臍血血脂水平和胎盤脂質(zhì)代謝相關(guān)因子表達(dá)與巨大兒發(fā)生的關(guān)系研究.pdf

1、目的：巨大兒（Macrosomia）是指出生體重≥4,000 g的活產(chǎn)新生兒。目前，世界范圍內(nèi)巨大兒的發(fā)生率均呈上升趨勢。巨大兒不僅會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)程延長、剖宮產(chǎn)、增加產(chǎn)后感染和出血的風(fēng)險(xiǎn)，還會(huì)造成新生兒出生窒息、肩難產(chǎn)等損傷，甚至增加其兒童期肥胖、成年后患糖尿病及心血管疾病等的風(fēng)險(xiǎn)。臍血血脂水平可反應(yīng)胎兒脂質(zhì)代謝情況，與胎兒生長發(fā)育密切相關(guān)，兒童的血清脂蛋白分布可以預(yù)測成年人的血清脂蛋白分布。胎兒脂肪酸水平不僅受母體飲食的影響，還受胎盤轉(zhuǎn)運(yùn)和

2、代謝的影響。胎盤轉(zhuǎn)運(yùn)功能異?？赡軐?dǎo)致胎兒血脂水平改變與脂質(zhì)代謝異常，影響胎兒生長發(fā)育，導(dǎo)致巨大兒的發(fā)生。其中長鏈脂肪酸需要通過胎盤中的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)移到胎兒，在人類胎盤中已鑒定出幾種涉及脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝的蛋白：過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARG)脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)、脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(FAT/CD36)、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FATP)等。然而，目前針對巨大兒的研究多集中于妊娠糖尿病（GDM）導(dǎo)致的巨大兒，關(guān)于糖代謝正常產(chǎn)婦生產(chǎn)的巨大兒臍血

3、血脂水平及胎盤脂質(zhì)代謝相關(guān)因子的研究仍然缺乏。因此，本研究擬通過檢測正常妊娠孕婦分娩的巨大兒臍血血脂水平，以及影響血脂轉(zhuǎn)運(yùn)的胎盤脂質(zhì)代謝相關(guān)因子的表達(dá)水平，探討它們與巨大兒發(fā)生的關(guān)系，并分析其與其它孕期因素共同對巨大兒發(fā)生的影響程度，為巨大兒病因?qū)W研究提供新線索。
　　方法：采用病例-對照研究的設(shè)計(jì)方法，連續(xù)收集2014年6月至2015年6月間在溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院行常規(guī)產(chǎn)前檢查并在該院分娩的新生兒及產(chǎn)婦作為研究對象。病例組（

4、巨大兒組）為出生體重≥4000g的新生兒及母親，對照組為出生體重在2500g～3999g，且與巨大兒出生時(shí)間相差3天以內(nèi)隨機(jī)選擇的新生兒及母親。所有對象的入選標(biāo)準(zhǔn)為正常妊娠，單胎、足月分娩，糖耐量試驗(yàn)正常而且新生兒沒有先天性畸形。排除標(biāo)準(zhǔn)包括有妊娠合并癥、有妊娠并發(fā)癥者、新生兒先天畸形者。采用自行設(shè)計(jì)的問卷以及醫(yī)院信息采集系統(tǒng)調(diào)查/收集產(chǎn)婦及新生兒相關(guān)資料。新生兒娩出后，立即采集胎盤、臍血樣本。通過自動(dòng)生化分析儀測定臍血血脂水平，采用比

5、色法游離脂肪酸（NEFA）試劑盒測定臍血游離脂肪酸水平，采用RT-qPCR法和Western Blot法檢測胎盤PPARG, FABP4,FAT/CD36, FATP4mRNA和蛋白的相對表達(dá)量。采用多重線性回歸和廣義線性模型方法分析臍血血脂與胎盤脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝相關(guān)基因表達(dá)的關(guān)系，采用多因素logistic回歸進(jìn)行巨大兒發(fā)生的影響因素分析。數(shù)據(jù)分析應(yīng)用SPSS19.0。
　　結(jié)果：⑴基線資料分析：共收集巨大兒44例和正常出生體重兒

6、45例，基線資料分析結(jié)果顯示，巨大兒組男嬰比例（81.8％ VS51.1%,χ2=9.388,P=0.003）、剖宮產(chǎn)比例（43.18% VS8.9%,χ2=13.652,P＜0.001）、母親分娩年齡（29.66±4.97VS27.62±3.80, t=-2.173,P=0.032）、母親孕期體重增加量（16.53±5.16VS14.11±3.97, Z=-2.475, P=0.015）均有意義地高于對照組，但兩組孕周、孕前BMI、身

7、高和孕前體重未顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。⑵臍血血脂水平分析：巨大兒組甘油三酯（TG）(Z=-2.017, P=0.044),總膽固醇（TC）(Z=-2.069, P=0.039),低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）(Z=-2.513, P=0.012),載脂蛋白A-Ⅰ（ApoA-Ⅰ）(t=2.103, P=0.039)濃度均有意義地低于對照組。⑶臍血游離脂肪酸（ NEFA）水平分析：巨大兒組臍血 NEFA濃度（273.02±134.63μmol/L

