α-內(nèi)收蛋白基因與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：1、本研究旨在尋找α-內(nèi)收蛋白（α-adducin，ADD1）基因上原發(fā)性高血壓的易感性位點(diǎn)，并探索基因與環(huán)境因素之間的交互作用對(duì)原發(fā)性高血壓發(fā)病的影響；2、探索研究ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化水平與原發(fā)性高血壓發(fā)病的關(guān)系，進(jìn)而深入認(rèn)識(shí)原發(fā)性高血壓的病因機(jī)制，為寧波市漢族人群高血壓的預(yù)防和藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。
　　方法：1、以性別、年齡為匹配因素進(jìn)行1:1成組匹配，確定寧波市漢族居民2040人作為病例對(duì)照研究的研究對(duì)象，其

2、中病例組1020例，對(duì)照組1020例。采用調(diào)查問卷的方式獲得研究對(duì)象的個(gè)人信息、身高、體重、吸煙史、飲酒史、疾病史等基本資料，通過實(shí)驗(yàn)室檢查獲得總膽固醇、甘油三酯、血糖、高密度脂蛋白等生化指標(biāo)。運(yùn)用血液基因組DNA提取試劑盒提取DNA，采用Tm-shift基因分型方法檢測(cè)ADD1基因上tagSNP基因多態(tài)性。
　　2、在第一研究階段樣本基礎(chǔ)上，以性別和年齡為匹配條件隨機(jī)抽取33例高血壓患者和33個(gè)正常人作為探索研究ADD1基因啟動(dòng)

3、子區(qū)甲基化水平與原發(fā)性高血壓發(fā)病關(guān)系的研究對(duì)象。運(yùn)用焦磷酸測(cè)序技術(shù)檢測(cè)ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化水平。采用多因子降維法（Multifactor-Dimensionality Reduction，MDR）分析基因與環(huán)境因素之間的交互作用。
　　結(jié)果：1、甘油三酯、體質(zhì)指數(shù)及飲酒情況與高血壓發(fā)病存在關(guān)聯(lián)性（P＜0.05），其中甘油三脂濃度過高者發(fā)生高血壓的危險(xiǎn)是正常者的1.537倍；而肥胖者發(fā)生高血壓的危險(xiǎn)則是體質(zhì)指數(shù)正常者的1.2

4、35倍；另外，飲酒者發(fā)生高血壓的風(fēng)險(xiǎn)是不飲酒者的7.151倍。
　　2、研究表明rs3755885、rs2071694、rs4963及rs3775067的基因型分布與等位基因頻率在病例組和對(duì)照組間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），而rs4961-T等位基因在女性中與原發(fā)性高血壓發(fā)病相關(guān)，且攜帶rs4961-T等位基因的人群患高血壓的風(fēng)險(xiǎn)性是攜帶G等位基因的0.79倍。另外，遺傳學(xué)顯隱性模型分析結(jié)果表明，在男性中rs4961-GT+

5、TT基因型與GG基因型間高血壓發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在顯著性差異，且GT+TT基因型高血壓發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)僅為GG基因型的0.67倍；而在女性中隨著GG、GT、TT基因型的依次變化，高血壓的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)則逐漸降低。
　　3、ADD1基因上tagSNP的單倍型分析結(jié)果表明，rs3755885（C/G）、rs3775067（C/T）、rs4961（G/T）和rs4963（C/G）四個(gè)位點(diǎn)存在遺傳連鎖現(xiàn)象，其中單倍型GCTG是原發(fā)性高血壓發(fā)病的保護(hù)因素（OR=

6、0.86，95％CI=0.76-0.97），而單倍型GTGC（OR=1.47，95%CI=1.20-1.79）和單倍型GCGG（OR=3.08，95%CI=1.93-4.90）是原發(fā)性高血壓發(fā)病的危險(xiǎn)因素。
　　4、MDR分析基因多態(tài)性與環(huán)境因素交互作用結(jié)果表明，體質(zhì)指數(shù)、高密度脂蛋白和飲酒情況三者間在原發(fā)性高血壓的發(fā)病中存在交互作用，但未發(fā)現(xiàn)基因與環(huán)境因素間的交互作用。
　　5、第二部分的研究表明ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化

7、水平在各個(gè)相鄰位點(diǎn)間存在一定的相關(guān)性，其中CpG2至CpG5四個(gè)位點(diǎn)的甲基化水平關(guān)聯(lián)性很強(qiáng)（r>0.80,P<0.01）。
　　6、ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平在男女性別間具有顯著差異，研究表明女性中CpG1位點(diǎn)甲基化水平（WomenversusMen(%)：10.58±2.63versus9.25±1.40，P=0.016）與CpG2-5位點(diǎn)甲基化水平（WomenversusMen(%)：31.16±5.58versus27.

8、17±7.56，P=0.021）顯著高于男性。另外，研究結(jié)果顯示女性中ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平絕經(jīng)前要顯著高于絕經(jīng)后（CpG1:P=0.006; CpG2-5:P=0.034）。
　　7、研究還表明ALT和AST水平在女性中與原發(fā)性高血壓間具有相關(guān)性，且病例組的ALT（EH versus Non-EH：18.7±11.2versus10.8±5.2，P=0.012）和AST水平（EH versus Non-EH：23.4±5

9、.6versus18.7±3.6，P=0.008）要顯著高于對(duì)照組，ALT和AST濃度升高可能是高血壓發(fā)病的危險(xiǎn)因素。
　　8、研究發(fā)現(xiàn)ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)性在男女性別間具有顯著性差異，其中CpG1位點(diǎn)甲基化水平在女性中與高血壓發(fā)病具有顯著相關(guān)性（P=0.042），而CpG2-5位點(diǎn)甲基化水平在男性中與高血壓發(fā)病顯著相關(guān)（P=0.008）。
　　結(jié)論：1、甘油三脂、體質(zhì)指數(shù)及飲酒習(xí)慣是寧波市漢族

10、居民原發(fā)性高血壓的主要危險(xiǎn)因素。
　　2、在女性中rs4961與原發(fā)性高血壓發(fā)病存在相關(guān)性，且攜帶rs4961-T等位基因的人群患高血壓的風(fēng)險(xiǎn)性僅為攜帶G等位基因的0.79倍。
　　3、ADD1基因上rs3755885（C/G）、rs3775067（C/T）、rs4961（G/T）及rs4963（C/G）間存在遺傳連鎖現(xiàn)象，其中單倍型GCTG是高血壓發(fā)病的保護(hù)因素，而單倍型GTGC和單倍型是高血壓發(fā)病的危險(xiǎn)因素。
　　

11、4、體內(nèi)的ALT和AST水平在女性中與原發(fā)性高血壓間具有顯著相關(guān)性，且ALT和AST濃度升高可能是高血壓發(fā)病的危險(xiǎn)因素。
　　5、ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平在男女性別間具有顯著差異，且女性中ADD1基因甲基化水平要高于男性。另外，ADD1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)性在男女性別間也具有顯著性差異，其中CpG1位點(diǎn)甲基化水平在女性中與高血壓發(fā)病具有顯著相關(guān)性，而CpG2-5位點(diǎn)甲基化水平在男性中與高血壓發(fā)病顯著相關(guān)