RAAS基因DNA甲基化與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的：1、探索腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS）基因 DNA甲基化水平與原發(fā)性高血壓（essential hypertension，EH）間的關(guān)聯(lián)；2、初步探討 RAAS基因 DNA甲基化水平是否受抗高血壓藥物治療及其他環(huán)境因素的影響，為 EH的預(yù)防、治療和抗高血壓藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)。
　　方法：1、按年齡和性別1:1:1匹配原則，共選取288例寧

2、波市漢族居民進(jìn)行病例對照研究，其中正常對照組96例，未接受過抗高血壓藥物治療的新發(fā)病例組96例，接受過抗高血壓藥物治療的既往病例組96例。通過調(diào)查問卷、常規(guī)體檢及實(shí)驗(yàn)室檢測，獲取研究對象的基線資料、血液樣本及血生化指標(biāo)；
　　2、以焦磷酸測序法檢測 RAAS基因啟動(dòng)子區(qū) CpG位點(diǎn)的甲基化水平。經(jīng)數(shù)據(jù)庫篩選、軟件預(yù)測及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最終確定并檢測了 RAAS中的ACE2、AGTR1、CYP11B2這三個(gè)基因的甲基化水平；
　　

3、3、采用 Logistic回歸和多元線性回歸分析進(jìn)行混雜因素的校正，探討對EH、抗高血壓藥物治療及其他環(huán)境因素敏感的CpG位點(diǎn)。采用廣義多因子降維（generalized multifactor dimensionality reduction，GMDR）法與 Logistic回歸分析探討與EH相關(guān)的潛在交互作用。
　　結(jié)果：1、經(jīng) Logistic回歸多因素分析：（1） A C E2基因：與對照組相比，新發(fā)病例組的CpG4和 C

4、pG5甲基化水平增高（對照組 v s.新發(fā)病例組（％）：CpG4：95.73±9.11 vs.97.56±5.65，odd ratio(OR)=1.119，adjusted P=0.014；CpG5：11.47±3.67 vs.12.75±4.15，OR=1.145，adjusted P=0.041），而既往病例組的C p G1甲基化水平增高（對照組 vs.既往病例組（%）：69.97±2.40 vs.72.13±4.92，OR=1.4

5、65，adjusted P=0.004），且在新發(fā)病例組與既往病例組間，既往病例組的CpG1甲基化水平高于新發(fā)病例組（新發(fā)病例組 vs.既往病例組（%）：69.07±5.09 vs.72.13±4.92，OR=1.121，adjusted P=0.034）；
　　（2） AGTR1基因：與對照組相比，新發(fā)病例組的CpG1甲基化水平降低（對照組 v s.新發(fā)病例組（%）：9.66±5.45 vs.6.74±4.32，OR=0.888

6、，adjusted P=0.040），既往病例組的CpG1甲基化水平也降低（對照組 vs.既往病例組（%）：9.66±5.45 vs.4.99±3.97，OR=0.454，adjusted P=0.027），而在新發(fā)病例組與既往病例組間，未見有差異的C p G位點(diǎn)；（3） CYP11B2基因：未見有差異的CpG位點(diǎn)。
　　2、在正常對照組中，（1） ACE2基因：與男性相比，女性的CpG2甲基化水平降低，CpG5甲基化水平升高（男

7、性 vs.女性（%）：CpG2：36.37±2.22 vs.34.43±2.46，adjusted P=0.009；CpG5：9.00±3.41 vs.13.09±2.88，adjusted P=0.015）；與不吸煙組相比，吸煙組的CpG2甲基化水平升高，CpG5甲基化水平降低（不吸煙組 vs.吸煙組（%）：CpG2：34.96±2.60 vs.36.29±1.93，adjusted P=0.048；CpG5：12.24±3.05 v

8、s.7.88±4.23，adjusted P=0.008）；（2） C Y P11 B2基因：與男性相比，女性的CpG2和 CpG3甲基化水平升高（男性 vs.女性（%）：CpG2：41.42±5.07 vs.45.21±2.52，adjusted P=0.016； CpG3：72.24±1.99 vs.72.63±3.09，adjusted P=0.048）；（3） A G T R1基因：尿酸與 AGTR1基因 CpG1甲基化水平呈負(fù)

9、相關(guān)（r=-0.206，adjusted P=0.023）。
　　3、經(jīng) G M D R法和 Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，AGTR1基因的CpG1、CpG2、CpG4與 ACE2基因的CpG2、CpG3間構(gòu)成5階交互作用（testing balanced accuracy：0.688，cross-validation consistency：8/10，adjusted P=0.011）；AGTR1基因的CpG1與高密度脂蛋白構(gòu)成

10、2階交互作用（testing balanced accuracy：0.748，cross-validation consistency：10/10，P=0.001）。
　　結(jié)論：1、ACE2基因 CpG4和CpG5的高甲基化，AGTR1基因 CpG1的低甲基化是 EH的危險(xiǎn)因素；抗高血壓藥物治療會(huì)改變 ACE2基因 DNA甲基化水平；
　　2、ACE2基因 CpG2、CpG5和CYP11B2基因 CpG2、CpG3的甲基化水