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文檔簡介
1、哮喘是一種以可逆性氣流受限為特征的氣道慢性炎癥性疾病,以氣管平滑肌細(xì)胞的收縮增強(qiáng)和氣道的興奮性應(yīng)答為主要病理特征,嚴(yán)重威脅著人類健康。荷葉是一種傳統(tǒng)的中草藥,目前研究表明其具有清熱解毒、降血壓降血脂、抑菌抗病毒等多種生物學(xué)活性,使其在全世界被廣泛使用。但荷葉是否對氣管平滑肌功能具有調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制尚不清楚。因此,我們以荷葉生物堿提取物(alkaloids extracts of lotus leaves, AELL)作為研究對象,探究該
2、提取物在氣管平滑肌上的效果及作用機(jī)制。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴選擇80mM KCl作為激動劑,引起小鼠氣管環(huán)預(yù)收縮。我們將0.316 mg/mL~17.8 mg/mL的AELL作用于被預(yù)收縮的氣管環(huán),結(jié)果發(fā)現(xiàn):AELL能夠部分舒張被高K+預(yù)收縮的氣管平滑肌,并且呈劑量依賴性。因為氣管平滑肌的收縮和舒張與細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度有關(guān),所以我們又通過無鈣和生理鈣溶液的轉(zhuǎn)換實驗證明其機(jī)制是AELL阻斷了由高K+引起的外鈣內(nèi)流。進(jìn)而膜片鉗實驗
3、發(fā)現(xiàn)AELL還可以阻斷電壓依賴性的L-型鈣通道(VDLCCs)介導(dǎo)的鈣電流。⑵選擇100μM ACh作為激動劑,引起小鼠氣管環(huán)預(yù)收縮。用0.001 mg/mL~100 mg/mL的AELL作用于被預(yù)收縮的氣管環(huán),結(jié)果發(fā)現(xiàn):AELL能夠部分舒張被ACh預(yù)收縮的氣管平滑肌,并且呈劑量依賴性。因為ACh可以激活 VDLCCs和非選擇性陽離子通道(NCCCs)兩種通道,所以接下來的實驗是在排除了VDLCCs的條件下進(jìn)行的。我們用VDLCCs的特
4、異性阻斷劑硝苯地平阻斷VDLCCs,通過無鈣和生理鈣溶液的轉(zhuǎn)換實驗證明其機(jī)制是AELL阻斷了由 ACh引起的外鈣內(nèi)流。同樣為了驗證我們已經(jīng)得到的結(jié)果,我們又通過了膜片鉗實驗發(fā)現(xiàn)AELL還可以阻斷NSCCs介導(dǎo)的鈣電流。⑶用nuciferine開展了與上述同樣的實驗。結(jié)果顯示:nuciferine可以完全舒張由高K+預(yù)收縮的氣管平滑肌,以及絕大部分地舒張由ACh預(yù)收縮的氣管平滑肌,這種舒張效果也是呈劑量依賴性的。舒張機(jī)制是阻斷由K+和AC
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