RPA1基因多態(tài)性在奧沙利鉑治療結直腸癌敏感性中的研究.pdf

1、結直腸癌（包括結腸癌與直腸癌）是世界上常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，在我國，結直腸癌的發(fā)病率目前已呈逐年上升趨勢，嚴重威脅著人類的健康。盡管目前篩查早期結直腸癌的方法為數(shù)不少，但由于結直腸癌起病隱匿，大部分患者確診時已發(fā)展至中晚期，無法進行手術治療，因而輔助化療已成為結直腸癌治療中不可或缺的手段之一。
　　奧沙利鉑(oxaliplatin)是第三代鉑類化合物，是目前針對中晚期結直腸癌化療聯(lián)合方案的標準藥物之一，其主要原理是通過與脫氧

2、核糖核酸雙鏈共價結合形成鏈間交聯(lián)，阻斷腫瘤細胞DNA的復制和轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。核酸切除修復系統(tǒng)(nucleotide excision repair，NER)是DNA修復的基本通路，修復紫外線所致嘧啶二聚體、脫氧核糖核酸加合物、光化合物等累積性損傷，是清除大劑量鉑類藥所引起的脫氧核糖核酸損傷的重要系統(tǒng)。人類基因組計劃已經(jīng)確認，基因的遺傳與變異會影響基因的結構、功能以及表達，進而改變機體的生物學功能。單核苷酸多態(tài)性(single

3、nucleotide polymorphisms，SNPs)是最常見的基因遺傳變異。能夠改變基因結構或調(diào)節(jié)基因表達量，從而調(diào)控機體的作用。
　　研究發(fā)現(xiàn)，單個SNP作用或多個SNPs間的聯(lián)合作用與腫瘤發(fā)生發(fā)展及預后顯著相關。耐藥現(xiàn)象主要產(chǎn)生于修復系統(tǒng)清除藥物，這是減弱化療藥物療效的主要原因，而DNA修復基因的SNP密切影響著與修復系統(tǒng)的修復能力。迄今為止，已有多篇DNA修復通路SNPs與腫瘤及結直腸癌發(fā)病風險和化療敏感性研究的報道

4、。大量研究結果證實，NER通路與結直腸癌化療敏感性以及生存預后存在潛在的關聯(lián)。
　　方法:本課題通過對166例結直腸癌患者的臨床病例研究，篩選NER通路中可能存在的重要基因遺傳變異，統(tǒng)計其與結直腸癌化療敏感性及生存預后的關聯(lián)，尋找到相關的遺傳變異rs5030740及所在基因RPA1。在此基礎上，通過分子生物學方法研究關鍵基因RPA1及遺傳變異rs5030740對腫瘤細胞的表型影響，進而揭示其在奧沙利鉑化療敏感性及生存預后中的可能機

5、制，為預測結直腸癌化療敏感性及進行個體化治療提供理論依據(jù)。
　　結果:對166個以奧沙利鉑為主要治療方式的結直腸癌患者進行化療敏感性及生存預后與RPA1遺傳變異的關聯(lián)性分析，尋找到相關的遺傳變異rs5030740及所在基因RPA1。課題發(fā)現(xiàn)rs5030740位點T等位基因突變到C等位基因與結直腸癌患者奧沙利鉑化療敏感性降低有關，并且結直腸癌患者用藥后無進展生存期縮短有關。此外，本課題組通過網(wǎng)站預測，數(shù)據(jù)庫分析，細胞學實驗等驗證了r

6、s5030740位點的突變導致了miRNA-let-7e-5p與RPA1基因3'-UTR的結合能力的降低，促使RPA1的表達量上升。最后，課題組通過一系列細胞表型實驗（細胞增殖、周期及凋亡）進一步揭示了RPA1的表達量升高可增加腫瘤細胞的增殖能力，減少細胞凋亡數(shù)目，而這一現(xiàn)象在奧沙利鉑藥物的刺激下，更為明顯。
　　結論:基因rs5030740的突變可能導致miRNA-let-7e-5p的結合能力減弱，RPA1的異常高表達，進而通過