininhibitor(Aedesaegypti)Y334has53%homologywithhemagglutinin(Xenopustropicalis)Thepositionandnumberofth
7、eircysteinesareconsistentwitllthesimilarprotonsBypETexpressionsystemofEco&Y1—2withtrypsininhibitoractivityissuccessfullyexpressedThepurifiedY1—2is61600273daltonsandconsistentwiththepredictionTheKiforY12isabout165178“M,wh
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