8、）有意義地低于對照組（350.03±183.82μmol/L）(t=2.158, P=0.034)。⑷臍血NEFA與血脂水平的相關(guān)分析：分析結(jié)果顯示，兩組均未發(fā)現(xiàn)NEFA與血脂水平之間存在相關(guān)。但是在巨大兒組中，臍血TC與HDL-C（r=0.852，P＜0.01）、LDL-C（r=0.813，P＜0.01）和ApoA-Ⅰ（r=0.786，P＜0.01），HDL-C與LDL-C（r=0.427，P＜0.01）和ApoA-Ⅰ（r=0.899

9、，P＜0.01），LDL-C與ApoA-Ⅰ（r=0.314， P＜0.01）以及，TG與ApoA-Ⅰ（rs=0.404，P＜0.01）均呈正相關(guān)相關(guān)。對照組除不存在TG與ApoA-Ⅰ相關(guān)外，其他相關(guān)均存在。⑸不同性別新生兒臍血血脂和NEFA水平分析：臍血TG, TC, HDL-C, LDL-C, ApoA-Ⅰ, NEFA在男女新生兒各層均未顯示兩組中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。⑹血脂水平與巨大兒發(fā)生關(guān)系的多因素分析：采用多因素logistic回歸模型

10、分析顯示，在控制了新生兒性別、孕周、孕婦生產(chǎn)年齡、孕期體重增量之后，臍血TG濃度高(≥0.35mmol/L)為巨大兒發(fā)生的保護(hù)因素（AOR=0.332,95% CI:0.111-0.988），而長孕周（AOR=1.805,95% CI:1.119-2.911）、男性新生兒（AOR=7.565,95% CI:2.134–26.815）為巨大兒發(fā)生的危險(xiǎn)因素。⑺胎盤脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝相關(guān)因子表達(dá)分析：qPCR結(jié)果顯示，在巨大兒胎盤組織中，PPA

11、RG、FABP4、FAT/CD36 mRNA表達(dá)均高于對照組（P＜0.05），而FATP4表達(dá)在兩組中沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Western Blot結(jié)果顯示，在巨大兒組 PPARG、FAT/CD36蛋白表達(dá)量升高(P＜0.05)，F(xiàn)ABP4、FATP4蛋白表達(dá)量也有上升趨勢，但兩組間比較差異未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用Spearman等級相關(guān)分析胎盤脂肪酸代謝相關(guān)因子 mRNA水平之間的相關(guān)性顯示，巨大兒組中，PPARG與 FABP4和FAT/CD

12、36，F(xiàn)ABP4與FAT/CD36均存在正相關(guān)關(guān)系。對照組中，只有FABP4與FAT/CD36存在正相關(guān)。性別分層分析顯示PPARG和FAT/CD36mRNA在男性新生兒中，巨大兒組的表達(dá)量高于對照組，但在女性新生兒中這一差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FABP4和FATP4在性別分層中，巨大兒和對照組表達(dá)均未顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。⑻胎盤脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝因子基因表達(dá)與巨大兒發(fā)生關(guān)系的多因素分析:采用多因素 logistic回歸分析，在控制了新生兒性別、孕周

13、、孕期體重增量之后，胎盤FAT/CD36基因 mRNA高表達(dá)（2-ΔΔCT＞1.33）為巨大兒發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（AOR=2.971,95% CI:1.031-8.567），且與孕周（AOR=1.804,95% CI:1.139-2.860）、孕期體重增量高（AOR=5.036,95% CI:1.2413–24.487）和男性新生兒（AOR=5.360,95% CI:1.630–17.628）共同影響巨大兒的發(fā)生。⑼胎盤脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝相

14、關(guān)因子mRNA水平與新生兒血脂水平的相關(guān)分析：在巨大兒組中，PPARG的mRNA表達(dá)量與臍血TG含量呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.339, P=0.032），與臍血HDL-C含量呈正相關(guān)(r=0.480, P=0.002)，但是在對照組中均未發(fā)現(xiàn)此相關(guān)。采用多重線性回歸和廣義線性模型校正了妊娠年齡、孕期增重、孕周、新生兒性別、孕前 BMI后，巨大兒胎盤 PPARG mRNA表達(dá)仍然顯著性地影響臍血HDL-C和TG水平，PPARG mRNA表達(dá)量

15、越高臍血HDL-C濃度越高（b=0.283, P＜0.001），PPARG mRNA表達(dá)量越高臍血TG濃度越低（b=-0.093, P=0.034）。
　　結(jié)論：①巨大兒臍血存在血脂代謝異常，其中尤以TG的影響最明顯。臍血TG濃度高是巨大兒發(fā)生的獨(dú)立保護(hù)因素。②巨大兒胎盤脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝相關(guān)因子的表達(dá)水平與正常出生體重兒不同， FAT/CD36基因mRNA高表達(dá)為巨大兒發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。③巨大兒胎盤PPARG表達(dá)水平影響臍血中HD