天然苦味受體激動(dòng)劑（青蒿琥酯）對(duì)小鼠氣道平滑肌舒張效果的評(píng)價(jià).pdf

1、支氣管哮喘是一種慢性呼吸系統(tǒng)疾病。近年來(lái)，環(huán)境惡化導(dǎo)致哮喘發(fā)病率持續(xù)升高，嚴(yán)重威脅著人類的健康。哮喘病的基本特征是氣道高反應(yīng)性、氣道組織重構(gòu)和氣道炎癥，然而其發(fā)病機(jī)制至今仍不清楚，因此一直以來(lái)針對(duì)哮喘治療一直缺乏行之有效的方法。作為氣道組織的重要組成部分，氣道平滑肌細(xì)胞（Airway smooth muscle cells，ASMCs）在哮喘的病理過(guò)程中起到了重要的作用，其結(jié)構(gòu)改變致使功能發(fā)生變化從而導(dǎo)致氣道平滑肌的生物力學(xué)行為異常，在

2、受到外部過(guò)敏原等刺激時(shí)，發(fā)生氣道高反性（AHR），從而引起氣道持續(xù)性過(guò)度收縮、變窄，引起呼吸困難等功能阻礙。因此，對(duì)氣道平滑肌收縮功能變異的研究正成為目前主流研究方面。
　　研究發(fā)現(xiàn)苦味受體（Bitter taste receptors，TAS2Rs)也存在于氣道平滑肌，并且苦味受體激動(dòng)劑與氣道平滑肌上的苦味受體結(jié)合，可使氣道平滑肌舒張，因此苦味受體激動(dòng)劑可作為治療哮喘的潛在藥物。
　　青蒿琥酯是一種具有抗炎作用的苦味物質(zhì)，

3、對(duì)于以氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性為基本特征的哮喘，可能是一種潛在的治療藥物。
　　為了評(píng)價(jià)青蒿琥酯等苦味受體激動(dòng)劑對(duì)氣道平滑肌的舒張效果，選用原代培養(yǎng)獲得的BALB/c小鼠氣道平滑肌細(xì)胞，觀察給藥之后細(xì)胞力學(xué)行為和胞內(nèi)鈣離子濃度（Intracellular calcium，[Ca2+]i）的變化；通過(guò)檢測(cè)正常BALB/c小鼠給藥之后氣道阻力的變化，將青蒿琥酯的舒張效果與沙丁胺醇和奎寧進(jìn)行比較；建立由卵清蛋白（Ovalbumin，OVA

4、）致敏的小鼠哮喘模型，通過(guò)比較青蒿琥酯對(duì)正常組和哮喘模型組小鼠氣道阻力的影響，以此評(píng)價(jià)青蒿琥酯對(duì)哮喘模型小鼠氣道平滑肌的舒張效果。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　?。?）運(yùn)用組織塊貼壁和酶消化相結(jié)合的方法，并且經(jīng)過(guò)鑒定，成功獲取BALB/c小鼠氣道平滑肌細(xì)胞。
　?。?）通過(guò)傅里葉變換牽引力顯微術(shù)（FTTC），檢測(cè)細(xì)胞牽張力變化。結(jié)果顯示，隨著青蒿琥酯濃度的升高，細(xì)胞的牽張力越來(lái)越小，對(duì)ASMCs舒張效果越強(qiáng)。
　?。?）

5、用Flou-4 AM指示細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化。結(jié)果顯示，隨著青蒿琥酯濃度的升高，[Ca2+]i也隨之升高，與奎寧相比，青蒿琥酯引起的[Ca2+]i更高，持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)。為后續(xù)研究青蒿琥酯對(duì)氣道平滑肌舒張的作用機(jī)制提供指導(dǎo)。
　?。?）不同藥物刺激正常小鼠后，其氣道阻力的變化可通過(guò)小動(dòng)物肺功能測(cè)量?jī)x來(lái)檢測(cè)。結(jié)果顯示，隨著青蒿琥酯濃度的升高，小鼠氣道阻力降低越明顯，即舒張效果越好。與沙丁胺醇、奎寧相比，青蒿琥酯的舒張效果可與其相當(dāng)，可將

6、小鼠氣道阻力由基線的4-5倍，降至2-3倍之間。
　?。?）建立OVA誘導(dǎo)小鼠哮喘模型，檢測(cè)青蒿琥酯對(duì)哮喘模型小鼠氣道阻力的變化。結(jié)果顯示，我們成功建立了小鼠哮喘模型；青蒿琥酯對(duì)于哮喘模型小鼠氣道平滑肌的舒張作用不如對(duì)正常小鼠的好，但是仍有一定的舒張作用。
　　綜上所述，本課題從細(xì)胞水平和動(dòng)物水平兩個(gè)方面，對(duì)青蒿琥酯等苦味受體激動(dòng)劑對(duì)氣道平滑肌的舒張效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，青蒿琥酯能有效舒張氣道平滑肌，是一種潛在的治療哮喘藥