丙酮酸乙酯對(duì)腦缺血再灌注Nrf2-ARE通路和認(rèn)知功能的影響.pdf

1、目的:研究Nrf2-ARE通路在腦缺血再灌注的作用，并觀察丙酮酸乙酯對(duì)腦缺血再灌注后Nrf2-ARE通路、神經(jīng)元線粒體的作用，探討丙酮酸乙酯對(duì)腦缺血再灌注后短期認(rèn)知功能的保護(hù)作用。
　　方法:66只SD大鼠隨機(jī)分為三組，三組為假手術(shù)組、丙酮酸乙酯組以及缺血再灌注組，每組22只，其中的缺血再灌組和丙酮酸乙酯組直接采用二血管阻斷法建造腦組織缺血再灌注的大鼠模型;假手術(shù)組的大鼠采取雙側(cè)的頸總動(dòng)脈鈍性游離分開，但不進(jìn)行血管的夾閉操作。丙酮

2、酸乙酯組于恢復(fù)血流即刻進(jìn)行腹腔注射丙酮酸乙酯，其余兩組給予等量生理鹽水，應(yīng)用水迷宮實(shí)驗(yàn)對(duì)三組大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，評(píng)估認(rèn)知功能;采用RT-PCR檢測(cè)三組大鼠海馬神經(jīng)組織中Nrf2、HO-1、γ-GCS、NQO1的mRNA表達(dá);采用電鏡觀察三組海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)、線粒體的改變。
　　結(jié)果:(1)造模前，三組的水迷宮測(cè)試成績，包括逃避潛伏期、穿環(huán)次數(shù)及T象限游泳距離百分比相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。大鼠造模結(jié)束后第4、

3、7天水迷宮測(cè)試成績，丙酮酸乙酯組以及缺血再灌注組兩組的逃避潛伏期明顯長于假手術(shù)組，而大鼠的穿環(huán)次數(shù)和T象限游泳距離百分比明顯比假手術(shù)組減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);丙酮酸乙酯組大鼠的逃避潛伏期顯著短于缺血再灌注組，而大鼠的穿環(huán)次數(shù)以及T象限游泳距離百分比顯著高于缺血再灌注組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(2)丙酮酸乙酯組以及缺血再灌注組的Nrf2mRNA、HO-1 mRNA、γ-GCSmRNA、NQO1mRNA的含量

4、比假手術(shù)組顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);丙酮酸乙酯組的Nrf2mRNA、HO-1mRNA、γ-GCSmRNA、NQO1mRNA含量高于缺血再灌注組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(3)海馬神經(jīng)細(xì)胞透射電鏡結(jié)果可見，假手術(shù)組:神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)較為規(guī)則，大量線粒體分布在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，清晰整齊的內(nèi)嵴，分布在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，核糖體聚集附在上面，核膜較為完好，可清晰見到核仁、染色質(zhì)，電子透明度顯示較高。缺血再灌注組:神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變

5、，外形顯示不規(guī)則，線粒體出現(xiàn)內(nèi)嵴損傷、裂斷，大量的變性空泡存在，核糖體發(fā)生脫落，可見高電子密度的顆粒分布在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，核膜破裂，染色質(zhì)聚集而不均勻。丙酮酸乙酯組:神經(jīng)細(xì)胞的微結(jié)構(gòu)損傷比缺血再灌注組輕，只有少部分的線粒體破壞，變性空泡較少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)破壞較少，仍可見核仁，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在少量顆粒，其中有少量染色質(zhì)聚集。
　　結(jié)論:(1)丙酮酸乙酯能夠改善腦缺血再灌注后空間學(xué)習(xí)以及記憶能力。(2)丙酮酸乙酯通過提高Nrf2-ARE通路的基